马铃薯脱毒苗大规模生产继代扩繁的ms培养基改良试验

马铃薯脱毒苗大规模生产继代扩繁的ms培养基改良试验

甘薯健康生产体系的中心或主要基本环节是甘薯原种的生产。试管苗的后代是决定该环境变化的重要因素。MS培养基因成分含量较高,适宜很多品种,因此是国内大多数研究和生产单位的常用培养基。近年来很多研究单位都在为降低马铃薯脱毒苗培养成本,以自来水代替无离子水,用白糖代替试剂纯的蔗糖,试管苗生长无显著影响;基本培养基减去部分大量元素,减去或部分减去微量元素及有机成分培养试管苗;用液体培养替代固体等培养支持物的改进;此外一些学者还对培养基添加外源激素进行了研究。为保证贵州省薯类脱毒种苗快繁中心短期获得大量健壮的试管苗,并兼顾降低培养成本,本试验通过适当调节培养基成分、添加适量生长调节剂等试验,以期筛选出适宜不同马铃薯脱毒试管苗规模化生产要求的快繁培养基。1材料和方法1.1材料表面由贵州省薯类脱毒种苗快繁中心提供早熟品种费乌瑞它和中薯3号的脱毒试管苗。1.2苗床建立及调查各培养基均以3%白糖和自来水为基础,以MS+7g/L琼脂固体培养基为对照,设置了8处理。分别选择费乌瑞它和中薯3号较为一致的脱毒试管苗同天进行转接,在本中心组培室进行培养(光照强度2000lx以上,16h/d,温度20～25℃),15天后从每个处理中随机抽取10瓶进行调查,采用DPS软件进行统计分析,并对各处理继续扩繁和栽插进行跟踪。2结果与分析2.1卡拉胶或胶凝胶对试苗各生物性状的影响由表1可以看出,培养基中加入卡拉胶或琼脂作固体基质,对2品种试管苗无显著差异。对于品种费乌瑞它,在加NPK含量使用卡拉胶或琼脂,试管苗的各生物性状均无显著差异,且用卡拉胶的试管苗根数和株高平均略高于琼脂;对于品种中薯3号,在加NPK含量使用卡拉胶或琼脂,试管苗的各生物性状也无显著差异,且用卡拉胶的试管苗株高略高于琼脂。此外,在大量试管苗大规模继代扩繁生产中,使用卡拉胶或琼脂试管当代苗情、继代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原种中也无显著差异。2.2培养植物生物性状的指标添加1.25倍NPK的MS固体培养基,2品种试管苗均较对照有一定差异。对于品种费乌瑞它,增加NPK含量固体培养基(加卡拉胶或琼脂),其试管苗各生物性状较对照均有显著差异;株高较对照平均低0.08～0.17cm,而较对照平均茎粗约增加0.02cm,根长增加0.1cm以上,最大叶长增加0.1cm,最大叶宽增加0.05～0.06cm,其中A、B处理较对照最大叶长、根长、茎粗差异达显著水平,B处理较对照叶片数也存在显著差异;从苗长势看,增大NPK元素的苗长势旺盛,继代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原种表现也较好。因此,费乌瑞它品种较适应较高NPK浓度的培养基。对于中薯3号,增添NPK的卡拉胶或琼脂固体培养基的试管苗较对照略差。较对照各生物性状平均值均略差,其中茎粗、叶片数差异达显著水平。可见中薯3号较适应MS培养基的NPK浓度。2.3添加naa、ca从表1看,添加0.5mg/LNAA的培养基对2品种试管苗均有一定的影响。对于费乌瑞它,添加0.5mg/LNAA的试管苗各指标除茎粗外均高于对照,其中株高、根数、根长均较对照有显著差异;从苗长势看,添加NAA的试管苗前期出根早,根系发育快,苗高,但苗稍纤细,继代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原种表现一般。对于中薯3号,添加0.5mg/LNAA的试管苗情况类似费乌瑞它。其茎粗、叶片数、根长、最大叶长、最大叶宽均小于对照,其中茎粗、叶片数的差异达显著水平。从苗长势看,添加NAA的试管苗性状较对照差。3液体培养试验本试验针对大规模的生产实践情况设定的,通过本试验和规模生产发现:3.1MS培养基对很多品种较适应,如本试验中MS培养基对中薯3号较好,但高浓度NPK的改良MS培养基对费乌瑞它更适应。因此,针对于不同品种可能还需进行营养元素更深入的调配。3.2液体培养具有试管苗切段生根快、茎叶较粗壮等优点,但在贵州省薯类脱毒种苗快繁中心大规模的生产中发现,液体浅层静止培养苗顶部容易焦化,不是所有的叶腋都能抽出枝条,扩繁倍数没有固体培养高等问题。因此,本试验没有设置液体培养试验。目前纯卡拉胶粉售价仅60元/kg,远低于琼脂粉138元/kg,因此选择了卡拉胶作为研究对象。选择更低廉实用的固体培养基也是以后研究的方向。3.3外源激素在茎尖诱导、试管苗的复壮等方面应用较广、效果较好,但在大规模的试管苗继代扩繁中,添加外源激素,当代苗中可能表现好,但在继代繁殖以及在大棚栽插繁殖原原种中表现不好,因此本试