水产动物病害预防技术-免疫接种

项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种免疫接种

种类

水产疫苗使用方法操作注意事项

水产疫苗

传统疫苗新型疫苗

传统疫苗

灭活疫苗减毒活疫苗灭活疫苗优点：安全性好、制备容易缺点：免疫效果不理想、免疫力持久性差

减毒活疫苗优点：免疫效果好、免疫力较强且持久缺点：存在病原毒力返强的风险

亚单位疫苗

新型疫苗

DNA疫苗合成肽疫苗亚单位疫苗是将免疫有效成份从病原微生物中分离提取出来制成的疫苗。合成肽疫苗是将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，加入佐剂制成的疫苗。DNA疫苗是将病原微生物中负责转译抗原蛋白的基因片段分离出来，在体外与载体连接形成重组DNA，然后转入宿主细胞，在宿主细胞内表达抗原蛋白，达到免疫效果。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种我国获国家新兽药证书的水产疫苗有4种·草鱼出血病细胞灭活疫苗，（有生产文号）·嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗，（有生产文号）·牙鲆溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗，·草鱼出血病疫苗。疫苗的使用草鱼出血病灭活疫苗制备：毒株是草鱼呼肠孤病毒ZV8909株，经草鱼肾脏细胞系(CIK)传代、扩增后，收获培养物，经甲醛和热灭活后制成。应用：预防草鱼出血病，免疫期12个月。用法与用量体长3cm左右草鱼:尼龙袋充氧浸浴，疫苗浓度为0.5%，并在每升浸浴液中加入10mg莨菪，浸浴3h。体长10cm左右草鱼:肌内或腹腔注射，先将疫苗用生理盐水稀释10倍，每尾鱼0.2-0.5ml。注意事项1、切忌冻结，冻结的疫苗严禁使用。2、使用前，应先使疫苗恢复至室温，并充分摇匀。注意事项3、开瓶后，限12h内用完。4、如注射接种，应对注射草鱼作局部消毒处理。注意事项5、用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应收集，并进行消毒处理。6、对草鱼出血病，本品只能预防，而不能用作治疗。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种草鱼出血病活疫苗制备：本品系草鱼呼肠孤病毒毒株GCHV-882/892(弱毒株)，接种于草鱼吻端成纤维细胞系（PSF）培养扩增后，收获培养物，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥而成。应用：仅预防由草鱼呼肠孤病毒引起的草鱼出血病，不能用作治疗。注射免疫健康草鱼后，第5天开始产生免疫力，15天免疫保护率达90%以上，免疫期为15个月。用法与用量：预处理:本品为淡黄色海绵状疏松团块。根据瓶签注明尾份数和每尾份注射液体量0.2mL，加0.65%灭菌生理盐水将其稀释成均匀一致的悬浊液待用(如瓶签注明1000尾份，则用200ml将疫苗稀释）。接种:肌内或腹腔注射(注射针头沿背鳍基部或腹鳍基部斜注入0.2厘米深)，·体重12-250g的草鱼，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾鱼0.2mL;·体重250-750g的草鱼，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾鱼0.3mL。注意事项1、避免阳光曝晒，以免失效，稀释后的疫苗2h内用完。2、疫苗注射后用含氯消毒剂全池泼洒一次，预防由于操作不慎造成鱼体受伤而导致细菌感染。3、使用后疫苗瓶、器具和未用完的疫苗应集中消毒处理。4、有效期:-10℃以下保存，18个月;4℃，6个月。5、对草鱼出血病，本品只能预防，而不能用作治疗。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗制备：本品系用致病性嗜水气单胞菌J-1株接种于适宜的培养基培养，收获培养物，经甲醛溶液灭活后制成。预防由嗜水气单胞菌引起的淡水鱼细菌性败血症。免疫期为6个月。

用法与用量

高浓度短时间浸浴

·在100kg清洁水中，加入食盐2kg，·加入增效剂1g和疫苗1000mL，混匀后浸浴鱼种5-10min，可连续浸洗5-6批鱼种。

高浓度短时间浸浴法适用于鱼种放养前进行免疫预防

低浓度长时间浸浴法

·在100kg清洁水中，加入食盐1kg，·加入增效剂1g和菌苗200ml，混匀后浸浴鱼种1-3h。

低浓度长时间禁浴法适用于鱼种调运放养途中进行免疫预防

注意事项1、切忌冻结，冻结的疫苗严禁使用。疫苗稀释后，限当日用完。2、使用前，应先使疫苗恢复至室温，并充分摇匀。

注意事项3、接种时，应作局部消毒处理。4、用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应集中进行消毒处理。

注意事项5、疫苗使用时水温最好在10℃以上。6、对淡水鱼细菌性败血症，本品只能预防，而不能用作治疗。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种

牙鲆溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗制备分泌溶藻弧菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1B2株和2F4株分泌鳗弧菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1E10株和1D1株分泌迟缓爱德华菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1E11株

分别接种适宜的培养基培养后，转入生物反应器培养，收获培养物，离心取上清，混合后冻干制成。应用预防牙鲆的溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病。免疫期为5个月。用法与用量注射型疫苗预处理每瓶疫苗用生理盐水稀释到25mL，将25mL的不完全佐剂与25mL疫苗混合搅匀;接种采用1mL注射器。接种体重5-7g、4-5月龄的幼鱼，腹腔注射，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾50μL(含疫苗量为3.75μL)。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种

浸浴型疫苗

预处理用生理盐水将3瓶疫苗溶解混合后，倒入装有90L海水的容器内充分搅匀。

接种体重5-7g、4-5月龄的幼鱼，每1000尾鱼，分2-3批放入预处理的疫苗液中浸浴，每批30min。每尾鱼所获得的疫苗量为11-25μg。

注意事项1、本品只能预防，而不能用作治疗。2、接种、浸浴前应停食至少24h。浸浴时应向浸浴的容器内充气。

注意事项3、注射型疫苗使用时，应将疫苗和等量的不完全佐剂充分混合。浸浴型疫苗倒入海水后也要充分搅拌，使疫苗均匀分布于海水中。

注意事项4、不完全佐剂应在2-8℃储藏。疫苗开封后，应限当日用完。

注意事项5、注射接种时，带上细线布手套抓鱼，轻抓轻放，避免因操作对鱼造成损伤。

注意事项6、接种疫苗时，应使用1mL的一次性注射器。注射中应注意避免针孔堵塞。

注意事项7、浸浴的海水温度在15-20℃。项目三水产动物病害预防技术任务四免疫接种免疫接种

种类

水产疫苗使用方法操作注意事项

水产疫苗

传统疫苗新型疫苗

传统疫苗

灭活疫苗减毒活疫苗灭活疫苗优点：安全性好、制备容易缺点：免疫效果不理想、免疫力持久性差

减毒活疫苗优点：免疫效果好、免疫力较强且持久缺点：存在病原毒力返强的风险

亚单位疫苗

新型疫苗

DNA疫苗合成肽疫苗亚单位疫苗是将免疫有效成份从病原微生物中分离提取出来制成的疫苗。合成肽疫苗是将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，加入佐剂制成的疫苗。DNA疫苗是将病原微生物中负责转译抗原蛋白的基因片段分离出来，在体外与载体连接形成重组DNA，然后转入宿主细胞，在宿主细胞内表达抗原蛋白，达到免疫效果。我国获国家新兽药证书的水产疫苗有4种·草鱼出血病细胞灭活疫苗，（有生产文号）·嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗，（有生产文号）·牙鲆溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗，·草鱼出血病疫苗。疫苗的使用草鱼出血病灭活疫苗制备：毒株是草鱼呼肠孤病毒ZV8909株，经草鱼肾脏细胞系(CIK)传代、扩增后，收获培养物，经甲醛和热灭活后制成。应用：预防草鱼出血病，免疫期12个月。用法与用量体长3cm左右草鱼:尼龙袋充氧浸浴，疫苗浓度为0.5%，并在每升浸浴液中加入10mg莨菪，浸浴3h。体长10cm左右草鱼:肌内或腹腔注射，先将疫苗用生理盐水稀释10倍，每尾鱼0.2-0.5ml。注意事项1、切忌冻结，冻结的疫苗严禁使用。2、使用前，应先使疫苗恢复至室温，并充分摇匀。注意事项3、开瓶后，限12h内用完。4、如注射接种，应对注射草鱼作局部消毒处理。注意事项5、用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应收集，并进行消毒处理。6、对草鱼出血病，本品只能预防，而不能用作治疗。草鱼出血病活疫苗制备：本品系草鱼呼肠孤病毒毒株GCHV-882/892(弱毒株)，接种于草鱼吻端成纤维细胞系（PSF）培养扩增后，收获培养物，加适宜稳定剂，经冷冻真空干燥而成。应用：仅预防由草鱼呼肠孤病毒引起的草鱼出血病，不能用作治疗。注射免疫健康草鱼后，第5天开始产生免疫力，15天免疫保护率达90%以上，免疫期为15个月。用法与用量：预处理:本品为淡黄色海绵状疏松团块。根据瓶签注明尾份数和每尾份注射液体量0.2mL，加0.65%灭菌生理盐水将其稀释成均匀一致的悬浊液待用(如瓶签注明1000尾份，则用200ml将疫苗稀释）。接种:肌内或腹腔注射(注射针头沿背鳍基部或腹鳍基部斜注入0.2厘米深)，·体重12-250g的草鱼，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾鱼0.2mL;·体重250-750g的草鱼，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾鱼0.3mL。注意事项1、避免阳光曝晒，以免失效，稀释后的疫苗2h内用完。2、疫苗注射后用含氯消毒剂全池泼洒一次，预防由于操作不慎造成鱼体受伤而导致细菌感染。3、使用后疫苗瓶、器具和未用完的疫苗应集中消毒处理。4、有效期:-10℃以下保存，18个月;4℃，6个月。5、对草鱼出血病，本品只能预防，而不能用作治疗。嗜水气单胞菌败血症灭活疫苗制备：本品系用致病性嗜水气单胞菌J-1株接种于适宜的培养基培养，收获培养物，经甲醛溶液灭活后制成。预防由嗜水气单胞菌引起的淡水鱼细菌性败血症。免疫期为6个月。

用法与用量

高浓度短时间浸浴

·在100kg清洁水中，加入食盐2kg，·加入增效剂1g和疫苗1000mL，混匀后浸浴鱼种5-10min，可连续浸洗5-6批鱼种。

高浓度短时间浸浴法适用于鱼种放养前进行免疫预防

低浓度长时间浸浴法

·在100kg清洁水中，加入食盐1kg，·加入增效剂1g和菌苗200ml，混匀后浸浴鱼种1-3h。

低浓度长时间禁浴法适用于鱼种调运放养途中进行免疫预防

注意事项1、切忌冻结，冻结的疫苗严禁使用。疫苗稀释后，限当日用完。2、使用前，应先使疫苗恢复至室温，并充分摇匀。

注意事项3、接种时，应作局部消毒处理。4、用过的疫苗瓶、器具和未用完的疫苗等应集中进行消毒处理。

注意事项5、疫苗使用时水温最好在10℃以上。6、对淡水鱼细菌性败血症，本品只能预防，而不能用作治疗。

牙鲆溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病多联抗独特型抗体疫苗制备分泌溶藻弧菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1B2株和2F4株分泌鳗弧菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1E10株和1D1株分泌迟缓爱德华菌抗独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞1E11株

分别接种适宜的培养基培养后，转入生物反应器培养，收获培养物，离心取上清，混合后冻干制成。应用预防牙鲆的溶藻弧菌、鳗弧菌、迟缓爱德华菌病。免疫期为5个月。用法与用量注射型疫苗预处理每瓶疫苗用生理盐水稀释到25mL，将25mL的不完全佐剂与25mL疫苗混合搅匀;接种采用1mL注射器。接种体重5-7g、4-5月龄的幼鱼，腹腔注射，一次量(预处理后的疫苗液)，每尾50μL(含疫苗量为3.75μL)。

浸浴型疫苗

预处理用生理盐水将3瓶疫苗溶解混合后，倒入装有90L海水的容器内充分搅匀。

接种体重5-7g、4-5月龄的幼鱼，每1000尾鱼，分2-3批放入预处理的疫苗液中浸浴，每批30min。每尾鱼所获得的疫苗量为11-25μg。