一种用于增强土壤降解环丙酰草胺的生物降解方法与流程_第1页
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一种用于增强土壤降解环丙酰草胺的生物降解方法与流程_第3页
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文档简介

一种用于土壤解环丙酰的生降解法与1.本发明涉及壤污染物降解技领域,具体是涉及种用于增强土壤解环丙酰草胺的生物解方法。背技:2.农药残留在业生产中施用农后一部分农药直接间接残存于谷物蔬菜、果品、畜产、水产品中以及壤和水体中的现,农药残留问题是着农药大量生产和泛使用而产生的当农药被喷洒后有少部分会作用在物植株上,另外大分会渗入到土壤,如处理不当会土壤和水体造成严的影响,对人们生生活均带来不利响,严重的可能通过食物链富集进人体,危害人体健,现阶段引起了们广泛的关注,此,需要利用合理手段对土壤中农药留物进行降解处。3.不同农药的解方法和降解速不同,常见的农药留物降解方法有理方法、化学方法以生物方法,物理法通常是利用农的物理性质,如水性、光不稳定性热不稳定性等原去除农药残留,般有浸泡清洗法、皮、日光照射法贮藏法和吸附法;化学方法是利双氧水、臭氧、次酸盐强氧化剂或自基的强氧化作用农药分子的双键开,苯环开环,破其分子结构,生成应的酸、醇、胺其氧化物等;用生物或酶降解农药留是近几年研究的点,其中对细菌真菌的研究较为入,其中细菌适应性强,易诱发突变株而占重要地位经富集培养或分筛选等技术已发现多能降解农药的微物。4.专利cn109651015a公开了可降解土壤农药残留生物活性剂及其备方法与应用,具体组分量比如下:复合发酵产物10-15份、复合氨酸15-20份、腐殖酸20-35份、火山灰20-30份、木薯酒25-35份;复合微物发酵产物,分将含有解淀粉芽杆菌、枯草芽孢杆的菌剂单独发酵,上发酵产物混合后淀粉芽孢杆菌≥2.0亿/g、枯草孢杆菌≥2.0亿/g。活剂结构稳定,功能泛,无毒副作用在农产品质量安全及农业生态环保方面有良好的应前景,可以在农生产中有效降解土中的农药残留,尤对除草剂的残留解效果明显,抑植物对农药残留物吸收,还能促进植生长,提高产量品质。但对于环酰草胺的降解无法到很好的作用。5.环丙酰草胺(cyclanilide)属环丙羧酸类植物长调节剂,与乙烯利混具有协同增效作,主要用于棉花禾谷等作物的生。有研究表明,环丙酰草胺在土壤中易降解2,4-二氯苯胺,该代谢物对水生生物有高毒性,可能对环境产生不良影响现阶段对于环丙酰草生物降解的方法究较少,因此,要结合环丙酰草胺水解、光解以及微物特征提供一种适的增强土壤降环丙酰草胺的生物解方法。技实要素:6.针对上述存的问题,本发明供了一种用于增强壤降解环丙酰草的生物降解方法。7.本发明的技方案是:8.一种用于增土壤降解环丙酰胺的生物降解方法包括以下步骤:9.s1微生物的养:将多种微生单独在微生物培基中进行培养发酵-4d,微生物含为1-3×108个/g,再将酵后的菌液混合得混合液,将混合放入培养液中培养到稳定的微生物体混合液;10.s2土壤预处:将待处理的土壤水率调节至55-60%,土壤温控制在26±3℃,并在土壤内0.8-1m深度处每隔3m设一组气管线(1),在土壤方加盖防雨棚;11.s3微生物施:在土壤表面以10-13kg/亩的用量均喷洒步骤s1中得到的微生菌体混合液,同时始注气,并在夜间开启灯照射,持续10-15天;12.s4微生物补:在每两组气管线(1)间的土壤内部0.5-1m深度处通过压泵枪均匀注入注入量为5-8kg/亩,每隔天注入一次,共3次。13.进一步地,所步骤s1中的多种微生物以量份计包括:假单菌25-28份、芽孢杆17-19份、绿色木6-8份、镰胞霉菌-6份、草酸青霉-2份,通过对多不同微生物的复以实现对土壤中药残留的有效降尤其是针对环丙酰草的降解。14.进一步地,所步骤s1中微生物培养基的分以重量份计包括水100份、葡萄糖5-10份、琼脂12-15份、食用油3-4份、桃胶2-3份、稻壳7-8份,通过该组配比得到的微生培养基能够有效进微生物的发酵使得到的微生物活性。15.进一步地,所步骤s1中培养液的成分以量份计包括:复合基酸45-50份、磷酸二钾3-5份、硫酸镁1-3份、氯化钠5-7份、氯化钙3-4份、生物炭10份调节ph值为7.2-7.5,通过该组分比得到的培养液够使微生物聚集,且能够使微生物一步活化,原材料本较低。16.进一步地,所步骤s1中混合液在微生物养基中的培养方法体为:17.s1-1培养容器消毒在无菌培养容器加入培养液,采110-120℃高温蒸汽灭处理1h,随后抽真空至0.1pa,自然却至31-33℃;18.s1-2二次发酵:将骤s1中得到的发酵后的多微生物分别进行过,再将过滤后的微生物菌液合并搅拌均匀得混合液,在26-29℃条件下继发酵24h;19.s1-3混合:由培养容器部连续注入混合,注入速度为1kg/min,混合液培养液的重量比为1:5再由培养容器顶持续通入混合气形成气流搅拌,混气体的注入速度0.3-0.5l/min,混气体的成分按体占比为:氧气20%、一氧化氮1-2%、二氧化碳-3%、余量为氮气注入的混合气中一氧化氮是微物中重要的活性子,具有保护微生物、高微生物耐药性作用,同时也是含有no的有害气体如烟气、尾气等的回再利用;同样地co2能够提高微生物对氮的吸收作用,也是对废气尾气回收再利用。20.进一步地,所步骤s2中气管线左右两端等间距布设有若干支导气管,所述分支导管包括位于其中的伸缩机构以及所述伸缩机构外周设的纤维透气层,缩机构包括若干定连接的伸缩管伸缩机构末端设有土钻头,所述伸缩包括前段管和后管,所述前段管后段管通过一组连连接,所述连杆两设有向上凸起的位滑块,前段管后段管内上部均设用于与所述限位滑滑动连接的滑槽前段管内位于限滑块外端设有弹性囊,后段管内位限位滑块外端同设有弹性气囊,组所述弹性气囊通位于连杆下方的弹连接管连接,相两组伸缩管通过定块连接,前一组伸管的后段管内的弹性囊与后一组伸缩的前段管内的弹气囊通过贯穿所述定块的弹性软管连,通过分支导气的设置,能够增通气面积,使好氧生物活性大大提高促进对土壤中环酰草胺的生物降。21.更进一步地,述固定块内部中设置,其内表面设若干活动块,每所述活动块拼接为个完整的圆环,组活动块通过一弹簧与固定块的内连接,该设置能够伸缩机构在注气程中一点点逐步展前进而非一次性长,使布气效果加充分。22.进一步地,所步骤s3中所使用的灯光为压汞灯或氙灯,在光照条件下能够有效促进生物对对土壤中丙酰草胺的生物解。23.进一步地,所步骤s3中注入的气体为无空气,注气量为30m3/亩·d-1,所述步骤s4仅在微生物补加入后的第2天注气,注气量为10m3/亩·d-1。分多次注能够使微生物活达到最大。24.本发明的有益果是:25.(1)本发明生物降解方法通对多种不同微生物复配以实现对土中农药残留的有效降尤其是针对环丙草胺的降解,通对微生物培养基以培养液的改进能够进微生物的发酵使微生物活性更,同时可以改善土质量,提高土壤含率和含氧量,有于促进微生物对壤中环丙酰草胺的解,对于生态环的保护以及对于们生活健康的保具有重要意义。26.(2)本发明生物降解方法以色清洁生产为出发,生产成本较低注入的混合气体中一化氮是微生物中要的活性分子,有保护微生物、提微生物耐药性的作,同时也是对含有no的有害体如烟气、尾气的回收再利用;同样地,co2够提高微生物对氮的吸收作用,也对废气尾气的回收再利用。27.(3)本发明生物降解方法还供了一种高效布气管线,其通过设的分支导气管能够增通气面积,使好微生物活性大大高,促进对土壤中丙酰草胺的生物降,同时伸缩机构注气过程中一点逐步扩展前进而非次性伸长,使布气果更加充分,提布气效果。附图说明28.图1是本发明管线布气结构示图;29.图2是本发明支导气管内部结示意图;30.图3是本发明缩机构结构示意;31.图4是本发明定块结构示意图32.图5是本发明定块内部结构示图;33.图6是本发明施例中环丙酰草在不同条件下降解意图。34.其中,1-气管线,2-分支导气管,3-伸缩机构,31-伸缩管,32-前段管,33-后段管,34-连杆,35-限位滑块,36-滑槽,37-弹性气囊,38-弹性连接管,39-弹性软管,4-纤维透气层,5-破土钻头,6-固定块,61-活动块,62-弹簧。具体实施方式35.实施例136.一种用于增强壤降解环丙酰草的生物降解方法,括以下步骤:37.s1微生物的养:将多种微生物独在微生物培养中进行培养发酵3d,多种微生物以重份计包括:假单菌25份、芽孢杆菌17份、绿色菌8份、镰胞霉菌6份草酸青霉2份,微生物培养基成分以重量份计括:水100份、葡萄糖份、琼脂12份、食用油4份、桃3份、稻壳8份,生物含量为1×108个/g,再将酵后的菌液混合得混合液,将混合放入培养液中培养到稳定的微生物体混合液,微生培养基与培养液重量比为1:2,培养液的成分以重量份包括:复合氨基45份、磷酸二氢钾3份、硫酸1份、氯化钠7份、氯化钙4份、生物炭10份,调节ph值为7.238.具体地,步骤s1中混合液在微生物培养基的培养方法为:39.s1-1培养容器消毒在无菌培养容器加入培养液,采110℃高温蒸汽灭菌处理1h,随后抽真至0.1pa,自然冷却至31℃;40.s1-2二次发酵:将骤s1中得到的发酵后的多微生物分别进行过,再将过滤后的微生物菌液合并搅拌均匀得混合液,在26℃条件下继续发酵24h;41.s1-3混合:由培养容器部连续注入混合,注入速度为1kg/min,混合液培养液的重量比为1:5再由培养容器顶持续通入混合气形成气流搅拌,混气体的注入速度0.3l/min,混合气体的成按体积占比为:氧20%、一氧化氮1%、二氧碳2%、余量为氮气。42.s2土壤预处:将待处理的土壤水率调节至55%,土壤温度控制23℃,并在土内部0.8m深度处每隔3m设一组气管线1,在土壤上加盖防雨棚;43.s3微生物施:在土壤表面以10kg/亩的用均匀喷洒步骤s1中得的微生物菌体混合液同时开始注气,入的气体为无菌气,注气量为30m3/亩·d-1,并在夜间启灯光照射,所用的灯光为氙灯,续15天;44.s4微生物补:在每两组气管线1之间的土壤内部0.5m深度处通过压泵枪均匀注入,注量为8kg/亩,每隔7天注一次,共3次,在微生物加注入后的第2天注气注气量为10m3/亩·d-1。45.实施例246.本实施例与施例1基本相同,其不同之处于:微生物的组成分含量不同。47.s1微生物的养:将多种微生物独在微生物培养中进行培养发酵3.5d,多种微物以重量份计包:假单胞菌26份、芽孢杆菌18、绿色木菌7份、镰胞霉菌5份、草酸青霉2份。48.实施例349.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:微生物的成成分含量不同。50.s1微生物的养:将多种微生物独在微生物培养中进行培养发酵4d,多种微生物以重份计包括:假单菌28份、芽孢杆菌19份、绿色菌6份、镰胞霉菌6份草酸青霉1份。51.实施例452.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:微生物培基的成分含量不同。53.s1微生物的养:微生物培养基成分以重量份计括:水100份、葡萄糖7份、琼脂13份、用油3份、桃胶3份、稻壳7份,生物含量为2×108个/g。54.实施例555.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:微生物培基的成分含量不同。56.s1微生物的养:微生物培养基成分以重量份计括:水100份、葡萄糖10份、琼脂15、食用油3份、桃胶2份、稻壳7份微生物含量为3×108个/g。57.实施例658.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:培养液的分含量不同。59.s1微生物的养:培养液的成分重量份计包括:合氨基酸48份、磷酸二氢钾4份、硫酸2份、氯化钠6份、氯化钙3份、生炭10份,调节ph值为7.3。60.实施例761.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:培养液的分含量不同。62.s1微生物的养:培养液的成分重量份计包括:合氨基酸50份、磷酸二氢钾5份、硫酸1份、氯化钠5份、氯化钙3份、生炭10份,调节ph值为7.5。63.实施例864.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s1中混合液微生物培养基中的培方法参数不同。65.s1-1培养容器消毒在无菌培养容器加入培养液,采115℃高温蒸汽灭菌处理1h,随后抽真至0.1pa,自然冷却至32℃;66.s1-2二次发酵:将骤s1中得到的发酵后的多微生物分别进行过,再将过滤后的微生物菌混合并搅拌均匀到混合液,在28℃条件下继续发24h;67.s1-3混合:由培养容器部连续注入混合,注入速度为1kg/min,混合液培养液的重量比为1:5再由培养容器顶持续通入混合气形成气流搅拌,混气体的注入速度0.4l/min,混合气体的成按体积占比为:氧20%、一氧化氮2%、二氧碳2%、余量为氮气。68.实施例969.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s1中混合液微生物培养基中的培方法参数不同。70.s1-1培养容器消毒在无菌培养容器加入培养液,采120℃高温蒸汽灭菌处理1h,随后抽真至0.1pa,自然冷却至33;71.s1-2二次发酵:将骤s1中得到的发酵后的多微生物分别进行过,再将过滤后的微生物菌液合并搅拌均匀得混合液,在29℃条件下继续发酵24h;72.s1-3混合:由培养容器部连续注入混合,注入速度为1kg/min,混合液培养液的重量比为1:5再由培养容器顶持续通入混合气形成气流搅拌,混气体的注入速度0.5l/min,混合气体的成按体积占比为:氧20%、一氧化氮1%、二氧碳3%、余量为氮气。73.实施例1074.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s2中土壤预理参数不同。75.s2土壤预处:将待处理的土壤水率调节至58%,土壤温度控制26℃,并在土内部0.9m深度处每隔3m设一组气管线1,在土壤上加盖防雨棚。76.实施例1177.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s2中土壤预理参数不同。78.s2土壤预处:将待处理的土壤水率调节至60%,土壤温度控制29℃,并在土内部1m深度处每隔3m铺一组气管线1,在土壤上方盖防雨棚。79.实施例1280.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s3、s4中具参数不同。81.s3微生物施:在土壤表面以12kg/亩的用均匀喷洒步骤s1中得的微生物菌体混合液同时开始注气,入的气体为无菌气,注气量为30m3/亩·d-1,并在夜间启灯光照射,所用的灯光为氙灯,续12天;步骤s4中仅82.s4微生物补:在每两组气管线1之间的土壤内部0.7m深度处通过压泵枪均匀注入,注量为7kg/亩,每隔7天注一次,共3次,在微生物加注入后的第2天注气注气量为10m3/亩·d-1。83.实施例1384.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:步骤s3、s4中具参数不同。85.s3微生物施:在土壤表面以13kg/亩的用均匀喷洒步骤s1中得的微生物菌体混合液同时开始注气,入的气体为无菌气,注气量为30m3/亩·d-1,并在夜间启灯光照射,所用的灯光为高压汞,持续10天;86.s4微生物补:在每两组气管线1之间的土壤内部1m深度处通过高泵枪均匀注入,注入为5kg/亩,每隔7天注入次,共3次,在微生物补注入后的第2天注气,气量为10m3/亩·d-1。87.实施例1488.本实施例与实例1基本相同,其不同之在于:89.步骤s2中管线1左右两端均等间距设有若干分支导管2,分支导气管2包括位于其中的伸缩机构3以及在伸缩机构3外周套设的纤维透气层4,伸缩机构3括若干固定连接伸缩管31,伸缩机构3末端设有土钻头5,伸缩管31包括段管32和后段管33,前段32和后段管33通过一组杆34连接,连34两端设有向上凸起的限滑块35,前段管32和段管33内上部均设有用与限位滑块35滑动连接的滑36,前段管32内位于位滑块35外端设有性气囊37,后段管33内位限位滑块35外端同样有弹性气囊37,两组性气囊37通过位于连杆34下方的性连接管38连,相邻两组伸缩管31过固定块6连接,前一组伸缩31的后段管33内的弹气囊37与后一组伸管31的前段管32内的弹性囊37通过贯穿固定块6的弹性软管39连接,定块6内部中空设置,其内表设有若干活动块61,每组活动块61拼接为个完整的圆环,组活动块61通过一组弹簧62与定块6的内壁连接。90.上述气管线的工作原理为91.当对气管线通气后,空气入分支导气管2内,首先充入前段32内的弹性气囊37中弹性气囊37充气后挤压限滑块35使其沿滑槽36滑动,当前段管32内的性气囊37充满气后在通过性连接管38对后段管33内的弹性气囊37充气同样弹性气囊37充气后挤限位滑块35使其沿滑36滑动,完成伸缩管31的长,当一组伸缩31完全伸长后,气体入弹性软管39内,弹性软39内充气后挤压活动块61,使活块61在弹簧62的作用下向固定块6内壁移,增大通气面积以便于对下一组伸管31内的弹性气囊37充气,从而成整个伸缩机构的伸长;随后入的气体由纤维气层4进入到土壤内部。92.实验例93.对实施例1-13中的土壤样进行检测,测试壤内部环丙酰草的含量以确定降解果,所选土壤均为收相同程度环丙酰胺污染的江西红,检测结果如下:[0094][0095][0096]由以上数据可以出,实施例1-3中环丙酰草胺留浓度较低,半期差异不大,因,本发明的微生的组成成分含量能够土壤中环丙酰草的降解起到良好作用;[0097]对比实施例1、、5可知,实施例4中的环酰草胺残留浓度低,因此,实施例4中的微生物养基的成分含量培养发酵出的生物混合液对于丙酰草胺的降解效果最;[0098]对比实施例1、、7可知,实施例7中的环酰草胺残留浓度低,因此,实施例7中的培养液成分含量进一步养的微生物对于环酰草胺的降解效最好,此外,半期与最终环丙酰胺的浓度呈正比[0099]对比实施例1、、9可知,实施例8中的环酰草胺残留浓度低,这是因为实施例8中所选用的二次酵温度合适,使生物的活性达到大,同时注入的混气体中no与co2配比更为合理,一步提高了微生物活性,而实施例9中co2浓度过高可是降解效果不好的因之一;[0100]对比实施例1、1011可知,三组实施例中环丙酰胺残留浓度与半期成反比,说明初期含率高则初期的降速度较快,但最可能会造成环丙酰胺残留较多,而初含水率低则初期降解速度虽然较,但能够使环丙酰胺降解的更为彻底[0101]对比实施例1、1213可知,对于微生物的喷洒方,需选取合适的洒量以及喷洒周期,不短时间内喷洒过也不宜长时间少喷洒,且还应选取适的深度进行施加实施例12中的微生物施加参最优;[0102]如图6所示,对比为无氧状态即不用所述气管线注气得的降解效果,以看出,在无氧态下,环丙酰草残留浓度较高,明无氧状态下微生活性降低,使用本明实施例14中的气管线对土中进行注气能够环丙酰草胺的降解起到积极作用。技特:1.一种用于增土壤降解环丙酰胺的生物降解方法其特征在于,包以下步骤:s1微生的培养:将多种微物单独在微生物养基中进行培养发-4d,微生物含为1-3×108个/g,再将酵后的菌液混合得混合液,将混合放入培养液中培养到稳定的微生物体混合液;s2土壤预处理将待处理的土壤含率调节至55-60%,土壤温控制在26±3℃,并在土壤内0.8-1m深度处每隔3m设一组气管线(1),在土壤方加盖防雨棚;s3微生物施加:在土壤表面10-13kg/亩的用量均喷洒步骤s1中得到的微生菌体混合液,同时始注气,并在夜间开启灯照射,持续10-15天;s4微生补加:在每两组管线(1)之间的土壤内部0.5-1m深度处通过压泵枪均匀注入注入量为5-8kg/亩,每隔天注入一次,共3次。2.据权利要求1所述的一用于增强土壤降解环丙酰胺的生物降解方,其特征在于,述步骤s1中的多种微生物以重量份计包:假单胞菌25-28份、芽孢杆17-19份、绿色木6-8份、镰胞霉菌-6份、草酸青霉-2份。3.根据利要求1所述的一种用于增强壤降解环丙酰草的生物降解方法,其特征在,所述步骤s1中微生物培养的成分以重量份包括:水100份、葡萄糖-10份、琼脂12-15份、食用油3-4份、桃胶2-3份、稻壳7-8份。4.根据利要求1所述的一种用于增强壤降解环丙酰草的生物降解方法,其特征在,所述步骤s1中培养液的成以重量份计包括复合氨基酸45-50份、磷酸二钾3-5份、硫酸镁1-3份、氯化钠5-7份、氯化钙3-4份、生物炭10份调节ph值为7.2-7.5。5.根据权利求1所述的一种用于增强壤降解环丙酰草的生物降解方法,其特征在于所述步骤s1中混合液在微生培养基中的培养法具体为:s1-1培养容器消毒在无菌培养容器加入培养液,采110-120℃高温蒸汽灭处理1h,随后抽真空至0.1pa,自然却至31-33℃;s1-2二次发酵:将骤s1中得到的发酵后的多微生物分别进行过,再将过滤后的微生物菌液合并搅拌均匀得混合液,在26-29℃条件下继发酵24h;s1-3混合:由培养容器部连续注入混

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