无菌检查方法验证方案

无菌检查方法验证验证工程编号R-YZ-501-01年 月验证机构云南德华生物药业质控部化验室负责部门：质控部序号姓序号姓名部门职务组内职务本人签名1杨祖平质控部负责人组长2试验室QC操作对验证方案批准表示同意其测试内容、测试方法和本方案内的各种表格格式、内容。方案起草方案起草签名日期方案审核方案审核签名日期方案批准方案批准签名日期4目录概述验证目的验证范围验证人员及职责文件预备和培训验证条件及验证时间安排验证依据验证过程评价标准验证过程评价验证结论建议无菌检查方法验证概述无菌检查是用于检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及其它品种是否无菌的一种方法。无菌检查工作量大、操作不标准、人员的学问匮乏、检查方法应用不当等都会导致试验失败，因此在对一个产品进展无菌检查之前应先对无菌检查方法进展验证。验证目的确认所用的无菌检查方法适用于“医用即溶止血纱布”的无菌检查。确保检查结果的准确性、牢靠性、准确性和重性以及检查方法的完整性。通过对不同批次产品无菌检查的比较，对医用即溶止血纱布产品的生产全过程进展质量监控。验证范围医用即溶止血纱布产品的无菌检查。验证人员及职责验证委员会负责验证工程确实定；质控部负责该验证方案的起草及组织实施；验证小组负责验证方案的审批；质控部参与验证的实施及监视。验证小组成员：文件预备和培训检查验证所需的各类文件资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。培训参与验证人员需进展本文件及下述内容的培训：微生物学问、无菌检查及微生物检验操作培训。验证条件及验证时间安排验证条件检验公用系统验证及仪器安装完成；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。供试品 3批 ① ② ③培育基及试剂：0.9%浓度的溶液硫乙醇酸盐流体培育基 批号： 生产厂家：改进马丁培育基 批号： 生产厂家：养分肉汤培育基 批号： 生产厂家：改进马丁琼脂培育基 批号： 生产厂家：〔来源：云南省药品检验所〕金黄色葡萄球菌 【CMCC〔B〕26003】铜绿假单胞菌 【CMCC〔B〕10104】枯草芽孢杆菌 【CMCC〔B〕63501】生孢梭菌 【CMCC〔B〕64941】大肠埃希菌 【CMCC〔B〕44102】白色念珠菌 【CMCC〔F〕98001】无菌检验仪器及相关设备压力蒸汽灭菌器 型 号： 生产厂家：生化培育箱 型 号： 生产厂家：霉菌培育箱 型 号： 生产厂家：超净工作台 型 号： 生产厂家：验证时间验证小组提出完整的验证打算，经批准后实施，整个验证活动按下面时间安排完成。年 月 日至 年 月 日。验证依据：《中国药典》2023年版二部附录XIH无菌检查法方法验证试验。验证过程培育基无菌性检查514天，应无菌生长。试验菌液的制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的颖培育物至10mL养分肉汤培育基中,30～3518～241mL9mL0.910倍递增稀释至(10-5、10-7)1mL100CFU的菌悬液。12mL硫乙醇酸盐流体培育基中,30～3518～24小时，取上述培育物1mL加9mL0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释至(10-7)每1mL含菌数小于100CFU的菌悬液。接种白色念珠菌的颖培育物至10mL23～2824～481mL9mL0.910倍递增稀释至(10-7)1mL含菌数小于100CFU的菌悬液。菌液计数：稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#〔2.〕铜绿假单胞菌稀释倍数稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#培育基灵敏度检查操作12mL9100CFU的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌菌悬液各1mL，每种培育基各接种2支，另139mL32支分100CFU1mL15天，逐日观看结果。空白比照管无菌生长,加菌的培育基管均生长良好,判灵敏度检查合格。培育基硫乙醇酸盐流体培育基〔培育基硫乙醇酸盐流体培育基〔12mL/管〕改进马丁培育基〔9mL/管〕菌液金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌空白白色念珠菌空白1#2#＼＼方法验证试验菌液制备接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的颖培育物至10mL养分肉汤培育基中,30～3518～241mL9mL0.910倍递增稀释至(10-5、10-7)1mL100CFU的菌悬液。12mL硫乙醇酸盐流体培育基中,30～3518～24小时，取上述培育物1mL加9mL0.9%无菌氯化钠溶液10倍递增稀释至(10-7)每1mL含菌数小于100CFU的菌悬液。10mL23～2824～48小时，1mL9mL0.9％的无菌氯化钠溶液10倍递增稀释至(10-7)1mL含菌数小于100CFU的菌悬液。菌液计数：稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#〔2.〕大肠埃希菌稀释倍数稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#稀释倍数菌落数10-1稀释倍数菌落数10-110-210-310-410-510-610-71#2#3#样品处理：取“医用即溶止血纱布”样品12片，按物料进入净化区程序送入无菌室，用酒精擦拭外表后去掉最外层包装。直接接种法：取8支装量为15mL/1mL小于100cfu/mL的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2管，其中一管分别剪取“医用即溶止血纱布”1cm×3cm接入，另一管作比照，30～35℃培育3～5天215mL/1mL100cfu/mL的白色念1cm×3cm接入23～283～5天。逐日观看结果。培育基培育基管〕〔15mL/管〕菌液金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌生孢梭菌白色念珠菌第一天菌液 样品 菌液 样品 菌液 样品 菌液 样品菌液样品其次天第三天第四天第五天评价标准2023年版二部附录XIH无菌检查法规定对验证结果进展推断：与比照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的该检验量在该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以无视不计，照此检查方法和检查条件进展供