改组织学绪论(7版)

组织学与胚胎学

第一章组织学绪论目的要求

1．掌握组织的基本概念和类型，细胞、组织、器官、系统的关系。2．熟悉组织学常用研究技术的基本原理及其应用。3．了解组织学研究内容和学习这门课程的目的。一、组织学的研究内容组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关功能的科学组织学常用量度单位微米(1μm=0.001mm)纳米(1nm=0.001μm)

消化系统

食管上皮组织肌组织结缔组织复层扁平上皮涂片组织学研究内容细胞细胞外基质组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织器官和系统人体意义：

只有深入了解机体的结构才可能透彻阐明其功能。掌握组织学的基本知识和技能,是将来学好生理学和病理学的前提。二、组织胚胎学研究技术问题

解决方法

观察对象太小

放大

显微镜

观察对象无色，无反差

染色（HE染色）

观察对象生化成分不同

细胞化学、免疫组织化学

观察对象是活体

培养(一)光镜技术分辨率(Resolution)是指能够分辨相邻两点之间的最小距离。LM的分辨率约为0.2μm。1.切片(Section):将组织切薄使光线可以透过。a.固定(Fixation):为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛等固定剂中。b.石蜡包埋(Paraffinembedding):*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70~100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。*浸蜡(Infiltration):在60~62◦C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。c.切片:用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。2.染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料是水溶性的。HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色碱性染料将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA酸性染料将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网）H.E.染色切片在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蜡。*染色:石蜡→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性树胶。其他染色法:硝酸银→神经细胞、活体染色、特殊染色其他切片技术:火棉胶包埋,冰冻切片,涂片,铺片,磨片。银染色方法亲银性(直接染色)嗜银性(+还原剂)硝酸银溶液直接染色(或+还原剂)银染色法活体染色特殊染色

H&E染色的中等动静脉不同的染色方法，其结果不同。醛复红染色的中等动静脉铺片涂片

smear磨片(二)电镜技术（ElectronMicroscopy）透射电镜（Transmissionelectronmicroscopy

TEM）用途:观察细胞内部结构扫描电镜（ScanningelectronmicroscopySEM）用途:观察组织或细胞表面的立体结构

透射电子显微镜

Transmissionelectronmicroscope观察细胞内部结构以电子束穿透样品,经聚合放大后,显像于荧光屏上进行观察与摄片

扫描电镜（Scanningelectronmicroscope,SEM）

观察细胞或组织的表面结构组织块经取材固定后,干燥,在标本表面先后喷一层碳膜和合金膜,镜下扫描成像透射电镜电子密度高:当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时,电子被散射的多,因此,射落到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片呈黑或深灰色,称为电子密

度高。反之称为电子密度低。影像较黑称电子密度高反之称电子密度低(三)组织化学术组织化学术:为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术,与组织学技术相结合而产生的技术,能在组织切片定性、定位、定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态。细胞