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文档简介

一.实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:①.还原糖的鉴定:还原糖+②.脂肪的鉴定:

脂肪+

脂肪+

③.蛋白质的鉴定:蛋白质+④淀粉+斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ橘黄色苏丹Ⅳ红色双缩脲试剂紫色碘蓝色

50~65.C水加热2min(浅蓝色棕色砖红色)选材:含糖量较高的白色或近于白色的植物组织(排除色素对显色的干扰),苹果、梨最好

二实验流程(步骤)1.可溶性还原糖

制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)取液:(2mL)显色反应

2mL组织样液刚配制的斐林试剂2mL现象:

呈现蓝色变成砖红色(用前混匀)50~65.C水浴加热2min(葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖)还原糖的检测和观察:2.脂肪的鉴定

取材:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片

制片:①选取最薄的薄片移至载玻片中央②在薄片上滴加苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)

染液2-3滴,染色2-3min③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的苏丹Ⅲ

)④吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片显微观察:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜观察现象:有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒脂肪微粒酒精用途:70%消毒,50%的去浮色,95%溶色素,鉴定DNA,解离细胞,洗卡诺氏液脂肪的检测结果

3蛋白质的鉴定注:①过量的双缩脲试B(只能加3~4滴)会与试剂A反应,生成蓝色的氢氧化铜,掩盖生成的紫色。②双缩脲试剂鉴定的是肽键,蛋白质有肽键,所以有显色反应,氨基酸没有肽键,所以没有显色反应。创设碱性条件提供Cu2+)蛋白质的检测结果4.淀粉的鉴定取材:马铃薯匀浆检测:2mL组织样液碘液2滴现象:

摇匀后变成蓝色比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色三、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在碱性环境下的Cu2+NaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.05g/mLNaOH浓度为0.1g/mLCuS04浓度为0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,摇匀。(不能过量)水浴加热不需要(2)唯一需要水浴加热——还原糖鉴定,不能用酒精灯直接加热。若不加热则无砖红色沉淀出现。非还原糖(如蔗糖)+斐林试剂现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。(1)还原糖鉴定实验材料的要求①白色或近于无色:颜色反应明显,易于观察,不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料,防止颜色的干扰,。②还原糖含量高:不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。四、注意事项(3)唯一需要显微镜——脂肪鉴定,实验中50%酒精的作用——洗掉浮色。(4)在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,要留出一部分样液作对照(5)为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。花生芝麻太小,核桃大豆鸡蛋蛋白具坚硬的壳,都不容易切片若用大豆做材料,必须提前浸泡;若用蛋清作材料,必须稀释,防止其粘在试管壁上不易刷洗;且该实验应预留部分组织样液做对比。(6)(7)

各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是

,理由是梨的组织细胞

,你打算用什么试剂鉴定?

。②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为

,你打算用什么试剂鉴定?

.

[例]做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:梨

颜色为白色,并且糖含量较高

斐林试剂脂肪含量不如花生高,也不容易做切片

用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂③小麦种子中糖类化合物

含量很高,却不适合用来鉴定

__________,这是因为

________________________________________。

④适合于鉴定蛋白质的是

,理由是

,鉴定所用的试剂是

蛋白质含量高

黄豆和花生

双缩脲试剂淀粉

可溶性还原糖淀粉是非还原糖且不溶于水

1、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀,下列结论中最合理的是()A.青苹果汁中有淀粉,不含还原糖

B.熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉

C.苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖

D.苹果转熟时单糖聚合成淀粉

C2、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是()A.斐林试剂B.红墨水

C.双缩脲试剂D.苏丹Ⅳ染液

B3(2005.广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中,以下操作错误的是()A、可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A4.(2011年肇庆评估·双选)下列有关实验的操作方法或结果,错误的是A甘蔗中含有大量的糖,可用作还原糖鉴定实验的替代材料

B.低温和秋水仙素都是通过抑制纺锤体的形成导致染色体数目的变化

C.记名计算法适于调查个体较大、种群数量有限的动物类群

D.蝗虫减数分裂期短,观察一个精母细胞就可见减数分裂的连续变化

AD5:下列关于鉴定糖类、蛋白质和脂肪

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