天冬乙醇的化学成分研究

天冬乙醇的化学成分研究

天冬是相思植物的提取物，是传统中医的一部分。全国各地均有分布,主产于贵州、广西、云南、甘肃、安徽、河南、湖南、湖北、四川和江西等地。天冬始载于《神农本草经》,历代本草均有记载。其味甘、苦,性寒,归肺肾经。为《中华人民共和国药典》(2000年版)收载品种。药理研究表明,天冬的氯仿提取物具有不同程度的对半乳糖致衰小鼠的抗氧化作用,但是抗氧化作用的物质基础尚不清楚,目前对天冬的化学成分研究较为不足,仅报道了一些氨基酸、单糖、低聚糖、多糖和皂苷类化合物等水溶性成分,而脂溶性成分报道较少,作者对天冬的化学成分进行了系统研究,本研究报道从氯仿部分分离得到的8个化合物,其中7个均为首次从该植物中分离得到。1实验部分1.1红外光谱测试天津市分析仪器厂RY-2熔点仪(温度计未校正),BrukerVector22红外光谱仪,BrukerDRX-500核磁共振仪,Mat-212磁式质谱仪。硅胶H(200~300目),青岛海洋化工厂生产。药材购自安徽亳州中药材市场(产地为湖北黄石),经本院生药教研室郑汉臣教授鉴定。1.2化合物18的合成天冬药材粗粉(15~20目)9.5kg,以75%乙醇渗漉提取,提取液减压浓缩至无乙醇味,加水稀释,以氯仿萃取,回收溶剂后经硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱层析得到化合物1~8。2d采用正-三烷基碳-1,3,5浅铅、双甲酰胺3e化合物1无色针状结晶(氯仿),mp.140~142℃。Libermann-Burchurd反应阳性,IR(KBr):3400,2960,1640,1380cm-1,与β-谷甾醇标准谱一致。TLC检查,两者Rf值一致,混合熔点不下降,鉴定为β-谷甾醇。化合物2白色无定形粉末(MeOH),mp.287~289℃。Liebermann-Burchard反应和Molish反应呈阳性。酸水解后检出葡萄糖和β-谷甾醇。经HPTLC与胡萝卜苷标准品对照,15%硫酸-乙醇显色,其Rf值和显色行为与标准品一致。IR谱显示有3365cm-1(宽峰,-OH),2940cm-1,1376cm-1(-CH3),1078cm-1,839cm-1(Δ5),与胡萝卜苷标准谱一致,故鉴定化合物2为β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(胡萝卜苷)。化合物3白色无定形粉末(MeOH),mp.79~80℃。EI-MSm/z:480[M]+,452[M-CO]+,71[C5H11]+,57(base,[C4H9]+)。1HNMR(CDCl3)δ:0.86(3H,t,-CH3),1.62(2H,m,-CH2CH2CH3),2.35(2H,t,-CH2CH2COOH)。13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)谱显示只有1个甲基碳信号δ14.4,1个羧基碳的信号δ179.3和若干个-CH2-碳信号。综合以上信息推断化合物3为正-三十二碳酸。化合物4白色无定形固体(CHCl3),mp.61~62℃。EI-MSm/z:256[M]+,228[M-CO]+,71[C5H11]+,57(base,[C4H9]+)。1HNMR(CDCl3)δ:0.86(3H,t,-CH3),1.65(2H,m,-CH2CH2CH3),2.34(2H,t,-CH2CH2COOH);13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)谱显示只有1个甲基碳信号δ14.4,1个羧基碳的信号δ180.4和若干个-CH2-碳信号。其EI-MS谱图与棕榈酸EI-MS谱图完全一致。综合以上信息推断化合物4为棕榈酸。化合物5浅棕色无定形粉末(CHCl3),mp.190~191℃。IR(KBr):2925,2853(=CH),1650(C=C),1463,1231,1110.7,867.6,722cm-1。EI-MSm/z:378[M]+,239[C17H35]+,139[C10H19]+;279[C20H39]+,99[C7H15]+,240[C17H36]+,138[C10H18]+;280[C20H40]+,98[C7H14]+。1HNMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,-CH3),结合13CNMR(CDCl3)和DEPT(CDCl3)谱推断有2个甲基碳信号δ14.1,14.1,1个-CH=CH-双键信号δ127.9,130.2,其余均为-CH2-碳信号,由此推断化合物5为一直链单烯烃,根据质谱开裂信号推断双键应在9位。综合以上信息鉴定化合物5为9-二十七碳烯。化合物6无色针状结晶(CHCl3),mp.193~194℃。Liebermann-Burchard反应呈阳性,反应产物最终为绿色,该化合物对A试剂(Anisddehyde试剂)显色,对E试剂(Ehrlich试剂)不显色,表明该化合物为螺甾烷类化合物。IR(KBr):3329.7(-OH),2929.3,1376(-CH3),986.4,917,896,849cm-1;917cm-1处吸收强于896cm-1处吸收,由此推断25位为S构型。EI-MSm/z:416[M]+,139,115,126,357,386,273,302,287。其碳谱数据与菝葜皂苷元碳谱数据基本一致,故鉴定该化合物为菝葜皂苷元。1HNMR(CDCl3)δ:4.1(1H,m,3-H),4.3(1H,dd,J=7Hz,15Hz,16-H),0.75(3H,s,18-CH3),0.9(3H,s,19-CH3),1.3(3H,d,J=7Hz,21-CH3),3.3(1H,d,J=11Hz,26-H),3.9(1H,dd,J=2Hz,11Hz,26-H),1.0(3H,d,J=6.4Hz,27-CH3)。13CNMR(CDCl3)δ:30.3(C-1),27.4(C-2),67.4(C-3),30.3(C-4),36.9(C-5),26.9(C-6),26.9(C-7),35.6(C-8),40.2(C-9),35.6(C-10),21.2(C-11),40.7(C-12),41.0(C-13),56.8(C-14),32.1(C-15),81.4(C-16),62.5(C-17),16.8(C-18),24.2(C-19),42.5(C-20),14.7(C-21),110.1(C-22),26.3(C-23),26.1(C-24),28.1(C-25),65.4(C-26),16.4(C-27)。化合物7无色针状结晶(CHCl3),mp.206~208℃。Liebermann-Burchard反应呈阳性,该化合物对A试剂显色,对E试剂不显色,表明该化合物为螺甾烷类化合物。IR(KBr):3314(-OH),2931,1375(-CH3),1650(C=C),985,961,920,898,850cm-1;920cm-1处吸收小于898cm-1处吸收,由此推断25位为R构型。EI-MSm/z:414[M]+,139,282,159,300,342,271,253,EI-MS还显示有282次强峰,提示C5,C6间有双键。碳谱数据与薯蓣皂苷元碳谱数据基本一致,故鉴定该化合物为薯蓣皂苷元。1HNMR(CDCl3)δ:40(1H,m,3-H),4.2(1H,dd,J=7Hz,15Hz,16-H),0.76(3H,s,18-CH3),0.92(3H,s,19-CH3),1.3(3H,d,J=7Hz,21-CH3),1.1(3H,d,J=6.5Hz,27-CH3)。13CNMR(CDCl3)δ:37.3(C-1),31.8(C-2),71.6(C-3),42.5(C-4),141.2(C-5),121.8(C-6),32.2(C-7),30.6(C-8),50.4(C-9),37.0(C-10),21.4(C-11),38.5(C-12),40.4(C-13),56.9(C-14),31.8(C-15),81.2(C-16),62.4(C-17),19.8(C-18),12.7(C-19),42.5(C-20),14.8(C-21),109.6(C-22),31.8(C-23),29.0(C-24),30.6(C-25),67.2(C-26),16.6(C-27)。化合物8无色针状结晶(CHCl3),mp.252~254℃。Liebermann-Burchard反应呈阳性。[α]D20-61.5°[C=0.80,CHCl3/MeOH(1∶1)];IR(KBr):3400(-OH),2930,1377(-CH3),986,914,896,850,685cm-1。ESI-MSm/z:747[M+Na]+,推断化合物分子量为724。13CNMR和DEPT(DMSO-d6)谱亦显示有两个端基碳的信号:δ100.5,δ100.8;一个螺碳的信号:δ108.8;五个甲基碳信号:δ14.4,δ15.9,δ16.1,δ23.5,δ17.7。由此推断该化合物为螺甾皂苷。该化合物经酸水解,检出葡萄糖和鼠李糖,由端基质子的偶合常数J=7.8Hz知葡萄糖为β-构型。由IR谱中915cm-1处的吸收峰大于896cm-1处的吸收峰可知25-C为S-构型。13CNMR(DMSO-d6)谱在高场区信号与菝葜皂苷元图谱基本一致,糖信号与薯蓣皂苷元-3-O-[α-L-鼠李吡喃糖基(1-4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷的糖信号基本一致,故将该化合物结构鉴定为菝葜皂苷元-3-O-[α-L-鼠李吡喃糖基(1-4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷。1HNMR(DMSO-d6)δ:0.7(3H,s,19-CH3),0.9(3H,s,18-CH3),0.92(3H,d,J=6.9Hz,27-CH3),1.02(3H,d,J=7.1Hz,21-CH3),1.11(3H,d,J=6.2Hz,Rha-CH3),4.71(1H,brs,Rha-H1),4.19(1H,d,J=7.8Hz,Glu-H1)。13CNMR(DMSO-d6)δ:29.3(C-1),26.1(C-2),73.7(C-3),30.0(C-4),35.8(C-5),26.3(C-6),25.9(C-7),34.8(C-8),39.6(C-9),34.6(C-10),20.4(C-11),39.6(C-12),40.1(C-13),55.6(C-14),31.4(C-15),80.3(C-16),61.8(C-17),16.1(C-18),23.5(C-19),41.5(C-20),14.4(C-21),108.8(C-22),25.5(C-23),25.4(C-24),26.4(C-25),64.9(C-26),15.9(C-27),3-O-Glu:100.5(C-1),72.6(C-2),75.3(C-3),76.8(C-4),75.3(C-5),60.0(C-6),Rha:100.8(C-1),70.6(C-2),70.7(C-3),71.9(C-4),68.6(C-5),17.7(C-6)。体外药理实验表明,化合物8具有抗真菌活性和抗肿瘤活性。化合物8对