食品卫生指标菌的检验-食品中菌落总数检验技术

食品微生物与检验菌落总数定义及检验意义GB4789.2-2016LOREMIPSUMDOLOR菌落总数aerobicplatecount

食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。一、菌落总数的概念GB4789.2-2016一、菌落总数的概念菌落：Colony，单个微生物在合适固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见有一定细菌群落。CFU：ColonyFormingUnits,菌落形成单位。鉴于食品的细菌细胞是以单个、成双、链状、葡萄状或成堆的形式存在，因而在平板上出现的菌落可以来源于细胞块，也可来源于单个细胞，因而平板上所得菌落的数字不应报告活菌数，而应以单位重量、容积或表面积内的菌落数或菌落形成单位（CFU）报告。食品微生物与检验食品中菌落总数检验过程GB4789.2-2016一、菌落总数操作流程图一、菌落总数操作流程图培养条件：一般食品：36℃±1℃，培养48h±2h水产品：30℃±1℃，培养72h±3h二、培养条件未加工水产品受到海洋和陆地细菌的污染，水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，检验时应采用30℃±1℃。水产品定义见GB2760或GB2762此处并非指水产制品ACB每个样品从开始稀释到倾注平皿耗时≦15min，防止细菌增殖和产生片状菌落。（肠杆菌繁殖一代20min）样液与琼脂应充分混合，避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。平皿内琼脂凝固后，不要长时间放置，然后倒置培养，可避免菌落蔓延生长。检样过程中应用稀释剂做空白对照，用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。应为吸取1mL空白稀释液加入到两个无菌平皿内，可表示为空白对照平皿结果0/0。三、注意事项1称量、稀释的量应尽量准确，以减少误差。23样品稀释时，每步稀释应更换吸管或吸头。操作中必须注意无菌操作，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质；剪刀、镊子等也必须经消毒处理；样品包装应用75%酒精在包装开口处擦拭后取样。三、注意事项4在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。56倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝固而不能与菌液充分混匀。如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。倾注培养基的量一般以15mL~20mL较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。三、注意事项食品微生物与检验菌落总数检验结果及报告GB4789.2-20160201若其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板书作为该稀释度的菌落数。若片状菌落不到平板的一半，而其余一半菌落分布均匀，可计算半个平板后乘以2代表整个平皿菌落数。选取菌落数在30-300之间的平板作为菌落总数测定标准。1.平板菌落数的选择一、菌落计算方法无明显界限链状菌落每个单链视为一个菌落（可采用覆盖方式减少菌落蔓延，如对水产、蜂蜜样品时）0201若只有一个稀释度平板在30-300CFU之间，则计算两平行平板的均数，乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度都大于300，则按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。2.计算方法一、菌落计算方法040305若所有稀释度都小于30，则按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度都无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。若所有稀释度均不在30-300之间，则以近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。2.计算方法一、菌落计算方法06若有两个连续稀释度平板在30-300CFU之间，则按一下公式：2.计算方法一、菌落计算方法1:100（第一稀释度）232,2441:1000（第二稀释度）33,35举例1：一、菌落计算方法1:1000（第一稀释度）232,2441:10000（第二稀释度）33,29举例2：一、菌落计算方法例子稀释度及菌落数描述菌落总数/(cfu/g)或（cfu/mL）报告方式/(cfu/g)或（cfu/mL）10-110-210-31多不可计16420有一个稀释度在30~300之间1640016000/1.6×1042多不可计29546两个稀释度在30~300之间3775038000/3.8×1043多不可计多不可计313所有稀释度都大于30031300310000/3.1×105427115所有稀释度都小于30270270/2.7×1025000所有平板无菌落<10<106多不可计30512所有平板都不在30~300之间有大于300，有小于303050031000/3.1×104稀释度的选择及菌落数据报告方式一、菌落计算方法例子稀释度及菌落数菌落总数/(cfu/g)或（cfu/mL）报告方式/(cfu/g)或（cfu/mL）10-110-210-31多不可计248