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文档简介

项目4：生化技术生产生物药物任务1：生化提取法生产木瓜蛋白酶

教学安排：

1.员工培训由老师讲解木瓜蛋白酶生产的理论基础及应用范围。分配实操任务：木瓜蛋白酶的生产。2.学生模拟组建运营一个木瓜蛋白酶生产企业，撰写计划书(在理论教学期间完成)。

市场部：木瓜蛋白酶的结构、功能、用途，木瓜蛋白酶市场状况与销售预测，原料来源状况，竞争对手状况与分析。技术部：确定木瓜蛋白酶生产的工艺流程及工艺参数，编制生产操作规程，确定生产车间的布局。品控部：制定木瓜蛋白酶的质量标准，生产取样分析操作规程，质量检测标准和操作规程。总经理：协调监督各部工作，最后拿出完整的计划书。3.计划书实施。计划书要先经过老师的审核，然后实施。实施过程中考核操作技能。实施后及时进行实训报告的撰写也总结。第一节生化提取技术基础

一药用酶的生产来源（一）药用酶的来源动植物提取法；微生物发酵法。（二）生化制备法1原料选择应注意的问题（1）酶在生物材料中的分布；

（2）考虑生物的发育阶段及营养状况；（3）动物组织宰杀后立即取材；（4）生化制备的综合成本。2生物材料的预处理（1）机械处理（2）反复冻融处理

（3）制备丙酮粉（4）微生物细胞的预处理3酶的提取（1）水溶液法应考虑的因素：①酶稳定性；②酶的溶解度；③酶与其它物质结合的性质；（2）有机溶剂法；（3）表面活性剂法。4酶的纯化（1）杂质的去除杂质：杂蛋白、多糖、脂类和核酸。①调pH和加热沉淀法；②蛋白质表面变性法；③选择性变性法；④降解或沉淀核酸法；⑤利用结合底物保护法除去杂蛋白。（2）脱盐①透析

②离子交换法；（3）浓缩①冷冻干燥法；②离子交换法；③超滤法；④凝胶吸水法；（4）酶的结晶①酶的结晶方法a盐析法；b有机溶剂沉淀法；c复合结晶法；d透析平衡法；e等电点法。②结晶条件的选择a酶液的纯度越纯越容易形成结晶；有纯化作用；b酶的浓度浓度越高越容易结晶；c温度低温有利；d时间好的结晶是在生长慢的条件下形成的；epH值选择等电点附近；f金属离子许多金属离子有促进作用；g晶种h结晶器皿处理充分清洗、烘干。（5）酶分离和纯化过程应注意的问题①防止酶蛋白变性避免高温，避免pH值过高或过低，避免剧烈搅拌，避免与重金属接触。②防止辅助因子流失③防止酶被蛋白水解酶降解；（三）微生物发酵法1高产菌株的选育；2发酵工艺的优化；3培养方法；4影响酶产量的因素；（1）温度；（2）pH值；（3）通气和搅拌；（4）泡沫和消泡剂；（5）添加诱导剂和抑制剂。第二节木瓜蛋白酶生产技术一、结构与性质木瓜蛋白酶为白色、淡褐色无定形粉末或颗粒。略溶于水、甘油，不溶于乙醚、乙醇和氯仿。最适温度65℃，易变性失活；木瓜蛋白酶等电点pI=9.6。半胱氨酸、硫化物、亚硫酸盐和EDTA是木瓜

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