呼吸道常见病毒微生物学教材

Department

of

Microbiology,

HMUMedical

Microbiology第三篇

医学相关病毒第32章呼吸道病毒微生物学教研室张凤民教学大纲掌握内容常见呼吸道感染的病毒及引起疾病；流感病毒主要生物学性状，包括形态结构、分型与变异；微生物学检查法。麻疹病毒形态结构、培养特性、致病性及其与SSPE的关系熟悉内容流感病毒的致病性与免疫性；流感的防治原则；腮腺炎病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒的致病性；风疹病毒致病特点了解内容鼻病毒、冠状病毒、呼肠病毒的致病性问题

流感病毒有哪些型别？分型和分亚型的依据是什么？甲型流感病毒为什么易引起世界性大流性？副粘病毒有哪些？引起什么疾病？麻疹病毒引起什么疾病？如何预防？简述风疹病毒与优生优育的关系普通冠状病毒与SARS冠状病毒有何异同？腺病毒的生物学性状与致病性呼吸道病毒种类正粘病毒流感病毒A,B,C型副粘病毒副流感病毒腮腺炎病毒麻疹病毒呼吸道合胞病毒风疹病毒腺病毒鼻病毒冠状病毒因为包膜有血凝素（HA），能凝聚多种动物红细胞（如鸡红细胞），对流感病毒的主要中和抗原可在鸡胚尿囊腔中增殖，是流感病毒的分离和增殖培养的主要方法在猴肾细胞中增殖，受染细胞表现为血凝现象被胰蛋白酶消化成二个多肽：HA1、HA2HA1是与红细胞、宿主细胞结合的部位

HA2具有膜融合作用，使HA与病毒包膜结合参与病毒释放：NA可水解受染细胞表面的糖蛋白末端的N-乙酰神经氨酸，使病毒自细胞膜出芽释放促进病毒扩散：破坏细胞表面的粘液，有利于病毒扩散抗抗原原漂漂移移（（Antigen

drift）：病毒抗原部分改变，原因是血凝素蛋白氨基酸序列由于基因突变而发生小改变，分子基本不变抗抗原原转转变变（（Antigen

shift）：血凝素分子完全改变，因朱是基因发生重组。是导致流感暴发流行的原因抗原变异机制抗原漂移（Antigen

drift）抗原转变（Antigen

shift）Influenza

pandemicsassociated

with

antigenic

shift致病性有季节性、地区性甲型易变异，曾多次引起世界性大流行乙型常造成局部爆发流行丙型只侵犯婴幼儿，很少流行Influenza

pathogenesisTransmissionAerosolesInfectionEpithelial

cellsReplication

cycle4

–6

hCell

deathNecrosis,apoptosisIncubation18

–

72

hPBMCNon-productive传播途径：飞沫传播传染源：患者、隐性感染者、被感染动物机理在呼吸道柱状上皮增殖，不引起病毒血症NA可降低细胞表面粘度，使细胞表面受体暴露，便于病毒侵袭致病特点是发病率高，死亡率低，死亡通常是合并细菌感染传播途径：飞沫传播传染源：患者、隐性感染者、被感染动物机理在呼吸道柱状上皮增殖，不引起病毒血症NA可降低细胞表面粘度，使细胞表面受体暴露，便于病毒侵袭致病特点是发病率高，死亡率低。Influenza

natural

course并发症：多见于婴幼儿、老人、慢性病患者（心血管、慢性气管炎、糖尿病）原发性病毒性肺炎继发细胞性肺炎：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、嗜血流感杆菌等Seye’s综合症：儿童的流感并发症，常发生于2-16岁，主要表现为急性脑病和肝脂肪变性。死亡率高达10%—40%。发病机理不清，可能与服用水杨酸类药物有关，故流感期间不宜服用阿斯匹林等水杨酸类药物降温并发症：多见于婴幼儿、老人、慢性病患者原发性病毒性肺炎继发细胞性肺炎Seye’s综合症：Primary

influenza

pneumonia微生物学诊断血清学诊断补体结合实验查病毒可溶性抗原病毒分离标本：口腔含漱液培养：猴肾细胞和鸡胚尿囊腔结果：红细胞凝集、血凝抑制试验分型快速诊断间接免疫荧光检查鼻咽分泌物Influenza

-

diagnosisSpecimens:

throat

swabs,

NPS,

nasal

aspirates,

sputumCulture:

conventional,

rapidDirect

detection

(EIA,

IF,

PCR)Serologic

response:

4-fold

or

greater rise

in

IgG

titers预防灭活病毒疫苗，定期注射病毒亚单位疫苗：血凝素对症治疗，防止细菌性并发症Treatment:

Amantadinebind

M2

protein,

inhibit

uncoatingselective

–

influenza

Areduce

symptom

scoreDisadvantages

:side

effects

–

CNSdrug-resistance

zanamivir,oseltamivir■Sialicacidanalogues,Inhibitinfluenza

A,B

Highlyeffective

ifstarted

early,effective

inprophylaxisNA

Inhibitor副粘病毒（Paramyxoviruses）副流感病毒腮腺炎病毒麻疹病毒呼吸道合胞病毒副粘病毒共同性状150-300nm，比正粘病毒要大-ssRNA核酸不分节段，没有感染性在猴肾细胞增殖，并有血凝现象病毒表面有两种蛋白突起血凝素（HA）或HN蛋白溶血素（HL）或F蛋白（融合蛋白）麻疹病毒（Measles

Virus）儿童最常见的急性发热性呼吸道传染病通常症状轻微，预后良好但并发症常见60年代使用疫苗后发病显著下降仍是发展中国家儿童死亡的主要原因120-250nm，-ssRNA，不分节段包膜有HA和HL两种糖蛋白突起HA只凝集猴RBC，是与细胞吸附的蛋白HL使细胞发生融合，形成多核巨细胞病毒抗原稳定，只有一个血清型唯一自然储存宿主是人是WHO计划消灭的病毒病毒抵抗力弱，一般消毒即可灭活传染源急性期患者。出疹前6天和出疹后3天都有传染性。传播途径飞沫传播，也可通过玩具传播临床表现少见但严重。呈慢性进行性，主要是少年或青年。原因可能是麻疹病毒持续感染。SSPE患者既往都有麻疹感染病史，在SSPE患者CSF中麻疹病毒抗体滴度高，尸检可在脑部检出大量核内包含体。疾病进行性发展到肌肉强直、阵挛，随着退行性改变进程，患者最终昏迷死亡呼吸道并发症气管炎、咳嗽，支气管肺炎，最常见（4%）神经系统并发症：脑炎SSPE免疫性中和保护作用HA和HL蛋白抗体好发于6个月到5岁儿童6个月内从母体得到抗体麻疹发病期间免疫系统受到抑制终生免疫病毒分离：复杂费时，临床不用。早期血液、口腔含漱液、咽拭子，接种人胚肾、猴肾、人羊膜细胞培养，增殖慢，7—10天出现典型的多核巨细胞、胞内、核内嗜酸性包涵体等CPE表现。血清学诊断双份血清，做血凝抑制试验、补结试验或中和试验。由于补结试验敏感性不，通常做HI试验。免疫荧光检测病毒特异性IgM。快速诊断：免疫荧光检测病毒抗原微生物学诊断病毒分离：复杂费时，临床不用。血清学诊断快速诊断：免疫荧光检测病毒抗原隔离患者人工自动免疫灭活疫苗：在组织培养或鸡胚纤维母细胞传代制备6个月以后的儿童皮下注射一次免疫效果好，能持3—5年被动免疫丙种球蛋白，种接触过麻疹患者的新生儿或易感成人预防隔离患者人工自动免疫被动免疫副流感病毒球形，120－250nm，不分节段-ssRNA核蛋白呈螺旋对称包膜糖蛋白突起HN蛋白有血凝素和神经氨酸酶活性F糖蛋白（融合蛋白使细胞融合和溶解红细胞属副粘病毒科副粘病毒属5个血清型飞沫传播或直接接触传播仅在呼吸道上皮细胞增殖，不入血上呼吸道感染、婴幼儿严重哮喘、支气管肺炎和肺炎诊断病毒分离和免疫荧光查抗原呼吸道合胞病毒Respiratory

Syncytial

Virus，RSV属副粘病毒科肺病毒属球形不能在鸡胚培养，但可在组织培养增殖胞浆嗜酸性包涵体一个血清型流行于冬季、早春，传染性强，是医院感染的主要病原之一潜伏期4—5天，排毒可持续1—3周引起婴幼儿的严重呼吸道感染：细支气管炎和肺炎腮腺炎病毒（Mumps

virus）属副粘病毒科副粘病毒属鸡胚羊膜腔增殖能在猴肾细胞增殖，导致细胞融合、多核巨细胞等CPE一个血清型人是唯一自然储存宿主飞沫传播引起流行性腮腺炎病后免疫力持久可用减毒活疫苗风疹病毒（Ruella

virus）披膜病毒科（Togaviridae）风疹病毒属一个血清型人是唯一宿主致病性儿童是主要易感者呼吸道传播局部淋巴节增殖后经病毒血症散播全身可垂直传播导致胎儿先天性感染预防及免疫自然感染后可获持久免疫力母亲抗体可保护胎儿接种风疹减毒活疫苗三联疫苗（MMR）冠状病毒Coronavirus，CoV

冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属

呈多形性，80nm～160nm，+ssRNA，不分节段核衣壳呈螺旋状。包膜表面有多形性花瓣状突起，形如花冠而得名重症急性呼吸综合症冠状病毒

SARS

Coronavirus,SARS

CoVSARS

2002年底在佛山首次报道SARS症状空气飞沫或密切接触传播潜伏期：2~12天，通常4~5天呈显著家庭和医院集聚现象生物学性状

60-130nm，包膜表面有明显突起■+ssRNA，29.7KB，有

14个ORF，主要是RNA聚合酶、S、E、M、N结构蛋白

在Vero细胞上有明显

CPE

感染灵长类动物，出现典型的SARS症状SARS

GenomeSARS传播和流行中国的SARS流行诊断主要依靠临床和流行病学资料病原学病毒分离RT-PCR免疫荧光、ELISA实验室要求严格生物安全资格（P3）病原学诊断尚不成熟预防

SARS

CoV比普通CoV抵抗力强，室温下痰、粪便、尿中可稳定存活1~2天

对温度敏感，37oC存活4天，56oC存活90分钟，75oC30分钟对含氯消毒剂、过氧乙酸及UV均敏感，WHO推荐中效以上的消毒剂，如过氧乙酸Summary:

Respiratory

InfectedVirusesOrthomyxovirusesInfluenza

viruseParaomyxovirusesMeasles

virusParainfluenza

virusRespiratorysyncytial

virusMumps

virusRubella

virus

Coronavirus

andSARS

CoronavirusAdenovirusesInfluenza

VirusesOrthomyxoviruses:

Influenza

Viruses

A

middle-sized

enveloped

virus

withfragmented

RNA

genomeVariation

There

two

surface

proteins

in

the

surfaceof

the

envelope.

HA

is

the

mainneutralizing

antigenHemagglutininneuaminidase

Since

the

highly

variation

of

the

genome,Influenza

happens

frequently

due

topeople

have

no

immunity

to

the

mutatedvirusesOther