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文档简介

1艾滋病(AIDS)2实验室检查3免疫学检测流式细胞仪测定4血清学检测(1)HIV抗体的初筛试验——ELISA(酶联免疫试验)5血清学检测(2)HIV抗体的确证试验——Westernblot(免疫印迹试验)6血清学检测(3)HIV抗原检测——ELISA夹心法测定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特异性稍差(可有假阳性)7分子生物学检测(1)HIVRNA检测—RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)PCR:高温变性(94℃)→低温退火(55℃)→适温延伸(72℃);经25~30个循环,成倍数扩增荧光定量PCR:比常规PCR多一个寡聚核苷酸探针(带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子)应用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血浆中的病毒RNA8分子生物学检测(2)淋巴细胞HIVRNA检测——Northern印迹杂交(Northernblot)

原理:RNA片段经电泳分离,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜,再用探针杂交9分子生物学检测(3)HIV变异株检测——Sanger测序法

原理:核酸扩增时,核苷酸在某一固定点开始,随机在某一特定的碱基处终止,产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸,通过在尿素变性的PAGE胶上电泳,获得DNA序列10病毒

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