桑黄的名实与种名考辨

桑黄的名实与种名考辨

黑莓是黑莓、黑莓或胡孙眼的俗称。《神农本草经》和《本草纲目》记载“治疗经气虚证、月度闭血、产后血凝、男性不适、伏血、赤血”。自古以来，它就被用作珍稀药物。桑黄的药用价值最先在中医典籍中得到肯定,近代研究显示桑黄对肿瘤抑制率达96.78%,是国际公认的最有效的抗癌真菌,其突出的抗肿瘤功效在日韩等国备受关注。1桑黄种phellinus桑黄属于真菌界(Fungi)担子菌门(Basidio-mycota)刺革菌目(Hymenochaetales)刺革菌科(Hymenochaetaceae),是硬质多孔菌。因天然桑黄产量极少,而其他类似野生种类较多,一直没有明确、统一的种名。日韩学者认为桑黄种名为Phellinuslinteus(裂蹄木层孔菌,现为Inonotuslinteus),戴玉成(1998)研究表明裂蹄木层孔菌分布于热带美洲和非洲而非东亚地区,桑黄应是P.baumii(鲍氏针层孔菌,现为I.baumii),得到韩国学者认同,但暴麻子长于丁香树而不是桑树。邓叔群(1963)和刘波(1974)指出桑黄学名是P.igniarius(火木层孔菌),火木层孔菌可长于多种阔叶树上,但不长于桑树,虽也是药用真菌但效果不突出。此外,还有外形似桑黄长于桑树的粗毛纤孔菌(Inono-tushispidus),但药效不明显。多种类似桑黄的多孔菌使桑黄真面目更加扑朔迷离,直到吴声华戴玉成(2012)结合形态特征与分子鉴定,表明桑黄是分布于中、日、韩,仅生长于桑属(Marus)植物上的新种Inonotussanghuang。2桑黄的生长与发育桑黄原基呈柠檬黄或嫩黄色,子实体较大,菌盖表面黄棕色至棕色,多年生老熟子实体菌盖呈棕褐色,无菌柄,菌盖多木质化,具有反复生长-停顿形成的年轮状结构,有扇形、马蹄形等,多见于10年以上老桑树反复修剪而膨大的剪口部位。子实体边缘可增大生长,腹面可增厚生长。甄占萱等调查河北省承德市野生桑黄的生长发育规律表明,承德桑园中的天然桑黄每年7-9月原基发生,主要着生于35年老龄桑树的主干和侧枝上,子实体萌发到孢子释放完需12~15天,影响桑黄子实体发育主要环境因素是气温和湿度,其次是光照和通风。野生桑黄生长期间平均气温18.1~33℃,平均空气相对湿度79.8%以上,散射光为宜,通风不畅影响子实体生长,但对孢子形成影响不大。3蛋白杂多糖组成结构由于桑黄新种确定时间尚短,前期对活性成分及功能研究集中于桑黄类似菌,研究材料主要来源于P.linteus(裂蹄木层孔菌)、P.baumii(鲍氏针层孔菌)、P.igniarius(火木层孔菌)等,对深入透彻了解桑黄很有借鉴作用。桑黄多糖是桑黄类真菌主要活性成分,可增强免疫力具抗肿瘤活性。Kim.G.Y等从P.linteus子实体粗多糖中分离得到一种酸性蛋白聚糖,分子量150KD,多糖72.2%,蛋白质22.3%,多糖部分主要由甘露糖、半乳糖、葡萄糖、树胶醛糖和木糖构成,蛋白质部分由大量的天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸和丝氨酸,是以β(l-3)-D-葡萄糖为主链,β(l-6)-D-葡萄糖为侧链的蛋白杂多糖。QingGe等从P.baumii子实体分离到新的水溶性杂多糖,含L-岩藻糖、D-甘露糖、D-葡萄糖,以α,β-(1→6)-d-葡萄糖为骨架,在O-3位置上一个取代基,此外还包含(1→3,6)-p-d-甘露糖残基和末端葡萄糖残基。桑黄类中萜类成分包括倍半萜、二萜和三萜,三萜较常见,有软木三烯酮,β-乳香酸,熊果酸,蒲公英赛醇。莫顺燕等在人工培养的火木层孔菌发现了9个新倍半萜及一个已知的倍半萜。王琪等从火木针层孔菌子实体中分离得到1个松香烷型二萜。已知药用真菌中,仅有桑黄及其类似菌含有黄铜。黄酮具有抗氧化、抗菌抗病毒、降血糖、护肝等多种药理活性。莫顺燕等首次从桑黄中分离到柚皮素,樱花亭,二氢莰非素,7-甲氧基二氢莰非素,北美圣草素,香豆素等化合物,及两个新的二氢黄酮衍生物,并成功人工合成。AkitoNagatsu等(2014)从P.linteus子实体甲醇提取物中得到桑黄黄酮A和B两种新化合物。WoonHyungYeo等在P.linteus发酵液中分离到一种新的呋喃酮衍生物,分子量248,分子式C15H20O3,可显著抑制枯草芽胞杆菌生长。4药理作用4.1桑黄多糖的体外药动学通过激活巨噬细胞、增强其吞噬功能、诱导巨噬细胞产生和分泌肿瘤坏死因子,桑黄多糖对小鼠肝癌H22、肉瘤S180和肺癌Lewis均有较好的抑瘤作用,该机制也是桑黄抗肿瘤作用的重要机制之一。桑黄抗肿瘤机制主要是诱导癌细胞凋亡,增强免疫系统促进免疫应答,抑制细胞代谢,且大剂量长时间使用也对人体无任何毒副作用,还能缓解放、化疗副作用。胡启明从固态发酵培养的桑黄菌丝体,提纯到3种均一多糖组分Plps-1、Plps-2和Plps-3,具一定抗氧化效果,但不具有显著性,3种组分均可极显著提高脾细胞活力,Plps-1和Plps-2可极显著提高胸腺细胞活力,Plps-1能显著提髙巨噬细胞吞噬能力,且3种成分均能显著提高巨噬细胞分泌能力。Plps-1能够抑制93.6%肿瘤细胞S180体外增殖,AnnexinV-FITC/PI细胞周期以及细胞凋亡实验结果表明,Plps-1诱导肿瘤细胞的凋亡,使其停止在G1期,且无毒副作用。桑黄野生子实体热水提物对小鼠肉瘤S180抑制率达96.7%。乙酸乙脂、甲醇和水的提取物显著抑制DLA引起的小鼠肿瘤细胞生长,以乙酸乙醋的提取物效果最好。张敏等确定桑黄多糖在500mg/kg剂量时对H22肝癌作用较为明显。温克等比较桑黄、灵芝、阿加里斯茸、PL-2,PL-5等5种真菌类药物抗肿瘤作用,桑黄的作用最为明显。4.2血清-干扰张万国等研究表明,桑黄能显著降低肝纤维化大鼠血清氨基酸转移酶水平和血清胶原含量。病理组织观察显示对肝细胞保护作用明显,可抑制纤维组织增生,阻止肝纤维化形成与发展,显著提高血清γ-干扰素水平。Kim等发现裂蹄针层孔菌的菌丝体甲醇提取物,通过保持肝谷胱甘肽水平,恢复RNA合成而起到保护肝脏的作用,对H2O2或软骨糖胺(Galactos-amine)处理的原代培养鼠肝细胞有保护作用,以乙酸乙酯萃取部分保护作用最好。4.3诱导抗体作用张万国等发现火木针层孔菌能直接诱导人外周血单个核细胞(PMNCs)产生γ-干扰素,IFN-γ具有明显的抗肿瘤活性,诱导T细胞辅助抗体产生,增强细胞毒T细胞和NK细胞对肿瘤的杀伤作用,并通过作用于巨暖细胞、T细胞、B细胞调节机体免疫。HUANGHuiyu等证明口服裂蹄针层孔菌能显著减少肿瘤细胞大小,增加T细胞数量及IL-12、IFN-γ.TNF-α的分泌,增强NK细胞活性和抑菌力。Oh等试验表明桑黄水提物口服制剂可诱导IFN-γ产生,促进T淋巴细胞生长。4.4清除细胞自由基鲍氏针层孔菌甲醇提取物和热水提取物中的酌类物,对羟基自由基、过氧化氧的清除率在80%~90%(Mi-YaeShon等),对裂蹄针层孔菌子实体的70%乙醇浸提物,具有良好的抗氧化活性(Song等)。4.5间接诱变剂的诱变作用火木针层孔菌和裂蹄针层孔菌多糖(固体发酵、子实体水提及液体发酵液和菌丝体),可抑制直接诱变剂四销基苯二胺(NPD)、叠氮化钠(NaN3)和间接诱变剂2-氨基芴(2-AF)、苯并芘(BaP)的诱变作用。通过提高机体抗氧化防御功能,减小自由基对生命大分子损伤,抑制脂质过氧化等途径,桑黄胞内多糖能明显拮抗环磷酰胺引起的小鼠体细胞和生殖细胞突变。4.6孔菌子实体正丁醇提取物对抗菌性能的影响Kim等发现裂蹄针层孔菌一种蛋白多糖,可诱导HO-1活性防治自身免疫性关节炎。Hur等研究表明,裂蹄针层孔菌子实体正丁醇提取物对耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌抑菌活性良好。Jang等证明,鲍氏针层孔菌提取物能够抑制炎症细胞(包括中性白细胞、IL-1β)增加,在人的急性肺炎治疗中可能产生积极影响。4.7化合物的抗衰老能力吴娜以体外修复受损神经细胞和清除自由基的能力为指标,鉴定出桑黄子实体醇提物乙酸乙酯萃取相和正丁醇萃取相抗衰老能力较好。对乙酸乙酯相分离纯化后,得到11个单一化合物,化合物10和化合物11有较好抗衰老活性。随后在纯化物对老年痴呆症病程发展关键酶作用研究表明,化合物10和化合物11对乙酰胆碱酯酶抑制率高于其他成分,化合物10还能抑制衰老细胞中BACE1和HDAC家族蛋白的表达,延缓衰老的发生。5人工培训5.1袋料栽培基质优化桑树、杨树、柞树都可以作为栽培桑黄属的良好树种。段木栽培时,25℃黑暗条件下培养,不宜与其他菌种共同培养,出菇温度25~30℃,土壤的湿度50%~60%,空气湿度在90%以上,通气良好。栽培鲍氏针层孔菌过程中,子实体形成期多糖含量最高,孢子弹射后最低,抗氧功效方面,栽培子实体可以取代野生的。人工段料栽培的问题是需要消耗大量木材,菌种易退化且生长周期长。钟石等优化得到袋料栽培基质为:木屑50%,桑皮10%,棉籽壳30%,麸皮8%,糖、石膏各1%;桑枝段适量。接种后恒温25℃湿度约90%,培养30-40天后菌丝体转黄,菌袋划出小口,给予昼夜温差刺激(20~27℃),空气湿度增至95%以上,促进原基分化,50~60天后子实体发育成熟。5.2最佳培养条件优化药用真菌菌丝体发酵是获得活性物质的快速途径,成为药用真菌研究热点之一。桑黄液体发酵生产菌丝体和胞外多糖,可高效获取活性物质,此类研究主要集中于优化营养条件和环境因素。抗癌主活性物质桑黄多糖,液体发酵的胞外多糖具有降血糖的作用。王秋颖实验室研究表明,以菌丝产量和胞外多糖产量为指标,火木层孔菌SA-1在氮源含量为0.5%、碳源含量为4.5%时生长状况最佳。鲍氏针层孔菌的液体发酵最优条件是:6%接种量、起始pH6.0、发酵温度28℃,适宜碳氮比在22∶1至30∶1之间,碳源是40g/L葡萄糖,氮源是6g/L大豆蛋白胨,无机盐是ZnSO4·7H20,液体发酵9天生物量最高,11天胞外多糖产量最高,培养基装液量为100mL/500mL。5L发酵罐优化的培养条件:温度28℃,通气量0.40vvm,搅拌转速60r/min,装液量2.5L,发酵7天后,菌丝体生物量为3.59g/L,胞外多搪含量为6.4g/L,胞外总黄酮含量106.3μg/mL。这些都为实现“桑黄”工业化发酵生产提供了重要依据。钟石等以菌丝体干重为指标,优化野生桑黄液体发酵培养基为麦芽糖3%,酵母粉2%,MgSO40.15%,KH2PO40.10%,柠檬酸三铵0.10%,复合维生素B0.01%,0.3%桑枝水提物。6桑黄的发现和鉴定桑黄及药用功效在我国源远流长,却因天然子实体罕见,类似物众多而成为传奇,远不如灵芝、虫草、茯苓等药用真菌广泛开发利用,而却在日本、韩国受到重视。随着生物技术发展,桑黄真身显露,栽培条件和发酵技术日益成熟,生物活性成分及药理研究资料日渐深入