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文档简介

ITCIntroduce

（IsothermalTitrationCalorimetry）IsothermalTitrationCalorimetry等温滴定量热ITC：测定分子相互作用的方法在一次实验中，ITC可以测定：结合的亲和力常数（K）；结合反应中的焓变和熵变（ΔH、ΔS）；结合位点数（n）实验也可以测定有多个结合位点的样品

等温滴定量热仪(ITC)

神奇的微量热控制—功率补偿IsothermalTitrationCalorimetry

实验流程1)样品池中加入待测大分子；2)参照池中加入缓冲液；3)将待测配体吸入注射器中；4)注射器置于样品池中；5)调整温度、搅拌速度和每次注射体积。

典型的ITC数据上半部分表示每次注射采集的数据；下半部分表示每次注射的释放的热量；（上图中每个峰的面积积分）对滴定抗原与样品池中抗体的摩尔比作图

ITC理论基础∆G=-RTlnKB∆G=∆H–T∆S

令人郁闷的公式说明了什么？

1.相同的KD有着相同的∆G；

2.相同的∆G却有着不同的∆H与∆S组合。

引发焓变和熵变的主要因素Enthalpy(-∆H)焓变

Hydrogenbonds

氢键

Ionicinteractions

离子作用

特异性结合Entropy(+∆S)熵变

Hydrophobicinteractions

疏水作用

Conformationalfreedom

构象自由度非特异性结合

ITC技术的应用领域分子相互作用：溶液中的几乎所有天然状态分子：包括蛋白质、核酸、多肽、药物分子、脂类、金属离子、小分子等等；工艺过程的开

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