逆转录病毒解析

retroviridae逆转录病毒

Retrovirus

逆转录病毒科是一大组含有逆转录酶的RNA病毒。按其致病作用可分为3个亚科:RNA肿瘤病毒亚科(Oncovirinae)慢病毒亚科(Lentivirinae)泡沫病毒亚科(Spumavirinae)

逆转录病毒的特性:具有包膜，球形，80~120nm，基因组为单正链RNA二聚体病毒核心中有RNA依赖的DNA多聚酶复制通过DNA中间体能整合于宿主细胞的染色体Humanimmunodeficiencyvirus， HIV

人类免疫缺陷病毒

1981年美国疾病控制中心科学家发现获得性免疫缺陷综合征。

1983年法国巴斯德研究所Montagnier等首次从一例慢性淋巴腺病的男性同性恋病人血液中分离到的一株新逆转录病毒，称为淋巴腺病相关病毒(LAV)。

1984年，美国Gallo等亦从艾滋病患者中分离到相似的逆转录病毒，称之为人类嗜T淋巴细胞病毒Ⅲ型(HTLV-Ⅲ)。

1986年，国际病毒分类委员会将LAV、HTLV-Ⅲ统一命名为人类免疫缺陷病毒全世界共有超过3600万人感染了HIV病毒，大约有2530万的案例在中北非。另外，2000年出现了530万新的HIV感染者，大约每天为16000个案例。根据世界卫生组织的统计，存在大量的HIV/AIDS人群的地域包括：

*中北非――约2530万人

*南和西南非洲――约580万人

*拉丁美洲――约140万人

*北美――约92万人

*东欧和中亚――约70万人

我国第一例艾滋病发现与1985年，目前保守估计艾滋病感染者60万，每年以30%的速度递增，2010年将达到1000万。

1985年至1988年为传入期

1989年至1995年为增长期

1996年至今为扩散期

HlV主要有两型:HIV-I、HIV-2

两型病毒的核苷酸序列相差超过40%。世界上的艾滋病大多由HIV-l所致；HIV-2只在西非地区性流行。一、生物学性状

形态结构球形，直径约100~120nm。圆锥状核心中两条相同的正链RNA形成二聚体，并含有多种酶类（逆转录酶、整合酶和蛋白酶）。衣壳呈二十面体立体对称。外壳为脂蛋白包膜，嵌有gp120和gp41两种病毒特异性的糖蛋白。HIV-TheVirus

GAGgeneGroup-SpecificAntigens

p17:innersurface-myristoylated

p24:nucleocapsid

p7:nucleocapsidassociatedwithRNAHIV-TheVirus基因组的结构与功能:调节基因：tat、rev、nef

、vpr、vpu

、vif结构基因：gag、pol、envGenomicstructureofHIV-1TATRNAPolIIU3RU5WhenTATAllproteins(ENV,POL,GAG,TAT,REVetc)TARU3RU5TAT病毒的复制：RNARNA/DNA(-)DNAdsDNA前病毒RNA子代RNAmRNA结构蛋白调节蛋白子代病毒逆转录酶RNA酶H整合HIV-LifeHistoryEntryintothecellT4(CD4+)cellsaremajortargetHumanHeLaCellHumanHeLaCelltransfectedwithCD4antigenNOTINFECTEDINFECTEDCD4antigenCo-receptorCD4+cellHIVgp120bindstoCD4/co-receptorHIV-LifeHistoryCD4CD4CD4HIVCCR5CCR5chemokineMutantCCR5macrophage病毒的变异：在基因组内的分布是不均匀的，较多集中于包膜糖蛋白env基因和nef调节基因.根据env基因序列的异同可将目前全球流行的HIV-l分为A、B、C、D、E、F、H和O8个亚型。培养特性在体外，HIV只感染CD4+细胞和巨噬细胞新鲜分离的正常人T细胞病人自身分离的T细胞培养某些T细胞株感染后细胞出现不同程度的病变，培养液中可测到逆转录酶活性，而培养细胞中可查到病毒的抗原。动物接种：恒河猴、黑猩猩抵抗力HIV对理化因素的抵抗力较弱。56℃加热30min可被灭活。但病毒在室温下可保存活力达7天。0.2%次氯酸钠、0.1%漂白粉、70%乙醇、50%乙醚、0.3%H2O2，以或0.5%来苏处理5min，对病毒均有灭活作用。二、致病性与免疫性传染源:

HIV无症状携带者和艾滋病患者。从其血、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液、脑脊髓液、骨髓、皮肤及中枢神经组织等标本中，均可分离到病毒。传播途径主要传播方式有三种:通过同性或异性间的性行为；输入带HIV的血液或血制品、器官或骨髓移植、人工授精、静脉药臆者共用污染的注射器及针头母婴传播，包括经胎盘、产道或经哺乳等方式引起的传播.临床表现

分为4期：急性期、潜伏期、AIDS相关综合征期及典型AlDS。急性HIV感染期HIV初次进入机体开始大量复制和扩散，约2~3个月时出现病毒血症。表现类似于急性单核细胞增多症或流感，表现为突发的非特异性病毒感染症状：发热、皮疹、淋巴结肿大、关节痛、肌肉痛、斑丘疹、腹痛、腹泻。症状持续２～３周，自行缓解。大多数病毒以前病毒形式整合于宿主细胞染色体上长期潜伏下来。潜伏期(无症状期)持续6个月至１０年或更长。当机体受到各种因素的影响，使潜伏的病毒被激活再次大量增殖引起免疫损伤时才出现临床症状，进入AIDS相关综合征期。血清中HIV抗原消失或处于极低水平，抗HIV阳性。此期不是静止期，更不是安全期，病毒持续增殖，免疫系统渐进性衰退。AlDS相关综合征期已具备AIDS基本特征：细胞免疫缺陷，但症状较轻。表现为：⑴持续性全身淋巴结肿大；⑵全身症状：发热盗汗、全身倦怠、1/3患者体重减轻10℅以上、周期性低热、皮疹及慢性腹泻等胃肠道症状；⑶各种感染：特殊性或复发性的非致命感染。典型AlDS期严重细胞免疫缺陷：CD4+TH<200/μL；各种致死性机会感染：卡氏肺囊虫肺炎、白色念珠菌感染、巨细胞病毒感染等；恶性肿瘤：kaposi肉瘤、淋巴瘤。

AIDS5年死亡率约为90%，死亡多发生在临床症状出现后的2年内。KaposisarcomaofheelHIVandAIDSViralloadpredictssurvivaltimeHIV所致的免疫损害：侵犯CD4＋T细胞，引起以CD4＋细胞缺损和功能障碍为中心的严重免疫缺陷。CD4+细胞减少，CD4+/CD8+比例倒置。

HIV损伤CD4细胞的机制:病毒增殖导致胞膜通透性增加病毒增殖时产生大量未整合的病毒DNA形成多核巨细胞而导致细胞死亡受染细胞胞膜上表达的HIV糖蛋白抗原，能被特异性细胞毒性T细胞所识别，或与特异性抗体结合后，通过抗体依赖细胞介导的细胞毒作用而破坏细胞。病毒诱导自身免疫使T淋巴细胞损伤或功能障碍。免疫性

抗gpl20是主要中和抗体，能降低急性感染期血液中病毒抗原量。CTL和NK细胞，在杀伤病毒感染细胞和阻止病毒经细胞接触而扩散等方面起重要作用。感染早期产生的特异性免疫不能完全清除体内的病毒，一经感染便终生携带病毒，最终因致死性感染或发生恶性肿瘤而死亡。【实验室检查】检测特异性抗体ELISA、IFA、RIA敏感性高，适用于筛查 （HIVgpl20与淋巴细胞膜上的Ⅱ类MHC分子有同源区，所以会出现假阳性反应）

WB或RIP特异性高，作确证试验。病毒分离抗原检测常用ELISA法测定衣壳蛋白P24，此抗原特异性高，常出现于急性感染期，而在潜伏期中常为阴性，但发展为AIDS时，P24抗原又可重新升高。核酸检测诊断标准（1）HIV感染者：受检血清初筛试验，如酶联免疫吸附试验(ELISA)，免疫酶法或间接免疫荧光试验(IF)等方法检查阳性，再经确证试验，如蛋白印迹法(westemblottest)等方法复核确诊者。（2）确证病例：①艾滋病病毒抗体阳性，又具有下述任何一项者，可为实验室确诊艾滋病患者：近期内（3~6个月）体重减轻10%以上，且持续发热达38℃或持续腹泻（3~5次/日）1个月以上；有卡波济肉瘤或卡氏肺囊虫性肺炎；有明显的霉菌或其他条件致病菌感染。②若抗体阳性者体重下降、发热、腹泻等症状接近上述标准且具有以下任何一项时，可为实验确诊艾滋病患者：CD4/CD8淋巴细胞计数比值<1，CD4细胞计数下降；全身淋巴结肿大；明显的中枢神经系统占位性病变的症状和体征，出现痴呆，辨别能力丧失，或运动神经功能障碍等。【防治原则】目前尚无满意治疗措施，预防是控制该病的关键进行广泛宣传教育，杜绝吸毒和性滥交，以切断传播途径；建立HIV感染和AIDS的监测网络，掌握流行动态；对供血者进行HIV抗体检查，确保输血及血制品的安全。患者及无症状携带者应注意隔离，避免医源性传播。可靠的安全性

产生CTL反应和抗体反应以本地流行毒株组分为主，包含尽可能多的抗原决定簇避免带有可能诱发增强抗体和自身免疫反应的组分难题是病毒包膜蛋白的高度变异性新一代疫苗的必要条件：疫苗研究合成肽疫苗重组基因工程疫苗核酸疫苗病毒颗粒样疫苗减毒活疫苗和灭活疫苗抗病毒治疗临床上用于治疗艾滋病的药物分为三类:核甘类逆转录酶抑制剂非核甘类逆转录酶抑制剂蛋白酶抑制剂重组可溶性CD4阻止HlV吸附穿入易感细胞，也可用可溶性CD4与细菌毒素的结合物，选择性地杀伤表达有gp120的病毒感染细胞。免疫调节剂

如IFN-

、IL-2和胸腺素等在试验中。直到目前为止，AIDS尚无特效药。

联合交替使用(三合一)2种HlV逆转录酶抑制剂和1种蛋白酶抑制剂即所谓"鸡尾酒疗法"，可有效抑制病毒在体内的复制，因而能减轻病人症状及延长感染者和病人的生命。

人类嗜T细胞病毒

人类嗜T细胞病毒(humanT-celllymphotropicvirus，HTLV)是从白血病患者外周血淋巴细胞中培养分离出的一种人类逆转录病毒，属于逆转录病毒科RNA肿瘤亚科。可分为：HTLV-Ⅰ型和HTLV-Ⅱ型。生物学性状刺突：gpl20能与细胞表面的CD4+受体结合。核心：病毒RNA及逆转录酶。tat基因编码的蛋白是一种反式激活因子，能激活细胞的IL-2基因和IL-2R基因，使其异常表达而促进细胞大量增殖。致病性

HTLV-I型引起的成人T细胞白血病。HTLV-I可经输血，共用注射器或性接触等方式传播。也可通过胎盘或哺乳等方式传播。实验室检查与防治原则病毒分离与HIV基本相似。常用ELISA和IFA、Westernblot(WB)等方法检查血清中HTLV抗体。目前尚无有效防治HTLV感染的有效疫苗或药物。1.PUNCTUREDMEMBRANE病毒增殖导致胞膜通透性增加UninfectedCD4cellGp120negativeCellsFuse

2.形成多核巨细胞而导致细胞死亡InfectedCD4cellGp120positiveWhydoallT