各种培养基的制作对策计划

各种培养基的制作对策计划各种培养基的制作对策计划各种培养基的制作对策计划.

配方一萨氏（Sabouraud's）培养基

蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升

先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡

萄糖），搅拌，使它溶解，尔后分装，灭菌，备用。

营养肉汤培养基牛肉膏0.3克蛋白胨1.0克

NaCl0.5克

水100毫升

pH7.0～7.2

在烧杯中加水，称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl，加热溶化后，调治pH值至7.0～7.2。分

装，加棉塞，高压蒸汽灭菌即成。常用于培养细菌。

营养琼脂培养基

在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。常用于培养细菌。

肉汁蛋白胨液体培养基牛肉500克

蛋白胨10克

NaCl5克

pH7.1～7.2

取新鲜牛肉500克，去净脂肪、筋腱后，绞碎或剁碎，加水1000毫升浸泡，15℃下放

置12小时或50℃下放置半小时。用纱布将肉汁过滤，补足失水。向肉汁中加入蛋白胨和食

盐。将肉汁加热，放入苏打（碳酸钠）至红色，调整pH值。分装，高压蒸汽灭菌。

将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质，制成液体培养基，如需制成固体培养

基，可在每100毫升液体中加入2克琼脂，加热溶化后，分装，再次进行高压蒸汽灭菌。常

用于培养细菌。

高氏一号培养基（淀粉琼脂培养基）可溶性淀粉2克

K2HPO40.05克

MgSO4·7H2O0.05克

KNO30.1克

NaCl0.05克'..

FeSO40.001克

琼脂2克

水100毫升

pH7.2～7.4

在烧杯中加水95毫升，加热至沸腾，取可溶性溶粉2克，用5毫升水调成糊状，倒入

开水中和匀。再称取其他药品，陆续加入烧杯内（待一种药品溶解后，再加入第二种药品）。

待全部药品溶解后，停止加热，补足失水，调pH值至7.2～7.4。分装后，高压蒸汽灭菌。

本培养基常用于培养放线菌。

马铃薯蔗糖培养基马铃薯200克

蔗糖10克琼脂20克

水1000毫升自然pH

称取200克马铃薯片，加水1000毫升，煮沸半小时，用纱布过滤，补足失水。在上述

滤汁中加入10克蔗糖、20克琼脂，加热使琼脂融化。分装后，高压蒸汽灭菌。常用于培养

酵母菌。

麦芽汁培养基

将从啤酒厂买来加有啤酒花的麦芽汁，装入锥形瓶中，加塞高压蒸汽灭菌。常用于培养酵母菌。

察氏培养基

NaNO32克

K2HPO41克

KCl0.5克

MgSO40.5克

FeSO40.01克

蔗糖30克

琼脂15～20克

水1000毫升自然pH

'..

分装，加棉塞，高压蒸汽灭菌。常用于培养霉菌。

豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）培养基黄豆芽100克

葡萄糖50克琼脂15克

水1000毫升

称取新鲜黄豆芽100克，放入烧杯中，加1000毫升水，煮沸30分钟，用纱布过滤，补

足失水。再加葡萄糖（或蔗糖）50克，琼脂15克，加热至融化，补足失水。分装，加棉塞，

高压蒸汽灭菌。常用于培养霉菌。

伊红美蓝培养基（E、M、B培养基）乳糖10克

蛋白胨5克

NaCl5克

K2HPO42克

2%伊红水溶液20毫升

0.35%美蓝水溶液20毫升

琼脂20克

水1000毫升

pH7.2

配制溶液

向容器内加入所需水量的一部分，依照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶

解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应

在全部原料溶解后加水补足。

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，连续加

热至完好融化。其实不断搅拌，省得琼脂糊底烧焦。

2.调治pH值

用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不吻合需要，

可用10%HCl或10%NaOH进行调治，直到调治到配方要求的pH值为止。

3.过滤'..

用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用

滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

分装

已过滤的培养基应进行分装。若是要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。若是

要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取

培养基。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，省得浸润棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为

宜。

加棉塞

分装达成后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，防备污染。

棉塞应采用一般新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，省得因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

制作棉塞时，要依照棉塞大小将棉花铺展成合适厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指

与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成

个长棒形的棉塞。棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合

适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。

制作斜面培养基和平板培养基

培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。

(1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右。

将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。

制作平板培养基。将方才灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点

燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上略加灼烧，左手打开培

养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。铺放培

养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒