布洛芬注射液抗炎镇痛和热安全性评价

布洛芬注射液抗炎镇痛和热安全性评价

布洛芬是一种常用的丙酸钠抗炎剂。由于其低耐酸性，因此很难制备有效的制剂。以精氨酸助溶后,布洛芬可溶于水,水溶液近中性,减轻了布洛芬的不良反应。目前武汉市普爱医院临床药学研究所已将其制成注射剂,规格为2mL∶0.2g,并进行了制剂质量标准以及稳定性相关研究,现对其镇痛、抗炎及解热作用进行考察。1细菌内毒素试剂布洛芬注射液(批号20071020,武汉市普爱医院自制);安乃近注射液(批号0805112,天津药业集团新郑股份有限公司);吡罗昔康注射液(批号08012205,无锡华裕制药有限公司);细菌内毒素工作标准品(批号2007-5,中国药品生物制品检定所);其余试剂均为市售分析纯;昆明种小鼠,雌雄由具体试验决定;家兔,♀♂各半。均由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供,许可证号:SCXK(鄂)2007-0006。2方法2.1单次给药后小鼠正常痛行为测定总用量10.取体质量(20±2)g昆明种雌性小鼠50只,随机分成5组,每组10只,分为模型组(0.9%氯化钠注射液组);精氨酸助溶剂组;低剂量组(低剂量布洛芬注射液组,12.5mg·kg-1);高剂量组(高剂量布洛芬注射液组,25mg·kg-1);阳性对照组(安乃近注射液组,25mg·kg-1)。恒温水浴热板调至(55±0.5)℃,将小鼠放置在热板上,以小鼠舔后足为痛反应指标,测试各小鼠正常痛阈值,小于5s或大于30s或跳跃的均予以剔除。间隔5min测1次,连续2次,求平均值。各组小鼠按以上剂量尾静脉给药,注射给药量均为0.2mL·(10g)-1,于给药后0.5,1,2,3,4h再测痛阈值。超过60s者以60s计算。2.2小鼠体内二甲苯用量取体质量(22±2)g雄性小鼠50只,随机分成5组,每组10只。分为模型组(0.9%氯化钠注射液组);精氨酸助溶剂组;低剂量组(低剂量布洛芬注射液组,25mg·kg-1);高剂量组(高剂量布洛芬注射液组,50mg·kg-1);阳性对照组(吡罗昔康注射液组,50mg·kg-1)。各组小鼠于右耳前后涂以二甲苯0.02mL/只,以左耳作对照。0.5h后,按以上给药剂量尾静脉注射给药,注射给药量均为0.2mL·(10g)-1,1h后颈椎脱臼处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,以直径8mm打孔器于两耳相同部位冲出耳片,电子天平称量,以两耳质量差为肿胀度,并计算抑制率,抑制率(%)=(模型组肿胀度-药物组肿胀度)/模型组肿胀度×100%。2.3家兔体内内毒素降压药的筛选家兔,体质量(2±0.2)kg,测量正常肛温2次,温度波动<0.5℃。将细菌内毒素用0.9%氯化钠注射液进行稀释,按10EU·kg-1耳缘静脉注射给予内毒素溶液1h后,选体温升高1℃以上的家兔40只随机分成5组,每组8只,♀♂各半。分为模型组(0.9%氯化钠注射液组);精氨酸助溶剂组;低剂量组(低剂量布洛芬注射液组,12.5mg·kg-1);高剂量剂组(高剂量布洛芬注射液组,25mg·kg-1);阳性对照组(安乃近注射液组,25mg·kg-1),均为兔耳缘静脉给药,给药量均为1.5mL·kg-1。观察各组动物4h内的体温变化,与正常体温值之差的变化,评价其解热作用。2.4数据统计分析所有数据采用SPSS11.5统计软件进行分析。各组数据均用ˉx±s表示,多组间均数进行单因素(OnewayANOVA)方差分析,P<0.05表示差异有显著性。3结果3.1单次给药后配方与模型组比较,高低剂量组的布洛芬注射液对热刺激所致小鼠脚掌疼痛均有明显的抑制作用(P<0.01)。给药后0.5～3h,等剂量布洛芬注射液的镇痛作用明显强于安乃近注射液组(P<0.01)。精氨酸助溶剂组无明显抑制作用(P>0.05)。数据见表1。3.2抗炎及抑制率测定与模型组比较,静脉注射高低剂量的布洛芬注射液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有抑制作用(低剂量组P<0.05;高剂量组P<0.01),且低、高剂量的布洛芬注射液之间抗炎作用有差异(P<0.05),抑制率分别为23.3%和46.6%,呈一定程度的剂量依赖性。吡罗昔康注射液与等剂量布洛芬注射液抗炎作用差异无显著性(P>0.05),抑制率为56%。助溶剂组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀无明显抑制作用(P>0.05)。结果见表2。3.3布洛芬注射液各组动物给予内毒素1h后,体温均明显升高。给药1,2,3,4h后,布洛芬注射液高低剂量组与模型组及助溶剂组比较,均能使家兔体温明显降低(P<0.01)。布洛芬注射液在给药2h后低、高剂量组之间比较有差异(P<0.05);等剂量布洛芬注射液和安乃近注射液比较降温作用差异无显著性(P>0.05)。助溶剂组与模型组比较无差别(P>0.05)。结果见表3。4布洛芬注射液布洛芬是20世纪60年代上市的现今临床使用最普遍的非甾体抗炎药之一,国内外药典均有收载,并作为第一个获得批准进入OTC市场的NSAIDs药品。笔者对以精氨酸助溶的布洛芬注射液进行了镇痛试验。结果显示不同浓度的布洛芬注射液均具有镇痛作用,布洛芬的止痛作用可能主要是由于S(+)异构体抑制了背角和脊髓丘脑中心的COX-2,并抑制了一氧化氮合酶。通过对血清素激活通路和肾上腺素通路的刺激作用,在背角水平调节疼痛反应。同时本试验结果也表明在相同剂量下,给药后0.5～3h内,布洛芬注射液较安乃近注射液有更强的镇痛作用。有报道双重COX-1/COX-2抑制剂在治疗急性疼痛方面具有起效快和作用强的优势,布洛芬也被证实应用于急性疼痛的治疗效果确切。布洛芬在高剂量时,其主要的作用是抑制COX-2并在一定程度上抑制COX-1,表现为使前炎症细胞因子产物、氧自由基、一氧化氮、过氧亚硝基阴离子及白细胞粘附分子表达降低。而本实验结果也表明,布洛芬注射液有较明显的抗炎作用。对以精氨酸助溶的布洛芬注射液的解热试验结果显示,12.5和25mg·kg-1的布洛芬注射液表现出明显的解热作用,且给药后2h表现出剂量相关性。有报道口服小剂量布洛芬(5mg·kg-1)用于退热也可取得满意疗效,且较对乙酰氨基酚效果更好。本试验中,安乃近组表现出强退热作用(本实验中安乃近组有一例动物出现给药后4h体温降至正常体温以下),说明安乃近解热作用显著,但因其