毛细管气相色谱法测定止咳枇杷颗粒中薄荷脑的含量

毛细管气相色谱法测定止咳枇杷颗粒中薄荷脑的含量【摘要】目的建立止咳枇杷颗粒中薄荷脑的测定方法。方法采用气相色谱法，色谱柱为Wax10毛细管柱，柱温为110℃，进样口温度为250℃，检测器温度为250℃；FID检测器。结果薄荷脑在7～3mg/mL范围内线性关系良好，平均回收率为%，RSD为%。结论该法简便、准确，适用于止咳枇杷颗粒中薄荷脑的测定。

【关键词】止咳枇杷颗粒薄荷脑气相色谱法

止咳枇杷颗粒由枇杷叶、桑白皮、白前、百部、桔梗、薄荷脑、蔗糖等制成，具有清肺、止咳、化痰的功效，用于咳嗽多痰、支气管炎等。现行的部颁标准中药成方剂第二册WS3—B—0212—90质量标准中收载了该制剂，只作了定性鉴别，无定量检测方法。本文毛细管气相色谱法测定止咳枇杷颗粒中薄荷脑的含量，为止咳枇杷颗粒的质量控制提供依据。

1仪器与材料

GC2010气相色谱仪；GCsolution气相色谱站；SPL毛细管柱进样口；Wax10毛细管柱。

止咳枇杷颗粒，薄荷脑对照品；水杨酸甲酯，其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

色谱条件

色谱柱：Wax10毛细管柱，柱温为110℃，进样口温度为250℃，检测器温度为250℃；FID检测器。载气为高纯度氮气，流速：ml/min，进样量为1μL。薄荷脑、水杨酸甲酯的理论塔板数不低于5000。色谱见图1。

A.薄荷脑对照品;B.样品;C.阴性样品

图1气相色谱图

Figure1Gaschromatograms

样品测定方法

内标溶液的制备精密称取水杨酸甲酯适量，置500mL量瓶中，用无水乙醇配制成9mg/mL的溶液，摇匀，即得。

对照品溶液的制备精密称取薄荷脑mg，置50mL量瓶中，加内标溶液溶解并定容，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液5mL，置20mL量瓶中，加内标溶液溶解并定容，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液的制备取本品适量，研细，精密称取本品5g，置具塞锥形瓶中，精密加入内标溶液20mL，超声20min，取上清液用滤膜过滤，取续滤液，即得。

测定方法分别精密吸取对照品和供试液各1μL，注入气相色谱仪，测定薄荷脑对照品和水杨酸甲酯峰面积，计算校正因子，按内标法计算即得。

方考察

线性关系考察精密吸取上述薄荷脑对照品储备液适量，用内标溶液制成薄荷脑质量浓度分别为3、3、1、2、9、7mg/mL的系列溶液，分别吸取上述溶液1μL注入气相色谱仪，记录色谱图，以薄荷脑质量浓度为横坐标，以薄荷脑峰面积与内标峰面积之比为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=+，r=0，结果表明薄荷脑在7～3mg/mL范围内线性关系良好。

稳定性试验取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、24h进样测定，结果薄荷脑平均质量分数为%，RSD为%，表明供试品溶液在24h内稳定。

精密度试验取同一份供试品溶液，重复进样6次，结果供试品中薄荷脑平均质量分数为%，RSD为%。

加样回收率试验取已知含量的样品6份，每份约g，精密称定，分别精密加入上述对照品储备液适量，按“”项下方法制备供试品溶液，依次测定，测得平均回收率为%，RSD为%，见表1。

重复性试验取同一批号的止咳枇杷颗粒6份，按“”测定方法测定含量，6份样品的薄荷脑含量的RSD为%，表明本方法重复性较好。

样品测定

取3批样品，按照“”项的方法制备供试品溶液，按“”项色谱条件下进行测定，3批样品的质量分数分别为%、%、%。

表1止咳枇杷颗粒加样回收率试验

Table1RecoveryofZhikePipagranule

3讨论

色谱条件的选择

参考文献［1］，采用柱温：150℃、FID检测器温度：190℃、进样口温度：190℃的条件，薄荷脑峰与杂质峰分不开。参照部颁标准［４］改为柱温：110℃、FID检测器温度：250℃、进样口温度：250℃，薄荷脑峰和杂质峰分离良好。

提取溶剂的选择

参考文献［1～3］选用无水乙醇为提取溶剂，水杨酸甲酯为内标物。

提取方法的选择

比较了无水乙醇加热回流提取和超声提取2种方法对薄荷脑的提取效果，结果表明加入20mL内标溶液回流h与加入20mL内标溶液超声提取效果基本一致，薄荷脑质量分数分别为%和%，RSD为%。考虑到超声20min提取方法方便、快捷，为节约时间和成本，采用超声20min的方法作为提取方法。

色谱柱的选择

比较Wax10毛细管柱和AT1毛细管柱的分离效果，结果Wax10毛细管柱气相色谱的峰形和出峰时间比较适中，而AT1不理想。

【参考文献】

［1］张雪，邵燕虹，张慧敏.气相色谱法测定苍耳子鼻炎胶囊中薄荷脑和龙脑的［J］.综述，2008，14：7913-7914.

［2］杨敏，刘吉金.气相色谱法测定蜜炼川贝枇杷膏中薄荷脑和苯甲醛的含量［J］.中国实验方剂学杂志，2008，14：32-42.

［3］陈月英，莫云燕，林子夏，等.毛细管气相色谱法测定止痒灵中的苯酚和薄荷脑［J］.广东药学院学报，2007，23：245-246.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国卫生部部颁标准中药成方剂第二册［M］.北京：化学工业出版社，2002：216.

稳定性试验取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、24h进样测定，结果薄荷脑平均质量分数为%，RSD为%，表明供试品溶液在24h内稳定。

精密度试验取同一份供试品溶液，重复进样6次，结果供试品中薄荷脑平均质量分数为%，RSD为%。

加样回收率试验取已知含量的样品6份，每份约g，精密称定，分别精密加入上述对照品储备液适量，按“”项下方法制备供试品溶液，依次测定，测得平均回收率为%，RSD为%，见表1。

重复性试验取同一批号的止咳枇杷颗粒6份，按“”测定方法测定含量，6份样品的薄荷脑含量的RSD为%，表明本方法重复性较好。

样品测定

取3批样品，按照“”项的方法制备供试品溶液，按“”项色谱条件下进行测定，3批样品的质量分数分别为%、%、%。

表1止咳枇杷颗粒加样回收率试验

Table1RecoveryofZhikePipagranule

3讨论

色谱条件的选择

参考文献［1］，采用柱温：150℃、FID检测器温度：190℃、进样口温度：190℃的条件，薄荷脑峰与杂质峰分不开。参照部颁标准［４］改为柱温：110℃、FID检测器温度：250℃、进样口温度：250℃，薄荷脑峰和杂质峰分离良好。

提取溶剂的选择

参考文献［1～3］选用无水乙醇为提取溶剂，水杨酸甲酯为内标物。

提取方法的选择

比较了无水乙醇加热回流提取和超声提取2种方法对薄荷脑的提取效果，结果表明加入20mL内标溶液回流h与加入20mL内标溶液超声提取效果基本一致，薄荷脑质量分数分别为%和%，RSD为%。考虑到超声20min提取方法方便、快捷，为节约时间和成本，采用超声20min的方法作为提取方法。

色谱柱的选择

比较Wax10毛细管柱和AT1毛细管柱的分离效果，结果Wax10毛细管柱气相色谱的峰形和出峰时间比较适中，而AT1不理想。

【参考文献】

［1］张雪，邵燕虹，张慧敏.气相色谱法测定苍耳子鼻炎胶囊中薄荷脑和龙脑的［J］.综述，2008，14：7913-7914.

［2］杨敏，刘吉金.气相色谱法测定蜜炼川贝枇杷膏中薄荷脑和