慢性阻塞性肺疾病稳定期中医痰证素与气道炎症的相关性研究

慢性阻塞性肺疾病稳定期中医痰证素与气道炎症的相关性研究

慢性阻塞性肺疾病（copd）是一种以气流限制为特征的慢性呼吸道炎症疾病。有学者认为“宿痰伏肺”是COPD发作的基本病理基础。本研究采用证素辨证和积分的方法,提取COPD病性证素痰,探讨证素痰的严重度与诱导痰白细胞总数及其分类的相关性,以阐明COPD稳定期患者中医病性痰的病理实质。病情、病例纳入及排除标准1.研究对象选择2010年4月至2012年4月在福建中医药大学附属漳州市中医院就诊的慢性阻塞性肺疾病稳定期患者103例,其中男90例,女13例;年龄50-80岁,平均(69.57±8.59)岁;病程3-43年,平均(14.05±11.53)年。2.纳入标准(1)年龄40-80岁,男女不限;(2)诊断符合中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组制定的慢性阻性肺疾病诊治指南(2007修订版);(3)用支气管舒张剂后肺功能FEV1/FVC<70%,临床属于稳定期。3.排除标准(1)近2周发生过上呼吸道感染者;(2)COPD急性发作期患者;(3)近1个月全身使用过糖皮质激素者;(4)虽有气流阻塞,但临床诊断支气管哮喘、肺结核、囊性纤维化、弥漫性泛细支气管炎、闭塞性细支气管炎者;(5)合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病;(6)不愿意配合和完全不能交流者。病理变化及数据收集1.中医辨证方法在四诊基础上,采用证素辨证方法进行辨证。参照“600常见症状的辨证意义”,制定四诊信息采集表。参照杨敏等辨证方法,根据四诊信息在诊断中的权重,以加权阈值法确定病理要素和证素。各辨证要素的诊断确定,以100作为通用阈值,各症状对各辨证要素贡献度之和达到或超过100时,即可诊断为这些辨证要素。辨证要素贡献度之和<70归为0级,说明基本无病理变化;积分70-100归为1级,说明存在轻度病理变化;积分100-150归为2级,说明存在中度病理变化;积分≥150归为3级,说明存在严重病理变化。每一症状的轻重,以中等程度为准,若该症状重时,其定量诊断值乘1.5,若该症状轻时,乘0.7。2.诱导痰细胞学检查2.1痰的诱导方法参照洪春霖等诱导痰实验技术方法,受试者吸入200μg沙丁胺醇15min后,超声雾化吸入3.5%高渗盐水15min,每隔5min以及任何时间患者自觉有痰时嘱其擤鼻涕、漱口后用力深咳,用带有刻度的无菌干燥杯留取痰立即送实验室处理(或在4℃冰箱保存不超过2h)。2.2诱导痰细胞学计数痰标本中加入等倍体积含有0.1%二硫苏糖醇(DTT)的磷酸盐缓冲液(PBS),涡旋振荡混匀。待痰完全液化后,记录痰液的容量。然后1500r/min离心10min,留取上清液待测。PBS溶液50mL悬浮沉淀,经48μm筛网过滤杂质,再次离心弃去上清液,留取沉渣1mL。计数炎性细胞总数和鳞状上皮细胞数,用涂片离心机制作细胞涂片,瑞氏染色,油镜下分类计数400个非鳞状上皮细胞。3.统计学方法采用SPSS16.0软件对数据进行统计学处理:实验数据痰积分用表示,多组间比较用单因素方差分析(One-wayANOVA),组间两两比较用LSD;诱导痰白细胞及其分类用中位数(四分位数)表示,各组组间比较用KruskalWallisH,组间两两比较用Mann-WhitneyUtest。痰证素积分与诱导痰白细胞总数及其分类之间的相关性采用等级相关(Spearman)分析。以P<0.05为差异有统计学意义。痰证素积分与诱导痰细胞学的关系1.痰证素积分与诱导痰白细胞总数及其分类见表1。3个级别痰证素积分比较差异均有统计学意义(P<0.01);且不同级别之间诱导痰细胞学中中性粒细胞百分比、巨噬细胞百分比各组间比较,差异有统计学意义(P<0.01);而嗜酸性粒细胞百分比各组间比较1、2级显著性高于3级,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞百分比各组间比较3级低于1、2级,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。2.痰证素积分与诱导痰细胞学之间的相关性本研究中发现103例COPD稳定期患者痰证素积分与诱导痰中性粒细胞百分比呈高度正相关(r=0.992,P=0.000<0.01);与巨噬细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比呈负相关(r=-0.779,P=0.000<0.01;r=-0.309,P=0.002<0.01),与淋巴细胞百分比无相关(r=-0.250,P=0.11>0.01),见图1。copd稳定期病理生理指标及与诱导痰证素积分的关系痰是一种黏稠状的病理产物,又是一种有形的致病因子。COPD以肺、脾、肾三脏虚损为主,为痰的产生提供了病理基础。肺为水之上源,主通调水道,若外感六淫邪气或他脏病变影响及肺,或久病肺虚,均可使肺失清肃,通调水道失司,水液不行,停聚为痰;脾主运化水湿,子病及母,脾失健运则水液不能布散而停滞为痰浊,痰浊上乘,蕴贮于肺;久病肾虚不能温化水湿,聚成痰浊。痰既为病理产物又为内源性致病因素,“宿痰伏肺”是导致COPD反复发作,病程缠绵难愈的根本原因。本研究采用朱文锋教授创立的“证素辨证”方法,朱教授认为:证素为证的要素,指辨证所要辨别的位置和性质,证素是通过对症候的辨识而确定的病理本质,是对“证”认识的具体化,是构成证名的基本要素,“证素辨证”是继承传统的各种辨证方法的精华,把握辨证的关键——病位、病性等证素,从而形成新的辨证方法。采用证素辨证和积分的方法研究疾病可以使病位和病性更客观化和量化。本文研究COPD中医病性证素痰的严重程度,并探讨其与诱导痰中炎症细胞的相关性。结果显示103例COPD稳定期患者100%均有病性证素痰,且积分均处于1级以上,而以2级所占比例最多,占总数的39.80%,这说明痰是稳定期COPD重要的病理因素,并且存在不同程度的痰病理变化。相关研究表明,诱导痰在COPD气道炎症监测中起着重要的作用,是一个较理想的指标。本研究通过对COPD稳定期患者进行诱导痰细胞学检查,结果显示诱导痰细胞学中以中性粒细胞表现为主,占77.36%。中性粒细胞是COPD的主要气道炎症细胞,IL-8、LTB4等趋化因子可趋化中性粒细胞向肺组织浸润,被活化的中性粒细胞通过释放中性粒细胞弹性蛋白、MMPs和组织蛋白等而引起组织损伤和黏液高分泌,导致支气管和肺实质的多种病理改变,从而促进COPD形成发展。本研究结果显示,COPD稳定期患者痰证素积分与诱导痰中的中性粒细胞呈正相关,与巨噬细胞呈负相关。这说明痰的病理程度越高,其气道炎症程度越严重,以指导临床应重视辨证化痰的治疗以改善痰的病理机制,从而减轻气道炎症,为中医从痰论治COPD提供理论依据。本研究结果还显示痰证素积分1、2级组别中,嗜酸性粒细胞百分比显著高于3级(P<0.05),且痰证素积分与诱导痰嗜酸性粒细胞之间呈负相关(r=-0.309,P<0.01)。K.Gorska等研究发现嗜酸性粒细胞不仅是支气管哮喘的主要炎症细胞,也存在于COPD患者中,在COPD疾病早期气道炎症中起着重要作用。PapiA等研究发现COPD稳定