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文档简介

鲍曼不动杆菌的生物危害评估报告一、 细菌的传播和致病鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌,广泛存在于自然界的水及土壤、医院环境及人体皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖道中,为条件致病菌。该菌在医院环境中分布很广且可以长期存活,极易造成危重患者的感染,因此常从被感染患者的血、尿、脓液及呼吸道分泌物等标本中分离出。。调查结果显示,鲍曼不动杆菌以痰液及支气管吸出物标本中检出最多,其次为脓液及分泌物。感染源可以是病人自身(内源性感染),亦可以是不动杆菌感染者或带菌者,尤其是双手带菌的医务人员。传播途径有接触传播和空气传播。在医院里,污染的医疗器械及工作人员的手是重要的传播媒介。易感者为老年患者、早产儿和新生儿,手术创伤、严重烧伤、气管切开或插管、使用人工呼吸机、行静脉导管和腹膜透析者,广谱抗菌药物或免疫抑制剂应用者等。在使用呼吸机者中,肺炎发生率约为3%~5%二、 细菌的生物学特性碗昌左洲出工1S七苗MHR日枇1S袖出工井拄站1KSffiW1.5pmx1.5-2.5pm)有时很难脱色,圣事^如]的十刀、七/ ^3常成对排列。在静止生长和非选择性琼脂,以球杆状形态为主,

而在液体培养基中的早期培养物和在含抗细胞壁的抗生素平板上的培养物,多为杆状。菌落光滑,不透明,比肠杆菌科成员的菌落略小一些,菌落为无色或略带粉色。鲍曼不动杆菌为专性需氧菌,营养要求不高,普通培养基上生长良好,最适生长温度35°C,可在麦康凯培养基上生长。三、细菌的实验室检查及其它检查根据采样部位的不同细菌分离培养的方法略有不同。① 5-10ml氏法坨右nR照氏法 罟毛M;才修rb3000-4000r/min离心30min偷土I-W满日ST7骞全四苗兰染色后镜检。取1ul标准环尿液在血平皿上按四区法划线.力、时而亚叫有菌落生长T做菌落计数37C培养力、时而亚叫有菌落生长T做菌落计数分纯待进一步鉴定。②脑脊液标本(<I ■ _1__I、_I_ 1_ I 1-11— I 、/ ■■_、_I_口匚utd I—I-mil LTiYll /K LIU /K ―I—包液等)标本. 15min页田直土立v全四苗乂工油存垸木、南(1500g)-将已离心的沉淀物做t根据革兰染色的细菌形态,37C扪先坦不咸边加苗队珀坐址珀而亚血:1力171]反注令||雄甘培养18-24小时而亚rm右■首霆'Zt-K-公4击公苗一车竖注1同时将标本接种营养肉汤进行增菌培养,37C培养18-24小37C培养18-24口d■三 BV+ttiS满垃壬由而亚rmtUt 小时如果血平皿有菌落生长分纯待进一步鉴定。尚皇nffl立妇七亚田苗■土立恰巴苗工工法在11=1时拭子直接接种血平板按四区法划线。37对培养18——24h,分纯待进一步鉴定。eHsb 毛nAiI愿咸油垸木寸亚垸tIv直土立土立壬出而亚*布于寺四区37°C培养18--24h,分纯待进一步鉴定。法划线余^rfrl>2&inrtK- inrtK-页任1~\TBFIntt■,出0左冰1 "Hi"毋ImD白77"h血培养仪检测法增菌。若指示有细菌生长,立即用注射器无菌法抽取阳性瓶中培养物作涂片、革兰染色、显微镜检查做初步判断,同时接种血琼脂平皿,37C需氧培养。⑥痰标本不含或含粘液很少合格标本,可直接接种。遇有含大量粘液的标本,应加入等量液化剂sputosol品化的痰液溶解剂作用20min,溶解粘痰,使痰液均质化后接种。将处理后的痰液接种于血琼脂平板、37C培养18-24h24h无细菌生长应再放置24h4击[主ntt 4^11^'ri^'"hn观察菌落生长情况如仍无生长则定为阴性。已接种的培养基需连续培养观察3d,确认无疑似鲍曼不动杆菌落出现时方可经高压灭菌后弃去。可疑菌落经分纯后,接种2个血平板分别置于35C和44C培养箱中培养18--24小时,44C生长可将鲍曼不动杆菌和(genomospeciesTU13与其他不动杆菌区别开来\获单个纯菌落后种于生化鉴

中攵I-中攵I-定方法。进行菌种鉴定。补充触酶、动力、及分子生物学鉴3尿液菌落计数取1ul接种环尿液所生长的菌落数乘以1000即为每ml的菌落数CFU/ml 105CFU/mlll>XFtI-N4m ,址斗1诊断泌尿系感染的重要指标。诊断泌尿系感染的细菌学标准105cfu/ml 。是菌落计数2 才有诊断价值4生化鉴定不动杆菌属一般特性为革兰氏阴性、需氧、无动力的双球菌或球杆菌.触酶阳性、过氧化酶阴性。生化反应的一般性状为氧化酶阴性触酶阳性无动力吲哚阴性不发酵糖类不还原硝酸盐。操作方法为挑取纯培养的细菌进行生化鉴定,补充触酶、动力试验,具体方法见生物化学鉴定部分。习1才唉田井苗土品:士*兀苗空击II左中汪瓦7如1苗三垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处,再沿原穿刺线抽出即可,置37对温箱培养,次日观察结果。无动力之细菌仅沿穿刺线生长,清晰可见有动力的细菌使培养基呈现混浊样穿刺线甚至难以看出。5、KIA鉴定结果底层及斜面均不变色。结果判定标H2S中层或底部变黑,葡萄糖分解,斜面变红,中曰七苗在1

曰七苗在1

或破碎)6乳糖发酵,中层及斜面变黄。产气(中层有气泡四、细菌的防治在院内感染中,不动杆菌属的感染占有较高的比例,而在院内提取到的不动杆菌属的菌株,绝大多数为鲍曼不动杆菌。鲍曼不动杆菌为革兰氏阴性菌,故对万古霉素等存在固有耐药,对青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、氯霉素、四环素、第一及第二代头抱菌素也保持着较高的耐药率。通常情况下,对鲍曼不动杆菌有较强作用的药物主要有抗绿脓杆菌的青霉素类、第三和第四代头抱菌素(主要是头抱他啶、头抱吡肟等)、碳青霉烯类、阡内酰胺类抗生素复合制剂(头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等)、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、替加环素、多粘菌素、舒巴坦等。但是因为近年来抗菌药物的滥用,鲍曼不动杆菌对以上药物的耐药率也在不断上升,氟喹诺酮类、氨基糖苷类等耐药率甚高,碳青霉烯类的耐药率也有上升。考虑到鲍曼不动杆菌极易对抗菌药物耐药,故用药时应联合用药。常用的方案有8-内酰胺类+氟喹诺酮类、8-内酰胺类+氨基糖苷类等。我个人首选的方案为头孢哌酮/舒巴坦+磷霉素(时间差攻击疗法),也可选择氨苄西林/舒巴坦+环丙沙星等)。鉴于近年鲍曼不动杆菌的耐药率有进一步上升的趋势,这应当引起临床医师及微生物界的高度重视。为减少该菌医院感染的发生及多重耐药菌株的出现,我们应对医疗器械进行严格彻底的消毒及对鲍曼不动杆菌进行规范的连续监测,弄清其耐药机制并及时监测其耐药情况。同时,临床医师应重视获得性鲍曼不动杆菌感染,与临床微生物实验室密切协作,加强耐药性的监测,有效预防和控制感染。五、细菌的生物安全防护根据《病原微生物生物实验室生物安全管理条例》中的有关规定,人间传播的微生物名录鲍曼不动菌属于三类,BSL-2。在实验室操作上对于有高风险的人员,如免疫缺陷者,要严格限制进入。对于

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