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文档简介

实验六细菌的药敏试验一、试验目的二、试验原理三、试验材料四、试验方法和步骤五、思考题一、实验目的了解抗生素和抗生素抗性的作用机制。掌握药敏试验的原理和临床意义。掌握药敏试验扩散法的实验操作。二、试验原理1.抗生素作用机制①影响细胞壁的合成，如青霉素、万古霉素；②抑制蛋白质的合成，如四环素、氯霉素；③作用于细胞膜，如多粘菌素、多烯类化合物；④抑制核酸的合成，如利福平、氯喹；2.药敏试验稀释法：待检细菌接种于不同稀释浓度的固体或液体培养基上，测定MIC或MBC。扩散法：抗菌药物置于接种细菌的固体培养基上，测定待检细菌的抑菌环。稀释法MIC：MinimalinhibitionconcentrationMBC：Minimalbacteriocidalconcentration抗菌药物稀释成不同浓度接种待测菌进行培养测定药物的最低抑制浓度(MIC）或最低杀菌浓度（MBC）

精确扩散法接种待测菌在固体培养基上将抗菌药物置于接菌培养基上抗菌药物向培养基中扩散，形成浓度梯度抑制细菌的生长，从而出现抑菌环根据抑菌环的大小，判定细菌对药物的敏感度

定性三、试验材料被检细菌:1株药敏纸片灭菌生理盐水培养皿和棉签吸耳球和吸管四、实验方法和步骤细菌培养比浊稀释菌液涂布贴药敏纸片无菌操作细菌培养：挑取菌落4~5个，接种于培养基中，置37℃培养6~12小时。比浊：取1ml的细菌悬液，用麦氏比浊管测定浓度。稀释：根据测定的浓度和终浓度（1.5亿/ml），计算出需要补加的生理盐水的量，进行稀释和矫正。菌液涂布：用无菌的棉拭子蘸取上述细菌悬液，用棉拭子涂于琼脂表面，盖好平皿，在室温干燥5~10min，待平皿表面稍干后再放含药纸片。贴药敏纸片：用镊子取出含药纸片贴在涂有细菌的平皿表面，之后轻轻按压。（将学号或姓名写在平皿上）直径9cm将平皿放在37℃温箱中培养16~18h，观察结果。结果观察：周四上午11:00-11:30，407室有无污染；有无抑菌环；量其直径大小(mm)。附1.试验分组平皿：35个,2人/个棉签：35支,2人/支生理盐水：4人/瓶药敏纸片:4套小镊子：

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