种子室内检验技术-种子纯度鉴定（种子质量检测技术课件）

品种真实性和品种纯度鉴定

项目8学习任务1.熟练操作苯酸染色法、种子形态鉴定、品种纯度的电泳鉴定；2.会制订真实性和品种纯度鉴定方案；3.能准确填写真实性和品种纯度鉴定原始记载表；4.能准确计算真实性和品种纯度。按照《农作物种子检验规程》规范进行不同作物品种真实性和品种纯度鉴定操作，完成种子品种真实性和品种纯度原始记录表及结果报告。1.掌握种子纯度检验相关概念；2.理解种子纯度检测的目的、意义、电泳鉴定种子纯度的原理；3.熟知品种真实性和纯度鉴定的方法。能力目标学习目标

任务描述学习任务01

品种真实性和纯度鉴定基础知识02品种真实性和纯度鉴定03品种真实性和纯度鉴定考核评价本项目学习内容品种真实性和纯度鉴定基础知识PART.01项目8品种真实性和品种纯度鉴定01品种真实性和纯度鉴定基础知识1.品种纯度相关定义

品种纯度检验包括两方面内容，即品种真实性和品种纯度。

在品种纯度检验之前，应先进行种子真实性鉴定，如果品种真实性有问题，品种纯度检验就毫无意义了。品种真实性：指—批种子所属品种、种或属与文件描述是否相符。011.品种纯度相关定义品种纯度：指品种个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数(或株、穗数)占供检验本作物种子数(株、穗数)的百分率表示。异型株：指一个或多个性状(特征、特性)与原品种的性状明显不同的植株。纯度检验主要鉴别与本品种不同的异型株。品种真实性和纯度鉴定基础知识012.品种纯度品种纯度检验对象：种子、幼苗、植株。品种纯度检验：田间检验、室内检验、田间种植鉴定。三种检验之间的关系：以田间检验为主，田间检验与室内检验

相结合，辅之田间种植鉴定。品种真实性和纯度鉴定基础知识01是保证品种优良遗传特性得以充分发挥的前提。

研究表明，玉米种子纯度每降低1％，造成的减产幅度就会接近1％。在杂交稻种子生产中，亲本纯度每降低1％，制种田纯度就会下降 6～7％，粮食生产就会减产10％左右。是正确评定种子等级、贯彻优种优价政策的主要依据；玉米大田生产一般每穴播2粒，优质种子可单粒播种，如先玉335、郑单958等。3.品种纯度鉴定的意义品种真实性和纯度鉴定基础知识01是防止品种混杂退化，提高种子质量的必要手段。品种混杂、品种纯度降低，会明显降低作物产量和品质。品种纯度不高的种子播入田间后会导致作物生长发育不一致、植株高矮不齐、成熟迟早不同。种子纯度降低越多，影响产量的幅度也越大。

因此，品种真实性和品种纯度检验在种子生产、加工、贮藏及经营贸易中具有重要意义和应用价值。

3.品种纯度鉴定的意义品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时需设重复，每个重复不超过100粒种子。根据种子的形态特征，必要时可借助放大镜、解剖镜等逐粒进行观察，区别本品种、异品种，计数，计算品种纯度。鉴定时必须备有标准样品和鉴定图片或有关资料（说明或标签）。主要根据种子形态大小、颜色、芒、种脐、茸毛等明显或细微差异。品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定小麦种子

小麦种子的真伪可以根据粒色（白、红）、粒形（短柱、卵圆、椭圆、线形）、质地（角质、粉质）、种背性状（光滑与否、宽窄）、腹沟形状（宽窄、深浅）、茸毛（长短、多少）、胚（大小、黑胚）、籽粒大小等加以鉴别。品种真实性和纯度鉴定基础知识01红白皮小麦对比紫皮小麦黑皮小麦品种真实性和纯度鉴定基础知识4.种子形态鉴定01品种真实性和纯度鉴定基础知识小麦种子014.种子形态鉴定玉米种子

玉米种子根据粒形（圆粒、长粒、扁粒）、类型（马齿型、半马齿型、硬粒型、半硬粒型）、粒色深浅（白、浅黄、橙黄、浅红、紫色）、种子大小、果柄颜色（红、白、浅红、紫红）、顶部凹陷和饱满状况，胚的大小和形状，籽粒表面圆滑程度、棱角有无、颜色和花丝遗迹等区别不同品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识01玉米种子品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定大豆种子

大豆种子根据种子大小、粒形（球形、扁球形、扁椭球形等）颜色深浅（黄、青、红、褐、黑）、光泽、脐色（黄、青、红、浅褐、褐、深褐、黑）、脐形状（园、椭圆、倒卵圆、肾脏形等）区别不同品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识01大豆种子品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定大麦种子

可以根据籽粒形状（长宽比）、外稃基部皱褶、籽粒颜色、腹沟基刺、腹沟展开程度（宽、中、紧）、外稃侧背脉纹齿状物及脉色、外稃基部稃壳皱褶凹陷、小穗轴茸毛多少、鳞被（浆片）开头及茸毛稀密等加以鉴别。品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定水稻种子

水稻种子根据谷粒形状、长宽比、大小、稃壳和稃尖色、稃毛长短、稀密、柱头夹持率加以鉴别。品种真实性和纯度鉴定基础知识014.种子形态鉴定棉花种子

棉花种子的真伪主要是根据棉籽的纤维长度、纤维整齐度和杂籽百分率来判断。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每重复为100粒种子。幼苗鉴定可以通过两个主要途径：①提供给植株以加速发育的条件，当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定；②让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定禾谷类

禾谷类作物的芽鞘、中胚轴有紫色与绿色两大类，是受遗传基因控制的。

（1）播种方法种子播在砂中，玉米、高粱种子间隔1.0cm×4.5cm，燕麦、小麦种子间隔2.0cm×4.0cm，播种深度1.0cm；

（2）培养条件25℃恒温，24h光照，玉米、高梁每天加水，小麦、燕麦每隔4d施加缺磷的Hoagland1号培养液；

（3）幼苗鉴定

高粱、玉米14d，小麦7d，燕麦10～14d，鉴定芽鞘的颜色。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定禾谷类——玉米、高粱

可在出苗后第14天鉴定幼苗苗端颜色。苗端颜色可能有4种类型：深紫色(在茎和叶的近轴和远轴表面全深紫色）中等紫色(紫包茎，近轴叶表面几乎深紫色，但远轴叶表面为黄棕色)浅紫色(幼苗在茎和叶边缘有局部紫色，主要为绿色)绿色(幼苗完全绿色)。品种真实性和纯度鉴定基础知识01品种真实性和纯度鉴定基础知识01品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定禾谷类——大麦播种10天至2周可以鉴定胚轴或叶鞘。播种3-4周可以鉴定品种间的胚轴长度和株高差异。播种4-6周，大麦品种可以记录抽穗（春大麦）或不抽穗（冬大麦）。春性品种还可以评定穗上的芒颜色（红或绿）和其它性状。这些观察可作为品种分类，也可作为鉴定异型株。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定禾谷类——小麦小麦幼苗的芽鞘和茎色的鉴定，可在播后大约第7天进行。其颜色可分为紫色和绿色。抽穗情况的记载可在出苗后30天左右进行。抽穗情况可分为正在抽穗(春小麦)、未抽穗(冬小麦)。

该法可用于区分品种，及检出异型株。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定禾谷类——燕麦播后第10～14天：对燕麦幼苗的芽鞘和叶鞘颜色(红色或绿色)和叶鞘茸毛进行鉴定。播后30天：对幼苗茸毛有无，光滑或混合进行分类。燕麦植株也可进行抽穗(春燕麦品种)或不抽穗(冬燕麦品种)检查。

该检查可用于区分栽培品种，并附带检出异型株。品种真实性和纯度鉴定基础知识015.幼苗形态鉴定大豆播种方法：种子播于砂中，种子间隔2.5cm×2.5cm，播种深度2.5cm；培养条件：25℃恒温，24h光照，每隔4d施加Hoagland1号培养液；幼苗鉴定：根据幼苗下胚轴颜色（生长10～14d）、茸毛颜色（21d）、茸毛在胚轴上着生的角度（21d）、

小叶形状（21d）等进行鉴定。品种真实性和纯度鉴定基础知识01大豆大豆幼苗花青素鉴定，可在播后第10～14天进行。可能观察到4种苗色：绿色（仅有绿色素）赤褐色（下胚轴下部有赤褐色素）淡紫色（下胚轴紫色，上胚轴绿色）深紫色（上胚轴和下胚轴均为紫色）5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01大豆在播后第21天，待3片小叶完全展开时，可能观察到3种小叶茸毛角度：直角、紧贴、中等；可能观察到2种小叶茸毛颜色：黄褐色、灰色；可能观察到2种小叶形状：卵形(长／宽＜1.6）、尖形(长／宽＞2)。该法适用于区分品种和检出异型株。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01十字花科播种方法：将种子播在水分适宜的砂中，种子间隔1.0cm；培养条件：20~25℃培养，出苗后置于有充足阳光的室内培养；幼苗鉴定：发芽7d后鉴定子叶性状发芽10~12d鉴定真叶未展开时的性状15～20d鉴定真叶性状5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01十字花科

根据子叶与第一片真叶形态鉴定十字花科的种与变种。第一真叶期根据第一真叶的形状、大小、颜色、光泽、绒毛、叶脉宽窄及颜色、叶缘特性鉴别。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01十字花科甘蓝各变种第一真叶的性状结球甘蓝花椰菜抱子甘蓝羽衣甘蓝球茎甘蓝品种真实性和纯度鉴定基础知识01甜菜

有些栽培品种可根据幼苗颜色（白色、黄色、暗红色或红色）来区别。

将种球播在培养皿湿砂上，置于温室的柔和日光下，经7d后，检查幼苗下胚轴的颜色。根据白色与暗红色幼苗的比例，可在一定程度上表明糖用甜菜及白色饲料甜菜栽培品种的真实性。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01洋葱出苗后几天，在砂上长出的部分可评定为红叶或绿叶。播种后四周，检查是否形成球茎，记录从播种至球茎形成的时间。在球茎形成时记录株高和球茎(而葱不形成球茎)。播种后12周，在容器中生长的植株至少17cm，检查球茎的形状和颜色、叶姿和叶蜡。

该法可用于栽培品种分类和鉴定异型株。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01莴苣（1）播种方法：莴苣种子播在砂中，种子间隔1.0cm×4.0cm，播种深度1cm。（2）培养条件：25℃恒温，每隔4d施加Hoagland1号培养液。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01莴苣（3）幼苗鉴定：

3周后（长有3～4片叶）根据下胚轴颜色(粉红色或绿色)、

叶色(红、粉红、浅绿或深绿)、叶缘(深裂、全缘或浅裂)、叶片卷曲程度(似管形或展开)、子叶(宽或窄)等形状进行鉴别。该法可用于栽培品种分类和鉴定异型株。5.幼苗形态鉴定品种真实性和纯度鉴定基础知识01品种纯度检测品种纯度是种子质量标准中四大指标之一。品种真实性和品种纯度检验在种子生产、加工、贮藏及经营贸易中具有重要意义和应用价值。样品纯度的计算：品种真实性和纯度鉴定基础知识01种子纯度快速测定在品种纯度的测定中通常把物理法鉴定、化学法鉴定等在短时间内测定品种纯度的方法归为快速测定方法。物理鉴定

（荧光分析法测定种子或幼苗的方法）

不同作物或不同品种，其种皮结构和化学组成不同，因此在紫外光照射下发出的荧光颜色也不同。

如十字花科不同种发出荧光不同：白菜为绿色，萝卜为浅蓝绿色，白芥为鲜红色，黑芥为深蓝色，田芥为浅蓝色。品种真实性和纯度鉴定基础知识01种子纯度快速测定化学鉴定

鉴定品种的化学特性主要是根据不同品种的种子化学成分的差异，用化学药剂处理后所产生的颜色的差异区分不同品种。

常用的化学测定法有：麦类、水稻、牧草的苯酚染色法、大豆种子的愈创木酚染色法等。品种真实性和纯度鉴定基础知识01种子纯度快速测定方法

苯酚染色法愈创木酚染色法

荧光分析法品种真实性和纯度鉴定基础知识011.苯酚染色法的原理小麦种皮内，水稻皮壳内含有的多酚氧化酶和金属元素，多酚氧化酶在金属元素催化作用下，将苯酚氧化成黑褐色的对苯醌。不同品种多酚氧化酶和金属元素含量有差异，在同一苯酚染色条件表现不同颜色，由此鉴定品种纯度。该法主要适用于小麦、水稻种子。品种真实性和纯度鉴定基础知识012.主要仪器设备冰箱培养皿分析

天平其它

……镊子滤纸品种真实性和纯度鉴定基础知识01苯酚染色法测定程序方案数取试样种子预湿苯酚染色观察鉴定结果计算结果报告品种真实性和纯度鉴定基础知识013.苯酚染色法（小麦）步骤数取试样数取净种子400粒，每重复100粒；种子预湿将种子浸入清水中经18～24h，用滤纸吸干表面水分；苯酚染色置于垫有已经过1%苯酚溶液温润滤纸的培养皿内（腹沟朝下），盖上培养皿盖。室温放置4h，即可鉴定种子染色深浅。品种真实性和纯度鉴定基础知识013.苯酚染色法（小麦）观察鉴定小麦观察颖果染色情况，一般染色后颜色可分为不染色、淡褐色、褐色、深褐色、黑色五种。将与基本颜色不同的种子取出作为异品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识013.苯酚染色法（小麦）五种颜色反应不染色品种真实性和纯度鉴定基础知识013.苯酚染色法（水稻）数取试样数取净种子400粒，每重复100粒；种子预湿将种子浸入清水中经6h，倒去清水；苯酚染色注入1%(m/V)苯酚溶液，盖上培养皿盖，室温放置12h，取出用清水洗涤，放在湿润的滤纸上24h。品种真实性和纯度鉴定基础知识013.苯酚染色法（水稻）观察鉴定观察谷粒或米粒染色程度。谷粒染色分为不染色、淡茶褐色、茶褐色、黑褐色和黑色五级。品种真实性和纯度鉴定基础知识试验中应注意的问题有哪些？1.某些小麦品种利用标准法染色后，颜色相同无法区别。可采用加速或延缓剂处理后再染色鉴定。对染色很深的种子，用0.3%碳酸钠溶液浸种18小时（室温）；对染色很浅的种子利用0.01%硫酸铜溶液浸种18小时，然后置培养皿内染色。2.在应用此法测定麦类品种纯度时，最好用固定程序测定现有品种的染色情况，供测定时参考。01特别关注品种真实性和纯度鉴定基础知识011.愈创木酚染色法原理

大豆种皮内的过氧化物酶，可催化过氧化氢分解产生游离氧基，游离氧基可使无色的愈创木酚氧化产生红褐色的邻甲氧基对苯醌，由于不同品种过氧化物酶活性不同，溶液颜色也有深浅之分，据此区分不同品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识012.主要仪器设备品种真实性和纯度鉴定基础知识013.愈创木酚染色法（大豆）步骤（1）数取试样数取净种子400粒，每重复100粒；品种真实性和纯度鉴定基础知识013.愈创木酚染色法（大豆）步骤（2）样品预处理将大豆种皮逐粒剥下，分别放入指形管内，然后注入1mL蒸馏水，在30℃下浸泡1h。品种真实性和纯度鉴定基础知识013.愈创木酚染色法（大豆）步骤（3）愈创木酚染色在每支试管中加入10滴5%愈创木酚溶液，10min后，每支试管加入1滴0.1%过氧化氢溶液。品种真实性和纯度鉴定基础知识013.愈创木酚染色法（大豆）步骤4.观察鉴定1min后根据溶液呈现的颜色差异区分本品种和异品种。品种真实性和纯度鉴定基础知识品种纯度鉴定原始记载表的填写品种真实性和纯度鉴定基础知识01品种真实性和品种纯度鉴定PART.02项目8品种真实性和品种纯度鉴定02品种真实性和品种纯度鉴定作为电泳支持物的聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺和交联剂（N，N-亚甲基双丙烯酰胺）在催化剂作用下聚合而成的高分子胶状聚合物。聚丙稀酰胺凝胶电泳（简称PAGE）因其凝胶透明度高、弹性好、机械强度高、化学稳定性好、对PH、温度变化稳定；没有吸附和电渗现象，并通过改变丙烯酰胺和交联剂的浓度有效控制凝胶孔径的大小，在品种纯度电泳分析中广泛应用。聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理021.电泳检测的主要仪器电泳仪电泳槽分析

天平其它

……胶片观察灯离心机品种真实性和品种纯度鉴定02离心机电泳仪垂直电泳槽1.电泳检测的主要仪器品种真实性和品种纯度鉴定02电子天平磁力搅拌器微量进样器1.电泳检测的主要仪器品种真实性和品种纯度鉴定02胶片观察灯单粒样品粉碎器1.电泳检测的主要仪器品种真实性和品种纯度鉴定02玻璃支架脱色摇床1.电泳检测的主要仪器品种真实性和品种纯度鉴定022.主要试剂品种真实性和品种纯度鉴定023.溶液配制品种真实性和品种纯度鉴定02在导师指导带领下，首先在品种纯度测定开始前做好一切准备工作，仪器使用前要对仪器状态进行查看，并做好记录；对检验室温度、湿度、电源、供水和排水进行有效的控制，并做好记录；其次，规范进行不同作物品种聚丙烯酰胺凝胶电泳操作，完成品种纯度鉴定结果及原始记载表的填写。任务描述品种真实性和品种纯度鉴定02品种纯度电泳检测程序方案样品制备制备凝胶点样电泳染色图谱鉴定结果报告品种真实性和品种纯