动物细胞融合和单克隆抗体“衡水杯”一等奖

2.3动物细胞工程的应用（Ⅱ）太空婚礼境情设创2002年１２月３０日，

两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在“产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后，我国首批”太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明，细胞融合率大大提高。“太空婚礼”神舟放飞强国梦“太空婚礼”科研项目一：“太空婚礼”科研项目二：

挑战自我植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术知识回顾植物体细胞杂交过程植物细胞A（番茄）植物细胞B（马铃薯）去除细胞壁原生质体A原生质体B原生质体融合正在融合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞脱分化愈伤组织杂种植株(番茄马铃薯)再分化境情设创习学主自1.动物细胞融合的概念2.动物细胞融合的原理3.诱导动物细胞融合的方法4.动物细胞融合的意义和应用任务：阅读教材第52页时间：2分钟问题：一、动物细胞融合1.概念：动物细胞融合:也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。2、原理：细胞膜的流动性纳归题问3.诱导方法：物理方法：化学法：生物法：灭活的病毒电激等聚乙二醇（PEG)纳归题问灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏这些病原体的抗原结构。纳归题问纳归题问纳归题问4.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。5.应用：最重要的用途是制备单克隆抗体主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较20世纪90年代初，英国科学家成功地利用“生物导弹”单克隆抗体瞄准并杀死了癌细胞，使患血癌的一名67岁退休教授与一名女患者的癌细胞奇迹般消失了。被称为“生物导弹”的单克隆抗体，能够跟踪和杀死细菌、病毒或癌细胞。境情设创

习学主自1．传统抗体的获得方法、特点2．单克隆抗体的制备过程3．单克隆抗体的应用、优点4.单克隆抗体的概念任务：阅读教材第52页—54页时间：5分钟问题：2、什么是抗体？二、单克隆抗体回顾3、抗体的分布？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。1、什么是克隆？“克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养.4．传统抗体的获得(1)方法：①向动物体内反复注射某种_____，使动物产生_____；②从动物_____中分离所需抗体。(2)特点：_______、纯度低、_______差。抗原抗体血清产量低特异性纳归题问B淋巴细胞特点３．每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。纳归题问1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？不可能2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？癌细胞3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？细胞融合生产单克隆抗体思路纳归题问一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖杂交细胞既能产生特异性抗体，又能大量繁殖B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞B淋巴细胞---B淋巴细胞B淋巴细胞---骨髓瘤细胞多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养5、单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。杂交瘤细胞有何特点？特异性强，灵敏度高免疫小鼠培养骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞B淋巴细胞注射特定抗原蛋白选择培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点？本过程利用的那些技术？动物细胞融合技术动物细胞培养技术是否注射抗原（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？两次筛选的目的分别是什么？与传统制备的抗体相比具有什么特点？5．单克隆抗体的制备脾骨髓瘤细胞B淋巴细胞杂交瘤细胞增殖产生抗体克隆化抗体体外培养小鼠腹腔细胞培养液腹水究探作合1、（只考虑两两融合）融合细胞几种类型？2、本过程中进行了两次筛选，目的分别是什么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？3、杂交瘤细胞有何特点？骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞B淋巴细胞---B淋巴细胞B淋巴细胞---骨髓瘤细胞该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。4.在制备单克隆抗体的过程中，选用哪两种细胞进行融合？为什么选择这两种细胞？浆细胞和骨髓瘤细胞浆细胞能产生单一抗体，但不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生单一抗体。究探作合6．单克隆抗体的应用(1)优点：_________、_________、产量大。(2)应用①作为诊断试剂，具有准确、_____、简易、_____的优点。②用于_________和_________。特异性强灵敏度高高效快速治疗疾病运载药物纳归题问生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）7.概括单克隆抗体的概念单：单个细胞克隆:无性繁殖

抗体:化学性质单一、特异性强单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体1.动物细胞融合技术的原理、过程、概念、应用2.单克隆抗体的制备过程及应用结小堂课1.(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融合的特有的诱导因素是(

)A．离心 B．灭活的病毒C．电激 D．振动习练馈反B2.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是()

A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞

C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞A3.“生物导弹”是指()

A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单克隆抗体上连接抗癌药物习练馈反D4.动物细胞融合技术最重要的用途是()

A.克服远源杂交不亲和B.制备单克隆抗体C.培育新物种D.生产杂种细胞BA、B细胞为动物细胞,请据图回答问题:A细胞B细胞C细胞D细胞(1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为

细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨髓瘤细胞的

性质,通过

方式产生大量细胞,我们称之为

过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称

.杂交瘤有丝分裂无限增殖单克隆单克隆抗体练一练(2)D细胞中产生的抗体其化学本质是

,合成该物质的场所是

,它是由

控制合成的,合成过程包括

和

两个重要步骤.球蛋白核糖体基因转录翻译(3)D细胞中产生的抗体具有

作用,与血清抗体相比其优越之处在于

强

高.免疫特异性灵敏度B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

1.右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案制备单克隆抗体不能，没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞。(1).该实验方案的目的是：________________(2).该方案能达到预期效果吗？为什么？B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

(3).A是从小鼠的脾脏中取得__________该细胞能够产生______。(4).图中B为__________过程，常用___________作为诱导剂，该细胞继承__________的遗传特性，既能__________