典型药物质量检查-水杨酸类药物的质量检测(药品质量检测技术课件)

讲授内容任务一：水杨酸类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01阿司匹林杂质检查（1）杂质来源阿司匹林杂质检查（2）《中国药典》（2010版）规定对阿司匹林杂质检查项目为：未完全反应的原料、中间体及副产物；贮藏过程中可能水解产生的水杨酸；溶液的澄清度游离水杨酸易炭化物①溶液的澄清度检查原理：检查碳酸钠试液中不溶物。阿司匹林可溶于碳酸钠试液，而未反应完全的酚类，或水杨酸精制时温度过高脱羧生成的苯酚，及副反应生成的醋酸苯酯和乙酰水杨酸等杂质均不溶于碳酸钠溶液。方法：取本品0.50g，加温热至约45℃碳酸钠试液溶解后，溶液应澄清。阿司匹林杂质检查②游离水杨酸阿司匹林生产中乙酰化不完全或贮藏中水解均产生水杨酸，对人体有毒，且易被空气氧化成一系列红棕色甚至深棕色醌型有机化合物，使阿司匹林变色。色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）；检测波长：303nm；理论板数按水杨酸峰计算不低5000，阿司匹林主峰与水杨酸主峰分离度应符合要求。游离水杨酸照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定。阿司匹林杂质检查

供试品溶液的制备：取本品约100mg，精密称定，置10mL

量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。(临用前新配）

对照品溶液的制备：取水杨酸对照品约10mg，精密称定，置100mL

量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取5mL，置50mL

量瓶中，用1%

冰醋酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：立即精密量取供试品溶液、对照品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如显水杨酸色谱峰，按外标法以峰面积计算供试品中水杨酸含量，含水杨酸不得超过0.1%。阿司匹林杂质检查③易炭化物方法：取本品0.5g，依法检查（附录ⅧO），与对照液比较，不得更深。对照液：取比色用氯化钴液0.25mL、比色用重铬酸钾0.25mL、比色用硫酸铜0.40mL，加水使成5mL。阿司匹林杂质检查讲授内容任务一：水杨酸类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01含量测定1.酸碱滴定法含量测定2.高效液相色谱法阿司匹林分子中有游离羧基，其电离常数为3.27×10-4，可用标准碱溶液直接滴定。含量测定（1）《中国药典》（2010版）收载的阿司匹林的含量测定方法：

取供试品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL溶解后，再加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠定液（0.1mol/L）滴定。每1mL氢氧化钠液相当于18.02mg的C9H8O4。1.酸碱滴定法①阿司匹林分子含有酯的结构，为使其易溶解及防止酯在滴定时水解而使结果偏高，故在中性乙醇溶液中滴定；含量测定（2）讨论

②滴定时应不断振摇，稍快进行，防止局部碱度过大而促使其水解；③测定温度在0~40℃范围，对结果无影响；④操作简单，但当所含水杨酸超过规定限度时，不宜用本法。除对阿司匹林仍采用直接滴定法外，阿司匹林各种制剂、对氨基水杨酸钠及其制剂、贝诺酯及其制剂均采用高效液相色谱法测定含量。含量测定2.高效液相色谱法《中国药典》（2010版）药物含量的测定中，广泛应用高效液相色谱法。含量测定照高效液相色谱法[《中国药典》（2010版）附录ⅤD]测定。色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）；检测波长：276nm；理论板数按阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰与水杨酸峰分离度应符合要求。

（1）阿司匹林片含量测定测定法：取本品20片，精密称定，充分研细，精密称取细粉适量（约相当于阿司匹林10mg），置于100mL量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液强烈振摇使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用有机相滤膜（孔径：0.45μm）滤过，精密量取续滤液10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图；四、含量测定另取阿司匹林对照品约20mg，精密称定，置200mL量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液强烈振摇使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇稀释到刻度，摇匀，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。含量测定（2）对氨基水杨酸钠含量测定照高效液相色谱法[《中国药典》（2010版）附录ⅤD]测定。色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：0.05mol/L磷酸氢二钠-0.05mol/L磷酸二氢钠-甲醇-10%四丁基氢氧化铵溶液（400:400:200:19）；检测波长：265nm；理论板数按对氨基水杨酸钠峰计算不低于3000，对氨基水杨酸钠与相邻杂质峰分离度应符合要求。测定法：取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1mL中含0.07mg的溶液，摇匀，精密量取20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图；含量测定按外标法以峰面积计算，即得。另取对氨基水杨酸钠对照品适量，同法测定。（3）贝诺酯含量测定四、含量测定照高效液相色谱法[《中国药典》（2010版）附录ⅤD]测定。色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇-水（用磷酸调pH为3.5）（56:44）；检测波长：240nm；理论板数按贝诺酯峰计算不低于3000，贝诺酯峰与相邻杂质峰分离度大于1.5。含量测定测定法：取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.4mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液，精密量取10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，即得。另取贝诺酯对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.4mg的溶液，同法测定。讲授内容任务一：水杨酸类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01鉴别试验1、与三氯化铁反应鉴别试验2、水解产物反应3、芳香第一胺类的鉴别反应4、光谱法5、色谱法水杨酸类药物在中性或弱酸性条件下，与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配合物。反应适宜的pH为4~6，在强酸性溶液中配位化合物分解。1、与三氯化铁反应鉴别试验本反应极为灵敏，只需取稀溶液进行试验；若取样量大产生颜色过深时，可加水稀释后观察。测定方法：鉴别试验2、水解产物反应鉴别试验反应基团：芳伯氨基或水解后产生芳伯氨基的基团，也称重氮化-偶合反应。3、芳香第一胺类的鉴别反应鉴别试验在酸性溶液中，与亚硝酸钠试液发生重氮化反应生成重氮盐，再与碱性β-萘酚试液偶合生成橙红色沉淀。鉴别试验对氨基水杨酸钠具有芳伯氨基，贝诺酯具有潜在芳伯氨基，可用此反应进行鉴别。特征结构：共轭双键、苯环或芳杂环，在紫外-可见光区有特征吸收，可用于定性鉴别。4、光谱法鉴别试验（1）紫外-可见分光光度法如贝诺酯的无水乙醇溶液在240nm的波长处有最大吸收，《中国药典》（2010版）采用紫外-可见分光光度法的吸收系数法进行鉴别。优点：特征性强、专属性好；绝大多数药物的原料药用此法鉴别，制剂由于辅料的干扰，一般不采用。鉴别试验（2）红外分光光度法《中国药典》（2010版）采用该法鉴别水杨酸、水杨酸镁、阿司匹林、对氨基水杨酸钠、贝诺酯等原料药。《中国药典》（2010版）采用高效液相色谱法鉴别阿司匹林肠溶胶囊、泡腾片；5、色谱法鉴别试验要求：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。讲授内容任务一：水杨酸类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01水杨酸类药物的性状及结构特点典型药物的结构、性质及其应用《中国药典》（2010版）收载的水杨酸类药物有水杨酸、对氨基水杨酸钠、阿司匹林、二氟尼柳、贝诺酯、双水杨酯等。水杨酸类药物的性状及结构特点2、典型药物的性状除对氨基水杨酸钠易溶于水外，阿司匹林和贝诺酯在水中分别为微溶与不溶；在乙醇、乙醚和三氯甲烷等有机溶剂中有不同程度的溶解度。溶解度常作为质量检测中制备供试品溶液时溶解介质选择的依据。水杨酸类药物的性状及结构特点讲授内容任务一：水杨酸类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01水杨酸类药物的主要性质药物名称：阿司匹林✎解热镇痛非甾体抗炎药✎结构特点□羧基：具酸性□酯键：易水解COOHOCOCH3水杨酸类药物的质量检测水杨酸类药物的主要性质1、水杨酸类药物的主要性质水杨酸类药物分子中具有苯环和特征官能团（羧基、氨基、酯键等）。（1）酸性（2）酚羟基的要质（3）水解性（4）芳伯氨基的性质（5）紫外及红外吸收的性质主要性质如下：本类药物的基本结构——邻羟基苯甲酸。水杨酸类药物的主要性质（1）酸性由于羧基邻位的羟基取代，能与羧基形成分子内氢键，增强了羧基中氧氢键的极性，使其酸性增强。因此水杨酸的酸性比苯甲酸更强。当邻位羟基被酰化后酸性下降，如阿司匹林（乙酰水杨酸）的酸性较水杨酸弱，但仍较苯甲酸的酸性强。由于邻位的羟基取代，本类药物在弱酸性溶液中可与三价铁离子生成紫色配位化合物；可作为本类药物的特征鉴别反应；也可用于水杨酸酯类药物中游离水杨酸的检查。水杨酸类药物的主要性质（2）酚羟基的要质（3）水解性水杨酸酯类结构易于水解生成游离水杨酸，游离水杨酸类受热易脱羧降解成酚类，在生产和贮藏过程中均易引入各种降解产物。本类药物及其制剂应检查游离水杨