生物膜的讲解

生物膜介绍：本文介绍了什么是生物膜以及它们在阻碍伤口愈合过程中所起到的重要作用。此外，还探讨了可能的干预方法，旨在清除或减少生物膜，并预防其在伤口再次形成。什么是生物膜：生物膜是一种微生物群落复合体，由细菌和真菌组成。微生物能合成并分泌一种保护性基质，通过它将生物膜牢固的附着在活体或非活体表面。生物膜是一种动态的异种群落复合体，处于不断变化的状态，它们可能由单一种群细菌或真菌组成，大多数情况下，由多种群组成，比如包含多种多样的菌群。基本上，可将生物膜描述成细菌隐藏在一层厚厚的黏滑的保护层中，保护层由糖类和蛋白质组成。生物膜保护层可保护微生物免受来自外界的危害。生物膜与伤口有什么联系？一直以来都认为生物膜可在医疗器械表面形成，例如导尿管、气管插管、鼓膜通气管、骨科与胸部植入物、角膜接触镜、子宫内避孕器（IUDs）以及缝合线。它们是导致潜在的细菌感染和慢性炎症的主要原因，如牙周炎、囊性纤维化、慢性痤疮以及骨髓炎。生物膜还常见于伤口，并在某种程度上会延迟伤口愈合进程。通过电子显微镜对慢性伤口与急性伤口的活组织检查发现，60%的慢性伤口含有生物膜结构，而急性伤口只有6%含有生物膜结构。据报道，生物膜是导致多种慢性炎症性疾病的主要因素，那么极有可能几乎所有的慢性伤口上至少有部分创面含有生物膜菌群。生物膜是如何形成的？阶段一：可逆的表面粘附微生物通常被认为处于孤立的自由漂浮状态（如浮游型）。然而，在自然条件下，大部分微生物倾向于粘附在物体表面上，并最终形成生物膜。最初的粘附是可逆的。阶段二：永久性表面粘附随着细菌的繁殖，它们粘附的更加牢固（定植），发生变异，改变基因表达模式以提高生存能力。这通常是一种被称为细菌群感效应（Quorumsensing）的细菌通讯的结果。阶段三：黏滑保护性基质/生物膜一旦牢固地附着在表面上，细菌开始分泌一种包围基质，即细胞外聚合物（EPS）。这是一种保护性基质或称为“黏质物”。这样，小菌落形成最初的生物膜。EPS的准确成分因所含的不同微生物而异，但通常由多糖、蛋白质、糖脂和细菌DNA所组成。一般认为存活的或死去的细菌释放的细菌DNA是构成生物膜细胞外聚合物（EPS）基质的重要组成部分。细菌分泌出各种蛋白质和酶帮助生物膜牢固的粘附在伤口创面上。完全成熟的生物膜不断地释放出浮游细菌，小菌落和生物膜碎片，它们四处散播，粘附于伤口基底的其他部位或其它伤口，形成新的生物膜菌落。微生物存活在混合性微生物群落中，生物膜允许它们之间分享“经验和技巧”，以帮助整个团体的生存。这种机制使它们有了更多的保护性优势。生物膜的形成有多快？实验室研究显示浮游细菌，如葡萄球菌、链球菌、假单胞菌和大肠杆菌，通常会：在数分钟内实现粘附。在2-4小时内形成牢固粘附的小菌落。在6-12小时内形成最初的耐受性，例如抗生素、防腐剂和消毒剂。在2-4天内可演变成成熟的生物膜群落，对生物杀灭剂具有极强的抵抗力，并释放浮游细菌，演变快慢还与细菌种类和生长条件有关。在24小时内即可从机械性破坏中快速复原，重新长成成熟的生物膜。这意味着各种伤口清创术只能提供很短窗口期，例如，24小时之内，在此期间内抗菌治疗在降低创面的浮游微生物和生物膜会更有效。为什么我们到目前才发现存在于伤口的生物膜？只到最近人们才普遍认识到生物膜是导致皮肤伤口延迟愈合的因素之一。慢性皮肤伤口通常缺乏明显的临床感染症状，标准临床微生物实验室检测却显示细菌负荷较低。然而，标准临床微生物检测适用于培养浮游细菌，而无法充分检测生物膜细菌，这类细菌需要特殊的培养技术才能检测到。当伤口无明显感染，却存在难以愈合的情况，人们尝试用细菌重度定植这一名词来说明细菌在其中所起的关键作用。实际上，重度定植/局限性感染很可能表述的就是慢性伤口出现了生物膜。我们能看见生物膜吗？生物膜是显微镜下的结构。然而，在某些情况下，如果给予足够长的生长时间，经过不受干扰的生长，生物膜会变得足够粘稠，以至于可被肉眼观察到。例如，牙菌斑可逐渐积累，直到某天变得清晰可见。某些生物膜表型的细菌可产生色素，从而有助于目视检测到生物膜。例如，生物膜表型的绿脓杆菌生成群感效应分子绿脓菌素，外观为绿色。即便如此，伤口变为绿色并不意味着一定存在绿脓杆菌生物膜。如何辨别生物膜和腐肉？伤口腐肉通常被描述成伤口基底附着的一层黄色、粘稠的不透明层，而伤口部位发现的生物膜通常呈胶状，并具有光泽。然而，在生物膜与腐肉之间可能存在某种联系，从而增加血管通透性，产生伤口渗液并形成纤维蛋白腐肉。因此，腐肉的存在标识着伤口可能存在生物膜。生物膜可在伤口重新形成，这是由于：清创/清洁后残留生物膜碎片的生长残余生物膜释放浮游细菌新进入的微生物生成生物膜防止生物膜重建的原则包括防止伤口进一步污染（如使用敷料），以及使用抗菌剂杀死浮游微生物。很多生物膜由多种微生物构成，这种特性表明可杀死而不只是抑制微生物的局部用广谱抗菌剂是最合适的选择。但是抗菌剂防止生物膜再次形成的具体作用还不明确。然而，广泛用于伤口处理的广谱杀菌抗菌剂有银、碘酒、蜂蜜和PHMB，分别有多种配方的产品供选择。使用局部抗菌剂的一项新准则就是，如果目前使用的抗菌剂无效，则需要更换为另一种抗菌剂。然而，还没有足够证据表明哪种抗菌剂可作为首选；选择取决于如何使用抗菌剂。例如，是否需要在伤口部位保留几天？如果是，则需要可持续释放的配方以满足使用周期。此时还需考虑患者的敏感性/过敏性。如何知道生物膜已被清除？由于针对生物膜缺乏明确的临床症状以及简易的实验室检测方法，所以很难明确断定什么时候伤口生物膜已被完全清除。最清晰的临床指征很可能就是伤口愈合进展，伴随渗液和腐肉减少。在明确的指南出台之前，需要进行临床判断，以决定何时以及如何调整对疑似生物膜感染伤口的治疗。例如，当伤口愈合进展时，应该改变清创方法或降低清创频率，以及/或者重新考虑是否还有必要使用局部抗菌剂。其它重要的概念还包括对伤口进行经常性的在评估，以及采取改善患者健康的整体医疗方法，以增强免疫系统，促进伤口愈合。未来发展：很有必要去研发出新的方法或仪器，采取针对性治疗之前和之后可用来快速检出生物膜的存在情况。在初始阶段，即可指导研究者和临床医生制定有效的伤口治疗策略。之后，它可帮助监测治疗的进展。作为生物膜清除剂和抑制剂，现有的、新型的抗菌剂和治疗方法对生物膜的疗效正在接受详实的验证。例如，一项近期开展的关于各种伤口敷料抗菌有效性的研究，针对培养在猪皮肤上的铜绿假单胞菌生物膜，研究结果显示卡地姆碘具有显著的生物膜清除性能。然而，生物膜由多种微生物复合而成，菌群不断演变，生物膜细菌表型异质性使情况更加复杂化，因此，意味着抗生物膜制剂的疗效因每位患者而异。我们如何对病人说明生物膜？患者可重新恢复信心，通过几种方法联合治疗可有效治疗生物膜。方法包括清创术和/或清洁方法清除生物膜、应用敷料阻止新的细菌到达伤口明，使用抗菌剂杀死残留在伤口的细菌。需告之病人伤口需要重复多次处理，因为生物膜可在一天之内重新形成，阻碍伤口愈合。总结：据悉细菌生物膜可造成多种慢性炎症性疾病，而最