复合菌种益生菌制剂对蛋鸡生产效果的影响

复合菌种益生菌制剂对蛋鸡生产效果的影响

作为一种新型的绿色添加剂，其环保效果是通过改善微生态平衡对动物产生有益影响。这是微生物饲料的一种可以直接食用的新鲜食品（完整，1989）。它具有无残留、无抗药性、无环境、改善动物生长性能等优点（gaskis等人，2002）。从20世纪90年代开始,益生菌在畜禽生产中的应用与开发已经成为国内外学者研究的热点(Zhao等,2007;Plumed-Ferrer等,2004;范会兰,2009;肖发沂,2008)。Bruno(2007)、唐志刚等(2010)、刘辉等(2009)学者的研究报道表明,益生菌能够促进蛋鸡的生产性能、提高蛋品质、增加抗病能力。从目前的资料来看,益生菌的作用效果,无论是单一菌种的发酵产物还是几种微生物的混合发酵产物,无论是在饮水中添加还是在饲料中添加,都还不太稳定,这主要与益生菌的种类、活菌含量(添加比例)、鸡的日龄和应激等条件有关(吴建忠,2005)。研究结果表明,目前市场上占有率较高的益生菌产品主要是乳酸菌类和枯草芽孢杆菌类产品(赵剑闯等,2010)。单独的枯草芽孢杆菌和乳酸菌在动物生产中的应用效果均有报道(胡长庆等,2008;徐基利等,2010),然而二者组合在一起使用,使用效果的稳定性是否将会得到进一步提高,却鲜有报道。本研究以从鸡肠道内分离筛选的枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌作为益生菌株,利用发酵培养分别制备单一菌种和复合菌种益生菌制剂,在140日龄罗曼褐商品蛋鸡基础日粮上,按照质量比0.1%比例,分别添加不同益生菌制剂,进行蛋鸡产蛋性能、蛋品质及经济效益分析,目的在于探讨单一菌种和复合菌种益生菌制剂对蛋鸡生产效果的影响,为复合益生菌制剂在蛋鸡生产上的应用与推广提供依据。1材料和方法1.1材料表面1.1.1试验细菌鸡源枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌益生菌株,由郑州牧业工程高等专科学校微生物实验室提供。1.1.2试验动物133日龄罗曼褐商品蛋鸡,由开封市尉氏县某蛋鸡养殖场提供。1.1.3硫酸铁、碳酸钙硫酸镁膏鸡源枯草芽孢杆菌活化培养基为营养肉汤培养基,发酵培养基为葡萄糖1.5%、淀粉0.2%、豆粕粉3%、硫酸锰0.1%、磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.05%、酵母膏0.02%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%,pH7.0;乳酸杆菌活化培养基为MRS培养基,发酵培养基为:葡萄糖2.0%、蛋白胨1.0%、牛肉膏0.5%、酵母膏0.5%、蕃茄汁10%,pH5.0。1.1.4hzq型摇床PX-250B型生化培养箱(上海跃进医疗器械厂);HZQ-Q型摇床(哈尔滨东联电子技术开发有限公司);BMR系列中试发酵罐(50L)(上海傲中生物工程设备有限公司)等。1.1.5试验时间和地点试验于2010年10月至2010年12月在开封市尉氏县某蛋鸡养殖场进行。1.1.6分组、试验方案选取体况相似的133日龄罗曼褐商品蛋鸡2160只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复180只,依次为对照组、试验1组、试验2组、试验3组;各试验组在基础日粮基础上分别添加质量比0.1%的乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制剂、复合益生菌制剂。预试期7d,正试期80d。对照组、试验组饲养环境、饲喂、管理方式均按照鸡场常规要求进行。试验日粮配方按照林冬梅等(2006)方法进行配制。1.2方法1.2.1生死制剂的制备1.2.1.菌种活化培养将保存的乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌斜面菌种分别接种于MRS固体培养基、营养琼脂培养基,37℃培养,进行菌种的活化培养;然后将活化菌种分别接种于500mLMRS液体培养基、营养肉汤培养基中,分别37与35℃、150r/min摇床培养。1.2.1.最佳液体发酵条件将培养28h乳酸杆菌种子培养液,以体积分数5%接种量接入于50L发酵罐中进行发酵培养。最佳液体发酵条件为温度40℃、培养时间28h、初始pH5.0,即为乳酸杆菌培养物。将该培养物用麦麸吸附低温烘干,即为乳酸杆菌益生菌制剂,分装4℃保存。1.2.1.发酵、培养、发酵将培养18h的枯草芽孢杆菌种子液以体积分数5%接种量接入于50L发酵罐中进行发酵培养。最佳培养温度为35℃,初始pH7.0,每隔2h取样一次,测定样品中的产芽孢率,当产芽孢率达到90%以上时即可停止发酵。将发酵液固定化于麦麸上,干燥、粉碎,分装4℃保存。1.2.1.4复合生动制剂的制备把乳杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制剂按照1∶1比例混合,即得复合益生菌制剂,分装4℃保存。1.2.2菌种含菌量的规定对于饲用益生菌制剂,活菌量是益生菌发挥作用的关键指标之一(张璐等,2008),中国正式批准生产的微生态制剂对含菌数量的规定是芽孢杆菌含量≥5×108CFU/g;乳酸杆菌≥1×107CFU/g。利用稀释平板法检测各益生菌制剂产品中活菌数(CFU/g)。1.2.3两组实际耗料量及料蛋比、死正交试验计算①每天观察记录每组产蛋数与日产蛋量,分别计算每组平均日产蛋量、平均蛋重、产蛋率,具体公式为:平均日产蛋量(g/(只·日))=总产蛋量/试验天数/试验鸡数;平均蛋重(g/个)=总产蛋量/产蛋总数;产蛋率(%)=有效蛋数/试验期鸡累加数×100%;②以组为单位记录每日耗料量,计算平均日耗料量、料蛋比,具体公式为:平均日耗料量(g/(只·日))=总耗料量/试验天数/试验鸡累加数;料蛋比=总耗料量/总产蛋量;③记录每组每日的死亡或淘汰鸡数,计算死淘率,死淘率(%)=死亡或淘汰鸡数/试验初鸡数×100%;④蛋品质测定:于试验中期(180日龄)和结束时(220日龄),每组分别随机抽取30枚鸡蛋,按照苏青云等(2010)方法测定蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄比重和蛋形指数。1.2.4dunpan氏法分析试验数据采用SPSS10.0软件中单因素方差分析(ANOVA)法分析,并用Duncan氏比较,结果中的数据以“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异显著。2结果与分析2.1活菌数测定经检测制备的乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制剂、乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂3类益生菌产品中的活菌数分别为2.97×109、3.16×109、2.47×109CFU/g,达到国家标准要求。2.2对平均产蛋量、产蛋率和不合格率的影响由表1可知,在蛋鸡饲料中添加益生菌制剂可以显著提高平均蛋重,试验各组分别比对照组提高2.06%、2.02%、3.97%(P<0.05),试验3组比试验1、2组分别提高了1.87%、1.91%(P<0.05),试验1、2组间差异不显著(P>0.05);与对照组相比,试验各组可以显著提高平均日产蛋量,分别比对照组提高4.39%、4.96%、7.87%(P<0.05),试验3组与试验1、2组差异显著,分别提高了3.34%、2.77%;可以显著提高产蛋率,各试验组比对照组分别提高2.31%、2.88%、3.91%(P<0.05),试验3组与试验1、2组差异显著,分别提高了1.56%、1.00%(P<0.05);有降低不合格蛋率、死淘率、平均日耗料量趋势,但各组间差异不显著(P>0.05);可以显著降低料蛋比,其中试验1、2组间差异不显著,试验3组显著优于试验1、2组,分别降低了1.99%、1.49%。说明乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂较乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制可以显著提高平均蛋重、平均日产蛋量、产蛋率,显著降低料蛋比,而对不合格蛋率、死淘率、平均日耗料量的影响不显著。2.3提高鸡蛋蛋白哈夫单位值由表2可知,与对照组相比,在蛋鸡饲料中添加益生菌制剂可以显著提高A级蛋的比例(蛋壳颜色比色扇6级以上蛋占验蛋总数比例),各试验组分别比对照组提高了11.26%、14.67%、21.45%(P<0.05),其中试验3组显著优于试验1、2组,分别提高了9.16%、5.91%(P<0.05);可以显著降低蛋形指数、显著提高蛋比重和蛋壳厚度,但试验各组间差异不显著(P>0.05);可显著提高蛋黄比率,分别比对照组提高9.66%、13.42%、18.11%(P<0.05),其中试验3组显著优于试验1、2组,分别提高了7.71%、4.14%(P<0.05);对于改善鸡蛋蛋白哈夫单位值效果不明显。说明在蛋鸡饲料中添加益生菌制剂可以显著提高蛋品质,其中乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂在提高A级蛋比例、提高蛋黄比率方面,显著优于枯草芽孢杆菌益生菌制剂、乳酸杆菌益生菌制剂。2.4毛利润检测由表3可知,对照组、试验组分别获得的毛利润为5839.85、6649.81、6838.38、7372.92元,各试验组分别比对照组提高了13.87%、17.10%、26.25%;每只鸡的毛利润分别为11.12、12.45、12.81、13.80元,各试验组分别比对照组提高了11.96%、15.20%、24.10%;与乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制相比,乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂使每只鸡毛利润分别提高了10.84%、7.73%。说明益生菌制剂可以显著提高蛋鸡养殖经济效益,其中乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂的应用效果显著优于乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制。3复合益生菌制剂的制备试验结果表明,在蛋鸡生产中应用益生菌制剂可以显著提高平均蛋重、日产蛋数、产蛋率,降低料蛋比,提高蛋品质,其中乳酸杆菌—枯草芽孢杆菌复合益生菌制剂的应用效果显著优于乳酸杆菌益生菌制剂、枯草芽孢杆菌益生菌制剂,使每只鸡毛利润分别提高了10.84%、7.73%;这是因为乳酸菌通过产生有机酸抑制有害菌的生长,通过诱导特异性和非特异性免疫应答途径增强动物机体免疫力,通过分解食物中的蛋白质、糖类,合成维生素,提高饲料养分的消化率和生物学效价;芽孢杆菌通过生物夺氧来达到抑菌效果,通过在肠道发挥免疫佐剂的作用,提高动物体液免疫和细胞免疫水平,通过分泌蛋白质、淀粉、纤维素等生物活性酶提高畜禽对饲料中难以消化物质的利用程度。两者的联合使用,在蛋鸡生产中表现出了很好的协同作用效果。益生菌制剂的益生作用是通过有益微生物在动物体内一系列生理活动来实现的,其最终效果同施加的益生菌的数量密切相关,数量不够,在体内不能形成菌群优势,难以起到益生作用;数量过多,不仅造成不必要的浪费,而且还会破坏动物体内正常菌群的稳定。据文献报道(张旭等,2010;刘辉等,2009;余东游等,2010),目前