第四章-微生物营养与培养基

第四章微生物的营养与培养基二O一七年三月食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry微生物的特点：食谱广、胃口大营养物：具有营养功能的物质，对微生物而言，还包括非常规物质形式的光辐射能在内。营养：生物体从外部环境中摄取对其生命活动必需的能量和物质，以满足正常生长和繁殖需要的一种最基本的生理功能。营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry本章内容：（微生物们需要吃什么？）第三节培养基（如何给微生物们做饭）第二节营养物质进入细胞的方式（微生物们是怎样吃东西的）第一节微生物的营养要求食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1微生物的营养要求1.1微生物细胞的化学组成微生物细胞水：70%-90%干物质有机物蛋白质、糖、脂、核酸、维生素等及其降解产物。无机物（盐）微生物、动物、植物之间存在“营养上的统一性”细胞化学元素组成：主要元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁等；微量元素：锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.2营养物质及其生理功能微生物与动植物营养要素的比较食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素（碳骨架）的营养源，称为碳源。

碳源谱

有机碳

无机碳异养微生物

自养微生物

蛋白质、糖类、有机酸类、醇类和脂类等。

CO2、碳酸盐等。1.2.1碳源碳源的功能：构成细胞及代谢产物的骨架；是大多数微生物代谢所需的能量来源。1.2营养物质及其生理功能食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry微生物碳源谱类型化合物水平培养基原料水平复杂蛋白质、核酸牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉有机碳多数氨基酸、简单蛋白质一般氨基酸、明胶糖、有机酸、醇、脂类葡萄糖、蔗糖、淀粉、糖蜜烃类石油、天然气、石蜡油C——无机碳CO2CO2NaHCO3、CaCO3等NaHCO3、CaCO3等1.2.1碳源食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry不同微生物对碳源的要求（1）异养微生物的碳源选择糖类>有机酸>醇类>脂类单糖>双糖>多糖（2）自养微生物的碳源选择:二氧化碳、简单碳酸盐产甲烷菌：仅能利用CO2和少数1C或2C化合物甲烷氧化菌：仅能利用甲烷、甲醇两种碳源（3）假单胞菌：可利用90种以上碳源。1.2.1碳源食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.2.1碳源实验室常用碳源葡萄糖蔗糖乳糖可溶性淀粉工业上常用碳源糖蜜玉米粉马铃薯淀粉食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry凡能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源称为氮源。

1.2.2氮源氮源功能：为微生物提供合成细胞物质代谢产物的原料，氮源一般不做能源，只有硝化细菌利用铵盐，亚硝酸盐作氮源，同时也作能源。分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源。无机态氮：硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用。有机态氮：蛋白质及其降解产物。氮源谱1.2营养物质及其生理功能食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry微生物的氮源谱类型化合物水平培养基原料水平复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕蛹粉等有机氮尿素、一般氨基酸、简单蛋白质等尿素、蛋白胨、明胶等NH3、铵盐等（NH4）2SO4无机氮硝酸盐等KNO3等N2空气1.2.2氮源迟效氮源和速效氮源氨基酸自养型微生物和氨基酸异养型微生物

食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry实验室常用的几种有机氮源：

蛋白胨牛肉浸膏酵母浸膏蛋白胨是蛋白类物质的消化产物，可以用酶法或者酸法水解制备。牛肉浸膏就是牛肉浸液通过离心和过滤除去脂肪和不溶性物质，再经低温浓缩而成。从酵母细胞中获得的一种类似于蛋白胨的物质，它采用自溶、离心或压滤、浓缩等工艺制成。1.2.2氮源食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry能为微生物生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能，称为能源。对于各种异养微生物来说，它们的能源就是其碳源。化能自养微生物的能源十分独特，它们都是一些还原态的无机物质，能利用这些能源的微生物都是一些原核生物，包括亚硝酸细菌、硝酸细菌、硫化细菌、氢细菌和铁细菌等。1.2.3能源于化能自养微生物的存在，使人们扩大了对生物圈的认识，改变了以往认为生物界只是直接或间接利用太阳能的旧观念。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因子。狭义的生长因子：维生素广义的生长因子：维生素、氨基酸、碱基、卟啉及其衍生物等。1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry维生素：

有的微生物自己不能合成维生素，需要外加，主要是B族维生素、硫胺素、叶酸、泛酸、核黄素等，如生产味精需加生物素（是B族中的一种即VH）。碱基：

嘧啶和嘌呤是核酸和辅E的重要组分，是许多微生物必须的生长因素。有些微生物不仅不能合成嘧啶和嘌呤，而且不能将补充的嘧啶和嘌呤结合在核苷酸上，还必须供给核苷酸，有的菌需补充卟啉或其衍生物，还有的菌需供给（低碳）脂肪酸等。1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry氨基酸：各种菌合成AA的能力有很大差别，一般G－菌强于G＋，大肠杆菌自己能合成全部氨基酸，沙门氏菌能合成大部分氨基酸，有的菌合成氨基酸能力极弱，如肠道串珠菌需从外界补充19种氨基酸。有些微生物自己不能合成某种氨基酸，必须给予补充，如赖氨酸发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝氨酸，为环丝氨酸缺陷型菌株，在培养基中必须添加含环丝氨酸的氮源。如豆饼水解液或毛发水解液等。1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry富含生长因子的培养基原料酵母膏玉米浆肝浸液麦芽汁其它动、植物的汁液等1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry生长因子的微生物分析法当微生物丧失合成某种生长因子的能力时，必须从培养基中取得方能生长。利用微生物的这种特性可以分析食物、药品等物质中的维生素、氨基酸及其他生长因素的含量。原理：根据微生物的生长量与它所必需的生长因子的浓度在一定的范围内成正比关系。1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry按微生物对生长因子的需要与否，可以将它们分成3种类型：生长因子自养型微生物它们不需要从外界吸收任何生长因子，多数真菌、放线菌和不少细菌都属于这类。生长因子异养型微生物它们需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长，如各种乳酸菌、动物致病菌、支原体和原生动物。生长因子过量合成的微生物少数微生物在其代谢活动中，能合成并大量分泌某些维生素等生长因子，因此可作为有关维生素的生产菌种。1.2.4生长因子食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry构成微生物细胞以C、H、O、N、P、S六种元素为主，约占细胞干重的95％以上；凡生长所需浓度在10-3～10-4mol/L范围内的元素，可称为大量元素，如P、S、K、Mg、Na和Fe等。以无机盐阳离子形式被吸收，配培养基进要加磷酸盐、硫酸盐；凡所需浓度在10-6～10-8mol/L范围内的元素，可称为微量元素，如Cu、Zn、Mn、Co等，这些微量元素，在微生物培养中有0.1PPM就可以了，配置时不需另加。1.2.5无机盐食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry由于水在微生物代谢活动中的不可缺少性，所以仍把它作为营养要素来考虑。（1）水是地球上整个生命系统存在和发展的必要条件。（2）水在生物体内的功能稳定生物大分子的构象，使之表现出特异的生物活性；作为体内通用的介质，使各类生物化学反应得以顺利进行；用作营养物质或代谢废物的载体，把它们输送到生物体的各有关部位；由于水的热容量大，故可用来调节温度、平衡温度；对体内各运动部位起润滑作用。1.2.6水食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.3微生物的营养类型异养型生物自养型生物生长所需要的营养物质生物生长过程中能量的来源光能营养型化能营养型光能自养型：以光为能源，不依赖任何有机物即可正常生长光能异养型：以光为能源，但生长需要一定的有机营养化能自养型：以无机物的氧化获得能量，生长不依赖有机营养物化能异养型：以有机物的氧化获得能量，生长依赖于有机营养物质食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry微生物营养类型(Ⅰ)1.3微生物的营养类型食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry微生物的营养类型(Ⅱ)1.3微生物的营养类型食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.3.1光能无机营养型（光能自养型）能以CO2为主要唯一或主要碳源；进行光合作用获取生长所需要的能量；以无机物如H2、H2S、S等作为供氢体或电子供体，使CO2还原为细胞物质；例如，藻类及蓝细菌等和植物一样，以水为电子供体（供氢体），进行产氧型的光合作用，合成细胞物质。而红硫细菌，以H2S为电子供体，产生细胞物质，并伴随硫元素的产生。CO2+2H2S光能光合色素[

CH2O]+2S+H2O食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.3.2光能有机营养型（光能异养型）不能以CO2为主要或唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原为细胞物质；在生长时大多数需要外源的生长因子；例如，红螺菌属中的一些细菌能利用异丙醇作为供氢体，将CO2还原成细胞物质，同时积累丙酮。CHOH+CO2H3CH3C2光能光合色素2CH3C0CH3+[CH2O]+H2O食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.3.3化能无机营养型（化能自养型）生长所需要的能量来自无机物氧化过程中放出的化学能；以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源进行生长时，利用H2、H2S、Fe2+、NH3或NO2-等作为电子供体使CO2还原成细胞物质。化能无机自养型只存在于微生物中，可在完全无机及无光的环境中生长。它们广泛分布于土壤及水环境中,参与地球物质循环；食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1.3.4化能有机营养型（化能异养型）生长所需要的能量均来自有机物氧化过程中放出的化学能；生长所需要的碳源主要是一些有机化合物，如淀粉、糖类、纤维素、有机酸等。有机物通常既是碳源也是能源；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；所有致病微生物均为化能有机异养型微生物；食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry腐生型(metatrophy)：可利用无生命的有机物(如动植物尸体和残体)作为碳源；寄生型(paratrophy)：寄生在活的寄主机体内吸取营养物质,离开寄主就不能生存；在腐生型和寄生型之间还存在中间类型：兼性腐生型(facultivemetatrophy)；兼性寄生型(facultiveparatrophy)；1.3.4化能有机营养型（化能异养型）食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry不同营养类型之间的界限并非绝对：异养型微生物并非绝对不能利用CO2；自养型微生物也并非不能利用有机物进行生长；有些微生物在不同生长条件下生长时,其营养类型也会发生改变；例如紫色非硫细菌(purplenonsulphurbacteria)：没有有机物时，同化CO2，

为自养型微生物；有机物存在时，利用有机物进行生长，为异养型微生物；光照和厌氧条件下，利用光能生长，为光能营养型微生物；黑暗与好氧条件下，依靠有机物氧化产生的化学能生长，为化能营养型；微生物营养类型的可变性无疑有利于提高其对环境条件变化的适应能力1.3微生物的营养类型食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry某些菌株发生突变(自然突变或人工诱变)后，失去合成某种或某些对该菌株生长必不可少的物质(通常是生长因子如氨基酸、维生素)的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株称为营养缺陷型(auxotroph)，相应的野生型菌株称为原养型(prototroph)。营养缺陷型菌株经常用来进行微生物遗传学方面的研究。微生物生长需要的生长因子与营养缺陷型之间的关系？1.3.5营养缺陷型食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2营养物质进入细胞的方式一、单纯扩散(diffusion)二、促进扩散(facilitateddiffusion)三、主动运输(activetransport)四、基团移位(grouptranslocation)食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.1单纯扩散(diffusion)2营养物质进入细胞的方式食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry特点：物质进入细胞的动力是细胞内外的浓度差；这种运输方式不消耗能量；没有特异性，被运输物质不与膜上物质发生任何反应，物质不发生化学变化。2.1单纯扩散食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry物质跨膜扩散的能力和速率与该物质的性质有关,分子量小、脂溶性、极性小的物质易通过扩散进出细胞。扩散并不是微生物细胞吸收营养物质的主要方式,水是唯一可以通过扩散自由通过原生质膜的分子,脂肪酸、乙醇、甘油、苯、一些气体分子(O2、CO2)及某些氨基酸在一定程度上也可通过扩散进出细胞。2.1单纯扩散食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.2促进扩散(facilitateddiffusion)被动的物质跨膜运输方式；物质运输过程中不消耗能量；参与运输的物质本身的分子结构不发生变化；不能进行逆浓度运输；运输速率与膜内外物质的浓度差成正比。通过促进扩散进行跨膜运输的物质需要借助与载体(carrier)的作用才能进入细胞，而且每种载体只运输相应的物质，具有较高的专一性。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry载体只影响物质的运输速率，并不改变该物质在膜内外形成的动态平衡状态；这种性质都类似于酶的作用特征，因此载体蛋白也称为透过酶；透过酶大都是诱导酶,只有在环境中存在机体生长所需的营养物质时，相应的透过酶才合成。2.2促进扩散食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.3主动运输(activetransport)在物质运输过程中需要消耗能量可以进行逆浓度运输。运输物质所需能量来源：好氧型微生物与兼性厌氧微生物直接利用呼吸能；厌氧型微生物利用化学能(ATP)；光合微生物利用光能；嗜盐细菌通过紫膜(purplemembrane)利用光能。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。2.3主动运输食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.3.1初级主动运输(primaryactivetransport)2.3主动运输食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.3.1初级主动运输食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.3.2次级主动运输(secondaryactivetransport)同向运输(symport)逆向运输(antiport)单向运输(uniport)为什么被称为：次级主动运输？食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.3.3Na+,K+-ATP酶(Na+,K+-ATPase)系统食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.4基团移位(grouptranslocation)基团转位主要存在于厌氧型和兼性厌氧型细菌中，主要用于糖的运输。脂肪酸、核苷、碱基等也可通过这种方式运输。有一个复杂的运输系统来完成物质的运输；物质在运输过程中发生化学变化；食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.4基团移位食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2.5膜泡运输(memberanevesicletransport)膜泡运输主要存在于原生动物中，特别是变形虫(amoeba)，为这类微生物的一种营养物质的运输方式)。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3培养基培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础培养基（medium）是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理常规高压蒸汽灭菌：某些成分进行分别灭菌；过滤除菌；食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3.1选用和设计培养基的原则和方法在微生物学研究和生长实践中，配置合适的培养基是一项最基本的要求。1、选择适宜的营养物质2、营养物的浓度及配比合适3、物理、化学条件适宜4、经济节约5、精心设计、试验比较3培养基食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；实验室的常用培养基：细菌：牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）；放线菌：高氏1号合成培养基培养；酵母菌：麦芽汁培养基；霉菌：查氏合成培养基；实验室一般培养：普通常用培养基；遗传研究：成分清楚的合成培养基；生理、代谢研究：选用相应的培养基配方；例如枯草芽孢杆菌：一般培养：肉汤培养基或LB培养基；自然转化：基础培养基；观察芽孢：生孢子培养基；产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基；3.1.1选择适宜的营养物质食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry营养物质的浓度适宜；营养物质之间的配比适宜；高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀菌作用。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累，其中碳氮比(C/N)的影响较大。发酵生产谷氨酸时：碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。3.1.2营养物质浓度及配比合适食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustrypH；水活度；氧化还原电位；渗透压；3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry1、pH培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。通常培养条件：细菌与放线菌：pH7~7.5酵母菌和霉菌：pH4.5~6范围内生长3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustrypH对微生物生长的影响：

pH对酶的影响；pH对营养物质吸收的影响。pH的调节：内源调节：磷酸缓冲液；以CaCO3作为“备用碱”；蛋白质、肽类、氨基酸等天然缓冲系统。外源调节：进行工业发酵时补加酸、碱。3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2、水活度定义：在天然环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量，一般用在一定的温度和压力条件下,溶液的蒸汽压力与同样条件下纯水蒸汽压力之比表示，即：αw=Pw/Pow

式中Pw代表溶液蒸汽压力,Pow代表纯水蒸汽压力。纯水αw为1.00,溶液中溶质越多,αw越小。微生物一般在αw为0.60～0.99的条件下生长,αw过低时,微生物生长的迟缓期延长,比生长速率和总生长量减少。微生物不同，其生长的最适αw不同。3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry2、水活度3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3、氧化还原电位氧化还原电位又称氧化还原电势（redoxpotential），是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标，其单位是V（伏）或mV（毫伏）。就象微生物与pH的关系一样，不同类型微生物生长对氧化还原电位(Ф)的要求不同。好氧性微生物：+0.1伏以上时可正常生长,以+0.3～+0.4伏为宜；厌氧性微生物：低于+0.1伏条件下生长；兼性厌氧微生物：+0.1伏以上时进行好氧呼吸,+0.1伏以下时进行发酵。3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3、氧化还原电位氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压，或加入氧化剂，从而增加Ф值；在培养基中加入抗坏血酸（0.1%）、硫化氢(0.025%)、半胱氨酸(<0.05%)、谷胱甘肽、二硫苏糖醇、庖肉等还原性物质可降低Ф值。培养基中加入氧化还原指示剂刃天青可对氧化还原电位进行间接测定3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3、氧化还原电位氧化还原电位与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响3.1.3物理化学条件适宜食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份,特别是在发酵工业中,以降低生产成本。以粗代精以“野”代“家”以废代好以简代繁以烃代粮以纤代糖以无机氮代蛋白对微生物来说，各种粗原料营养更加完全，效果更好。而且在经济上也节约。以野生植物原料代替栽培植物原料，如木薯、橡子、薯芋等都是富含淀粉质的野生植物，可以部分取代粮食用于工业发酵的碳源。以工农业生产中易污染环境的废弃物作为培养微生物的原料。例如，糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液)、豆制品工业废液及黑废液(造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等都可作为培养基的原料。工业上的甲烷发酵主要利用废水、废渣作原料,在我国农村，已推广利用粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。另外,大量的农副产品或制品，如麸皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用的发酵工业原料。某制药厂改进链霉素发酵液中的原有配方，设法减去30-50%的黄豆饼粉、25%的葡萄糖和20%硫酸铵，结果反而提高了产量。以石油或天然气副产品代替糖质原料来培养微生物。生产石油蛋白将石油产品转化成一些产值更高的高级醇、脂肪酸、环烷酸等化工产品和若干合成物；对石油产品的品质进行改良，如脱硫、脱蜡等。开发利用纤维素这种世界上含量最丰富的可再生资源。将大量的纤维素农副产品转变为优质饲料、工业发酵原料、燃料及人类的食品及饮料。以大气氮、铵盐、硝酸盐或尿素等一类非蛋白质或非氨基酸廉价原料用作发酵培养基的原料，让微生物转化成菌体蛋白质或含氮的发酵产物供人们利用。3.1.4经济节约食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3.1.5精心设计、试验比较进行生态模拟，研究某种微生物的培养条件；文献查阅，设计特定微生物的培养基配方；试验比较，确定特定微生物的最佳培养条件；食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3.2培养基的类型及应用3.2.1按成份不同划分天然培养基以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成如：牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基。食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry合成培养基如：高氏I号培养基、察氏培养基。是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemicallydefinedmedium)特点是重复性好，但成本高，微生物在其中生长较慢。3.2.1按成份不同划分食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry半合成培养基指一类主要以化学试剂配制、同时还加有某种天然成分的培养基。多数培养基是以天然的有机物作为碳、氮及生长素的来源，并适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使更能充分满足微生物对营养的需要。如：马铃薯蔗糖培养基3.2.1按成份不同划分食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry3.2.2根据物理状态划分固体培养基在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态即为固体培养基。对凝固剂的要求：常用的凝固剂：琼脂和明胶。其他固体培养基：马铃薯块、胡萝卜条、小米、麸皮及米糠等制成固体状态的培养基，酒曲和棉子壳培养基等。3.2培养基的类型及应用食品与轻工学院CollegeofFoodandLightIndustry半固体培养基半固体培养基中凝固剂的含量比固体培养基少，培养基中琼脂含量一般为0．2％～0．7％。半固体培养基常用来观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定等。液体培养基液体培养基中未加任何凝固剂。在用液体培养基培养微生物时，通过振