新城疫与禽流感的免疫程序研究

新城疫与禽流感的免疫程序研究

新城病（nd）和家禽（ai）是严重的病毒性疾病，严重危害着养禽业。它不仅给养禽业带来重大的经济损失，而且对公共卫生也有其重要意义。目前,在我国主要通过广泛疫苗的免疫接种来控制ND与AI的发生与流行。但是,在临床上由于疫苗使用不当或滥用疫苗,造成免疫失败的现象屡有发生。因此,制定合理的免疫程序对预防上述疫病的暴发具有重要作用。本研究选择了高邮一饲养条件和生物安全水平较高的鸡场,在测定3批鸡群ND和AI的血凝抑制(HI)抗体水平的同时,还对免疫鸡群中这2种病毒的携带情况进行了检测,以进一步评价不同免疫程序下疫苗的免疫保护效果,以期为ND与AI的防制提供有益的参考。1材料表面1.11%红细胞和pbs按常规方法自制。1.2ha与血清两组NDV、H5AIV和H9AIV抗原(HA分别为9log2、6log2、8log2)、血清(HI分别为8log2、6log2、7log2)均由本室自制。1.3患者为5日龄非免疫胚SPF种蛋购自山东家禽研究所,由本室孵化至9~11日龄;10日龄非免疫胚由扬州大学比较医学中心提供。免疫程序及相应的血清与泄殖腔棉拭样品均来源于江苏高邮某鸡场。2方法2.1罗曼、伊莎父母代种鸡第1批杂交三黄鸡2005年10月14日出雏,该批共8000只。第2批罗曼父母代种鸡2006年9月5日出雏,该批共8600只。第3批伊莎父母代种鸡2007年3月23日出雏,该批共9150只。H5AI、H9AI、ND疫苗免疫程序见表1。2.2血清抗体消长情况第1批鸡分别在103、138、172、203、233、265、294和325日龄采样,第2批鸡分别在102、132、162、192、223、254、285和314日龄采样,第3批鸡分别在102、132、164、193、223、256、288和318日龄采样。每批鸡每次随机采血样24只,分离血清,挑选出20份合格血清样品,检测血清样品ND、H5和H9AI抗体消长情况;同时,每批鸡每次随机采泄殖腔棉拭子20只,每3只置于盛有含抗生素PBS的离心管中,冻融3次,无菌挤压拭子并将拭子浸液5000r/min离心15min取上清,接种10日龄非免疫鸡胚分离病毒并用NDV、H5AIV和H9AIV抗血清鉴定。2.3鸡群健康记录观察临床症状和剖检变化,统计发病率和死亡率,并进行相应的病毒分离。3结果3.13抗体平均效价第1批抗体平均效价分别在6.5log2、6.6log2、6.1log2以上,第2批抗体平均效价分别在4.0(除314日龄)、6.2log2、4.6log2以上,第3批抗体平均效价分别在6.1log2、5.1log2、7.4log2以上(见图1~3)。3.2病毒分辨率用非免疫鸡胚分离病毒,收获的鸡胚液均无血凝性,未分离到新城疫和禽流感病毒。3.3鸡群健康死淘率、生产性能均无异常。4不同批鸡群的免疫效力和疫苗HI抗体测定简单易行,也是国内各地规模化鸡场普遍用于ND、AI等的监测方法。本试验连续对同一鸡场3批鸡群产蛋期ND和AIHI抗体监测7个月。抗体平均效价均在临界值4.0log2(除314日龄)以上,抗体高峰一般在102日龄免疫后第1、第2个月,少数在第3个月,最高可达9.7log2并且维持较高抗体水平至少7个月。表明以合格的活疫苗和灭活疫苗在开产前联合免疫,使产蛋鸡群在产蛋期至少7个月不使用禽流感、新城疫疫苗,从而保证了稳定的生产性能。不同鸡群即使在使用相同疫苗后,所产生的HI抗体效价也不完全相同。从禽流感H5和H9免疫程序看,第2、3批鸡群中两病的免疫程序几乎一致,但疫苗所诱导的HI抗体效价存在明显差异,表明不同批次疫苗之间的质量可能有所差别。从新城疫免疫程序来看,3批鸡群除使用了1次灭活苗外,均多次使用了活苗,第1批鸡群免疫了2次新支二联活苗和1次Ⅳ系活疫苗,第2、3批与第1批鸡群相比,增免了1次新城疫Ⅰ系中等毒力活疫苗。由ND抗体的生成情况可知,第1批NDHI抗体较第2、3批低,推测这可能与Ⅰ系苗的加免有关。由H5亚型和H9亚型禽流感的免疫程序可知,第2批鸡群免疫了2次禽流感(H5+H9)灭活苗,而第3批鸡群在免疫禽流感(H5+H9)灭活苗后,第2次仅免疫了H5亚型禽流感灭活苗。HI抗体效价测定结果显示:第3批鸡群H5HI抗体的效价高于第2批,表明,单苗较多联(价)疫苗效果要好。因此,在预防ND和AI的过程中,我们主张使用ND、AI单苗,除非是经检验合格的浓缩疫苗,否则,不主张将2类疫病等同于其它疾病使用多联(价)疫苗。从3批鸡群的饲养状况来看,各批鸡群