番茄红素提取纯化工艺的研究

番茄红素提取纯化工艺的研究

番茄红素是成熟番茄的主要颜色，是一种无含氧的非晶态胡分。它的抗氧化性最强。长期以来，番茄红素作为一种普通的植物色素，没有引起人们的注意。近年来，番禺红素在预防和治疗癌症，尤其是癌症、妊娠、宫颈疾病、皮肤癌和宫颈疾病方面发挥了越来越多的关注。近年来的研究表明，番禺红素不仅分布在番茄中，还分布在西瓜、南瓜、李子、柿子、桃、瓜、果汁、葡萄糖、葡萄柚、覆盆子、香蕉、番禺红素等水果的根部。本研究通过对番禺红素样品进行提取、纯度测试和提取的方法，对番禺区中的番禺区资源进行了提取。碱洗是最好的洗洗方法：加入1mol/lnaoh溶液，清洗时间为1h，温度为40。最佳盐洗条件：使用20%nacl溶液，清洗时间为1h，清洗温度为50，搅拌比不混合好。番茄中还含有大量的脂肪酸、甘油酯和糖类物质,脂肪酸、甘油酯不溶于水,溶于有机溶剂,先用有机试剂抽提除去杂质,再利用番茄红素不溶于水的性质,在番茄浆中加入碱液并搅拌,使脂肪酸、甘油酯与碱液发生皂化反应,生成溶于水的皂化物,再将反应的产物用水洗至中性,除去其中溶于水的物质和多余的碱,这样可以得到较纯的番茄红素,本研究为进一步开发番茄红素提供了科学依据.1原料和试剂的制备华联超市经包装、检验的番茄和转基因的樱桃番茄.乙酸乙酯、丙酮、乙醇、石油醚、甲苯、甲醇、氢氧化钠、氯化钠等,以上试剂均为分析纯.2仪器、设备和测试物752型紫外分光光度计(上海精密仪器有限公司);定时恒温磁力搅拌器(上海雷磁新泾仪器有限公司);BCD-235W家用冰箱(TCL集团有限公司);TG-328B型分析天平(上海天平仪器厂);DZKW-4恒温电热水浴锅(黄骅家市新兴仪器厂);烘箱、离心机、循环水泵、抽滤装置、果蔬打浆机等.3实验方法3.1浸提效率的测定将新鲜的番茄洗净去皮和番茄皮分别打浆,各称取3.0000g番茄浆2份,加入24mL丙酮,在50℃水浴条件下浸提30min,1份浸提时不断搅拌,另1份浸提时不搅拌,在浸提结束后计算其粗制品的含量.结果表明番茄皮中番茄红素的含量高,搅拌的浸提效率高.3.2提取过程有机溶剂可采用乙酸乙酯、乙醇、丙酮、石油醚、甲苯和甲醇等,实验证实使用丙酮提取效果最好.4搅拌浸提法检测番茄皮中的番茄红素,当对番茄浆进行搅拌与不搅拌的处理,测其吸光度,搅拌的吸光度比未搅拌的吸光度大,说明其提取率高.在番茄皮搅拌浸提的实验中,搅拌的吸光度比未搅拌的吸光度大,说明其提取率高.总之从上述图中可以得:番茄皮和其匀浆的共同点是,在搅拌浸提中吸光度比未搅拌的吸光度大,说明其提取率高,番茄皮中的番茄红素含量高.5纯度条件优化5.1碱洗温度和温度对番茄红素提取效果的影响分别取15g番茄浆(去皮),加入15mL1mol/L氢氧化钠溶液,在一定的温度下(10℃),用电动搅拌机搅拌不同的时间(15min、30min、45min)后,用蒸馏水洗涤,并用pH试纸测定直至溶液为中性,过滤,将沉淀物放到表面皿中,在干燥箱中脱水干燥,待完全干燥后取出.将番茄渣粉碎成粉末,取0.5g粉末加10mL石油醚在40℃恒温水浴箱中,放置1h,取出过滤,取1mL提取液稀释10倍,测其吸光度.改变实验中碱洗温度,碱洗时间和碱洗液浓度重复以上步骤,比较提取液的吸光度.结果如表1-3.结果表明,碱洗时间、温度和浓度对番茄红素的提取效果有较大的影响,从表中分别可以找出碱洗的三个最佳条件为碱洗时间1h;碱洗温度40℃;碱液浓度1mol/L.根据上述各单方面因素实验结果,选用三因素两水平正交试验,其结论相同.5.2丙酮加搅拌提取法将去皮洗净的番茄打浆,准确称取20g匀浆,加5gNaCI后,再加20mL95%乙醇,进一步脱水除渣后,在鼓风干燥机(50℃)干燥24h,研细后精确称取3.0000g匀浆2份,分别置于三角瓶中加24mL丙酮、石油醚,50℃下恒温,前者在磁力搅拌器上搅拌30min,后者不搅拌,最后离心抽滤,测其体积,并用甲苯定容50mL在485nm测其吸光度.表明丙酮加搅拌的提取效果好.通过对番茄匀浆用盐洗涤0.5,1,1.5h后,测其吸光度分别为0.07,0.16,0.07,说明搅拌1h,盐洗对吸光度的影响最大.通过对番茄匀浆用盐洗涤25℃,40℃,45℃,50℃,60℃后,测其吸光度分别为0.09,0.14,0.17,0.17,0.17,由吸光度的数值可知,在50℃盐洗条件的纯化对吸光度的影响最大.通过对番茄匀浆搅拌不同的时间,15min,30min,45min后测其吸光度为0.007,0.036,0.007,由实验和图1、图2可以看出在1h,50℃和搅拌是盐洗条件最佳,测得的吸光度大.5.3碱洗纯化对番茄红素的提取效果的影响5.3.1盐洗法和碱洗皂化法的比较根据上述结果碱洗温度40℃,为了考察碱洗的效果从同一批番茄中取出三份,一份碱洗,一分盐洗,另一份水洗,干燥相同的时间,取出后进行对比,分别取三份番茄红素粗制品各3g置于三个三角瓶加入丙酮24mL在40℃恒温水浴浸提1h,取3mL提取液,稀释20倍测其吸光度,吸光度比较结果如表4.由表4可知,经过碱洗纯化的番茄红素比盐洗和水洗的黏度明显降低.根据吸光度的数值可以看出,碱洗纯化的效果要比盐洗和水洗的好,这说明碱洗纯化有利于番茄红素的提取.6碱洗皂化法搅拌对番茄红素的提取有很大帮助,通过实验将搅拌和未搅拌的番茄浆进行比较,则经搅拌的番茄浆的提取率高,而且实验过程比较简单,便于进行实验.在实验中,为了能有效的提高番茄红素的提取率,实验对番茄浆的洗涤做了比较.碱洗皂化能有效除去番茄中的大部分脂肪酸、甘油酯及各种游离脂肪酸,释放出其中包含的番茄红素,碱洗皂化对番茄红素的提取有很大效率,