医学微生物学：25-机会致病原虫

机会性原虫（opportunisticprotozoa）

在宿主体内通常处于隐性感染状态，宿主不出现临床症状；当宿主免疫功能低下时可出现增殖并且致病，出现相应临床表现弓形虫、肺孢子虫、隐孢子虫等孢子虫纲原虫归为一类，称为机会性致病原虫（opportunisticprotozoan)，其他原虫如蓝氏贾第鞭毛虫、棘阿米巴都有机会性致病特点。刚地弓形虫Toxoplasma

gondii卡氏肺孢子虫Pneumocystis

carinii隐孢子虫CryptosporidiumTyzzer结肠小袋纤毛虫BalantidiumcoliStein骂尸虫文人皆有尸虫三，处腹中，伺人隐微失误，辄籍记。日庚申，幸其人之昏睡，出谗与帝以求飨。以是人多谪过、疾疠、夭死。"人都有三条尸虫，呆在人的腹中，等待人有隐蔽细小的过错，就用本子记下来。到庚申那天，趁人昏睡的时候，在玉帝那进谗言来要求食物。这样人们多般会因为过失被贬谪、得疾病、会未享天寿而夭折。1908年首先在刚地梳趾鼠体内发现，由于其滋养体的形态呈弓形而得名。1923年报道了首例人体感染病例。1964年江西谢天华医生报道了我国首例病人。此虫可广泛寄生于人和动物，上世纪80年代以前国内研究主要是兽医界。

弓形虫病（toxoplasmadiosis）正常人感染弓形虫后多呈隐性感染，以包囊形式潜伏下来，一旦感染者出现免疫功能受损，隐性感染活化，慢性期转变为急性期。艾滋病患者常因弓形虫脑炎而致死。如孕妇感染，可影响胎儿发育，引起流产、早产，严重者可致胎儿畸形甚至死亡，对我国优生优育、计划生育工作带来影响。虫

种（Species)弓形虫目前在世界上只有一种，即刚地弓形虫（T.gondii）。但根据不同地域、不同宿主、毒力大小等差异将其分为许多不同的虫株

强毒株RH株，弱毒株Beverley、B36株，无毒株M149株有些弓形虫虫株在实验室经小鼠腹腔传代次数太多而丧失了在猫体内形成卵囊的能力，称为不完全株。（Toxoplasmagondii)刚地弓形虫简称弓形虫，呈世界性分布，寄生在人和多种动物的有核细胞内，引起人兽共患病，属于机会性致病原虫。P96一、形态1、滋养体：呈香蕉形或半月形，一端较尖，一端钝圆，平均大小1.5um×5.0um。包括速殖子和缓殖子（虫体较小，核稍偏后）。2、包囊：圆形或椭圆形的囊状物，有坚韧囊壁，内有数个至数千个缓殖子。3、假包囊：在组织细胞内，内含数个至十几个速殖子。4、卵囊：圆形或椭圆形，透明囊壁，内含2个孢子囊，每个孢子囊内含4个新月形子孢子。卵囊是有性生殖的产物，而包囊是无性生殖的产物。假包囊（pseudocyst)速殖子（tachyzoite)包囊（cyst)滋养体：二、生活史自学在中间宿主体内中间宿主：除人外，尚有多种哺乳动物（包括与人关系密切的有牛、羊、猪、猫、鼠等），鸟类、鱼类、爬行类。吞食卵囊包囊假包囊子孢子缓殖子速殖子速殖子假包囊

包囊急性期缓殖子慢性期1、感染：（1）阶段：卵囊、包囊、假包囊、滋养体。（2）方式：

A.猫粪中卵囊污染食物、水源、手；

B.食入动物肉类（猪、羊、牛）中包囊、假包囊；

C.孕妇体内假包囊中的速殖子经胎盘传给胎儿；

D.滋养体经伤口感染。（3）途径：A.经口（主要）B.胎盘

C.损伤的皮肤粘膜D.输血或器官移植2、寄生：⑴

急性期：

阶段：速殖子（假包囊）。

部位：有核细胞内（脑、眼、淋巴结、肝、心…）

繁殖：内二芽殖、二分裂、裂体增殖。内二芽殖：无性增殖方式的一种，首先胞核前沿长出2个花蕾样突起物，逐渐伸展形成2个子核，胞质一分为二，虫体分裂成2个滋养体）。2、寄生：⑵慢性期：

阶段：包囊

部位：有核细胞内（脑、眼、骨骼肌…）

寿命：数月、数年、甚至终身。急性期与慢性期可因宿主的免疫状况而相互转换在终宿主体内卵

囊子孢子滋养体假包囊包

囊裂殖体裂殖子♂配子体♀配子体♂配子♀配子合子卵囊裂体增殖配子生殖

终宿主：猫及猫科动物（虎、狮）1、发育部位：

猫小肠上皮细胞（亦称肠内期）滋养体亦可进入肠外其它组织细胞（肠外期，此时猫为中间宿主）。3、卵囊排出量：

1000万个/日，持续10-20

d。2、发育时间：

包囊从进入猫体到排出卵囊：3－10d假包囊、卵囊从进入猫体到排出卵囊：20d以上。弓形虫各发育期图解生活史小结1、两个专一性1）终宿主：猫及猫科动物2）终宿主体内寄生的细胞：肠上皮细胞2、两个随意性

1）中间宿主：人及猪、鼠、猫、牛、羊及家禽等多种脊椎动物

2）在中间宿主体内寄生的细胞：任何有核细胞包囊寄生于肠外的多器官（脑、眼等）生活史小结3、感染阶段——非特异性假包囊、包囊、滋养体、卵囊4、感染途径——多样性各感染阶段均可经口感染5、宿主转换——非定向性

（一）致病阶段：

速殖子（急性期），包囊（慢性期）

（二）

致病因素：

1、虫体毒力：

（1）强毒株（RH株）（急性感染）（2）弱毒株（Beverly株）（多为隐性感染）（3）弓形虫毒素三、致病2、宿主免疫状况：（1）当宿主免疫功能低下时，速殖子在细胞内大量繁殖，破坏细胞，引起组织的炎症、水肿、单核细胞浸润。（2）包囊因缓殖子增殖而体积增大，挤压器官，可致功能障碍。当宿主免疫功能受损时，包囊活化、复苏、缓殖子转化为速殖子，破坏组织细胞引起炎症。

致病

散出的虫体再侵入邻近其它细胞

速殖子在有核细胞内增殖，直至细胞破裂引起组织坏死，形成小坏死灶和周围组织的急性炎症反应

表现为水肿、单核细胞和少数多核细胞浸润

（三）

临床分型：

1、先天性弓形虫病（congenitaltoxoplasmosis）

一般只发生母体在怀孕期感染者。据统计，母体在孕期感染者，约50％的胎儿得先天感染。

只发生于初产妇。受染胎儿或婴儿多为隐性感染，有的出生后数月或数年才发病。（1）妊娠早期（前3个月）：感染的胎儿病情较重，往往不能完成妊娠（流产、早产、畸胎、死胎）。（2）妊娠中晚期：胎儿感染率相对较高（与早期比），但病损多数较早期轻，常见的有小脑积水，小脑畸形、脑钙化，精神障碍，眼球畸形，脉络膜视网膜炎及肝脾肿大合并黄疸等。存活的胎儿常因脑部损害出现智力发育不全或癫痫。妊娠时间

13周

26周

36周

胎儿感染率

4.9%17.3%28.9%

受感染胎儿的

症状发生率

61%25%9%1827例弓形虫感染孕妇中胎儿感染弓形虫的情况先天性弓形虫病（胎盘与头连在一起）弓形虫感染引起的脑膜膨出弓形虫感染引起的巨结肠2、获得性弓形虫病(acquiredtoxoplasmosis)

：

大多数无临床表现而成为隐性感染者。淋巴结肿大是最常见的临床表现（多见于颌下、颈后淋巴结），其次累及脑、眼，表现为脑膜脑炎、癫痫、精神异常及脉络膜视网膜炎。3、隐性感染急性发作：

⑴免疫功能降低：AIDS患者，恶性肿瘤（白血病）、孕妇（美疾控中心报告14510例AIDS并发弓形虫脑炎者有508例，大多在2-8月死亡）。⑵器官移植长期使用免疫抑制剂。视网膜脉络膜炎眼底出现圆形或椭圆形病灶，约1-3个视乳头面积大小，边界清楚，病灶内组织消失。

1、病原学检查：（检出率低）⑷分子生物学方法：PCR扩增。⑶动物接种或细胞培养：阴性盲传2－3次。

⑵组织活检：骨髓、淋巴结穿剌。⑴涂片染色：急性患者的体液：腹、胸、羊水、脑脊液、血液离心浓缩后涂片。四、实验诊断⑵间接血凝（IHA）：

特异性、敏感性均高，广泛应用。⑴染色试验（dyetest,DT）检查弓形虫的独特方法：

活滋养体与样本中异性抗体结合，不为美蓝着色，视为阳性；被美蓝着色者则为阴性。⑶ELISA：

特异性、敏感性高，方便快捷，应用十分广泛。2、

免疫学检查:3、分子生物学诊断PCR及DNA探针技术应用于检测弓形虫感染CT检查病变呈球形损害，90%为环状或结节状中枢神经系统最常受累，灰质形成多发性坏死灶和脓肿弓形虫病是一种人兽共患病，呈全球性分布。人类弓形虫感染率极高，一般为20-50%，最高达94%，有人估计全球有5-10亿人感染。我国人群感染率极不一致，从不足1%至38.6%，一般为5-20%。随着艾滋病的曼延，弓形虫机会感染呈增加趋势。五、流行◆intermediatehostdefinitivehost感染阶段多（猫粪卵囊或动物肉类的包囊）感染方式简单.滋养体、包囊、卵囊具有强的抵抗力；包囊在宿主内存活时间长.◆选择性不强（中间宿主和组织细胞）中间宿主：哺乳动物、鸟类、爬行动物寄生组织细胞：有核细胞◆

流行广泛的原因◆病例——艾滋病合并卡氏肺孢子虫感染一例患者男性，40岁，河北人，已婚，京津高速路某收费站负责人。主诉：发热、咳嗽4天，气短、呼吸困难一天。于1993年6月4日收住人民医院呼吸内科。查体：体温38℃，脉搏128次/分，呼吸42次/分，血压100/70mmHg。神志清楚，发育正常，营养差。急性病容，呼吸困难，口唇紫绀，皮肤未见黄染及皮疹。全身未触及肿大的淋巴结。颈部无抵抗。双下肺叩诊呈浊音，听诊可闻及湿罗音。心律齐，未闻及心脏杂音。腹软，未触及肝、脾。实验室检查：

血红蛋白150g/L（正常男性120~160g/L）,血白细胞5×109/L（正常4×109~10×109/L），淋巴细胞（0.4×109/L）。血沉110mm/1h（正常男性15mm/1h）。血糖、血钾、血钠、血氯正常。骨髓涂片未见异常。血培养为阴性。血气分析：

PaO230~20mmHg（正常103.5-0.42×年龄mmHg）X线检查：两肺呈弥漫性羽毛状和斑片阴影。住院病程：经积极抗感染和吸氧等治疗，病情未好转，发展为呼吸衰竭。气管切开行人工呼吸机维持，患者神志不清，血压下降，于1993年6月14日呼吸、循环衰竭死亡。抗HIV抗体检查：ELISA法，阳性；蛋白印迹确认（报告结果后10小时患者死亡）。尸体解剖主要发现：①两肺弥漫性实变，间质性肺炎，大部分肺泡腔内充满泡沫状蛋白性渗出物，银染色显示大量卡氏肺孢子虫；②肺门淋巴结可见酪样坏死，少量类上皮细胞和郎罕氏巨细胞。③两肾上腺可见核内巨细胞包含体。病理最后诊断：艾滋病患者，继发肺卡氏肺孢子虫病，肺门淋巴结结核，巨细胞病毒感染，因卡氏肺孢子虫性肺炎导致呼吸、循环衰竭死亡。Pneumocystiscarinii卡氏肺孢子虫1909年Chagas在枯氏锥虫感染的实验豚鼠肺印片中发现1912年Delanoe夫妇在大鼠肺部发现并定名为卡氏肺孢子虫1952年Vanek和Jirovec在患有间质性肺炎的死亡病儿肺渗出液中查到该虫体主要寄生在人或哺乳动物的肺泡、肺泡上皮细胞或肺泡间隙中可引起间质性浆细胞性肺炎本病为艾滋病患者常见并发症和主要致死原因之一属孢子虫纲，16srRNA序列分析，不典型真菌，位于子囊菌和担子菌之间世界各地均有分布，一般认为经空气传播卡氏肺孢子虫病（pneumocystosis）（卡氏肺孢子虫肺炎Pneumocystiscariniipneumonia,PCP）生活史中分包囊和滋养体两个阶段姬氏染色，囊壁不着色，透明似晕圈状或环状。囊内小体的胞质为浅蓝色，核为紫红色。包囊呈圆形或椭圆形，直径为4-6µm，略小于红细胞。成熟包囊内含有8个香蕉形囊内小体(intracystic

bodies)，各有1个核。甲胺银染色，包囊呈杯状，囊内小体看不到，但中央有括弧状结构姬氏染色，滋养体呈多态形，大小为2-5µm，胞质为浅蓝色，胞核为深紫色。生活史中分包囊和滋养体两个阶段

卡氏肺孢子虫的流行本病呈世界性分布，一般认为包囊经空气传播是该虫的传播途径。在正常人群中血清流行病学调查中发现，有1-10％呈隐性感染。血清抗体检测发现，在4岁以下儿童中有75%抗体阳性。人类的带虫状态可持续多年，提示肺孢子虫携带者可能为本病传染源。1979年报告了国内首例肾移植术后合并PCP的成人患者。至2000年底，我国大陆报道已超过百余病例。发病人数呈明显上升趋势。▼▼▼▼▼▼卡氏肺孢子虫感染隐性感染临床表现：间质性肺炎.①婴儿型（流行型）：早产儿、体质虚弱和营养不良的婴儿

②成人型（散发型）:先天性免疫缺陷病、艾滋病、恶性肿瘤或长期使用免疫抑制剂等病人◆◆PCP是艾滋病病人最常见的并发症，在美国有60-80％艾滋病人合并PCPAIDS中PCP临床起病隐匿，常为潜在性，进展较为缓慢，从发病到呼吸功能不全大约需要数周。主要症状有发烧、干咳、呼吸困难和紫钳，最终发展为弥漫性两肺肺炎。重症患者如诊断不及时，2-6w内死亡，病死率极高。有的病程短促，可于发病后4-8d内死亡。AIDS患者PCP的临床表现◆◆◆◆◆PathogenesisPCP来源于潜伏感染的再次激活

肺孢子虫进入健康人体

长期潜伏于气管、支气管或肺泡腔内（隐性感染）

病原体开始繁殖，产生大量滋养体和包囊（宿主免疫力低下时）

肺组织内迅速扩散导致PCP宿主对肺孢子虫感染的防御以细胞免疫为主，其中T细胞起很大作用

CD+4细胞通过细胞因子激活肺胞巨噬细胞

肺胞巨噬细胞吞噬滋养体和包囊

HIV感染者因CD4+细胞功能低下而增加了PCP的发病危险。（CD4+细胞<200/ul，就可能发生PCP。）labdiagnosis

标本采集方法:

●

咳痰或导痰

●纤维支气管镜(支气管刷检、支气管肺活检、支气管肺泡灌洗)●肺活检(开胸肺活检、经皮针刺吸引肺活检、穿刺肺活检)

痰液或气管分泌物有无包囊为确诊依据病原学检查：(Pathogenicdiagnosis)

染色方法●姬姆萨、甲苯胺蓝和四胺银染色法等.●快速银染色法仅需10min.▼

血清学诊断(Serologicaldiagnosis)▼▼分子生物学诊断（Moleculardiagnosis）PCR及DNA探针技术应用于检测肺孢子虫病的诊断

常用方法:免疫荧光法、免疫组织化学法及ELIAS等。Gomori银染色可清楚显示胞囊（约4-6μm）肺活检和肺冲洗液是可靠的确诊手段复方新诺明是治疗的首选药物但有高复发率Cryptosporidium隐孢子虫P71属孢子虫纲，球虫目，隐孢子虫科。微小的球虫类寄生虫（20多种）世界性分布，感染人和哺乳动物的是微小隐孢子虫引起人和哺乳动物腹泻的重要机会性感染卵囊是唯一的感染阶段粪口传播病原体位于肠道上皮细胞刷状缘正常人感染引起急性、短期、自限性腹泻免疫功能低下患者引起慢性、严重、水样腹泻Giemsa、HE染色可清楚显示病原体粪便查到卵囊即可诊断无有效治疗，可试用大蒜1907年由Tyzzer首次从无症状的鼠类胃粘膜中检出，并命名为鼠隐孢子虫（C.muris）1955年发现隐孢子虫引起火鸡严重腹泻1976年Nime等和Meisel等首次报告了美国的2例人体隐孢子虫病例1987年首次报道我国人体隐孢子虫病例隐孢子虫病的病原体有10种，使人体致病的种属主要是微小隐孢子虫(C.parvum)主要寄生在人或哺乳动物肠粘膜上皮细胞为艾滋病患者合并感染的重要机会致病病原之一微小隐孢子虫（C.parvum）人隐孢子虫（C.hominis）隐孢子虫为机会致病原虫，一般为隐性感染，当机体免疫力下降时，虫体发育、繁殖迅速而致病，主要临床表现为胃肠道症状，以腹泻为主。 实验诊断粪便涂片，用金胺酚—改良抗酸染色法检查卵囊。传染源为病人、带虫者和病畜。生活史中感染阶段和诊断阶段均是卵囊残留体子孢子薄壁卵囊（20%）—自体内循环厚壁卵囊（80%）—排出体外生活史生活史中裂体生殖、配子生殖和孢子生殖三个生殖阶段均在同一宿主的消化道上皮细胞表面完成，称为内生阶段。隐孢子虫的生活史简单，不需转换宿主就可以完成。随宿主粪便排出的卵囊具感染性。隐孢子虫流行情况本病属人兽共患寄生虫呈世界性分布，吞食了卵囊而感染。各地区腹泻患者中隐孢子虫检出率不等，发展中国家高于发达国家。如：美国各州青年人群抗隐孢子虫IgG的阳性率为17-32%不等，而中国农村11-13岁少年的阳性率为75%；发达国家爱滋病患者隐孢子虫的阳性率为14％（6-70%），而发展中国家为24％（8.7-48%）。1987年韩范等首次报道国内2例隐孢子虫感染1998年初，全国共查44789人，发现隐孢子虫感染者938人，感染者分布于19个省（区、市）。随着艾滋病的蔓延，隐孢子虫机会感染呈增加趋势。BalantidiumcoliMalmsten结肠小袋纤毛虫P74纤毛虫多为营自生生活的单细胞动物，少数可寄生于无脊椎动物和脊椎动物的消化道内成为专性寄生虫。大多数纤毛虫在生活史的各个阶段都有纤毛，以纤毛作为运动细胞器。与医学有关的仅有结肠小袋纤毛虫。属小袋科、动基裂纲，是人体最大的寄生原虫该虫寄生人体结肠内，可侵犯宿主的肠壁组织引起结肠小袋纤毛虫痢疾（balantidialdysentery）也可寄生于猪，猪成为重要的传染源及贮存宿主结肠小袋纤毛