暨大-生化课件-第二章酶学

1.酶是一种特殊的催化剂具有极高的效率。高度的专一性。酶促反应的可调节性。在温和的反应环境下加速反应。第一页第二页，共27页。2.酶的化学本质绝大多数酶是蛋白质。80年代以后发现某些酶的成分是RNA，称为核酶。第二页第三页，共27页。酶按分子组成分为单纯酶和结合酶。单纯酶：仅由氨基酸残基构成。结合酶：由蛋白质（酶蛋白）和非蛋白质（辅助因子）组成，全酶＝酶蛋白＋辅助因子。辅助因子包括①辅酶：与酶蛋白以非共价键疏松结合，可用透析等简单方法分离；②辅基：与酶蛋白以共价键牢固结合，不能用透析等简单方法分离。第三页第四页，共27页。第四页第五页，共27页。酶按酶按结构为单体酶和寡聚酶和多酶体系单体酶：由一条肽链构成。寡聚酶：由多条肽链构成的一种酶。多酶体系：由代谢上相关的几种酶构成的一种复合体。第五页第六页，共27页。3.酶的分类与命名国际系统分类法将酶按其催化反应的性质分为六大类，每一个酶都用四个点隔开的数字编号，编号前冠以EC（酶学委员会缩写），四个数字依次表示该酶应属的大类、亚类、亚亚类及酶的顺序排号，这种编码一种酶的四个数字即是酶的标码。第六页第七页，共27页。氧化还原酶类：催化底物进行各种氧化还原反应。转移酶类：催化底物之间进行某些基团的转移或交换的反应。水解酶类：催化底物发生各种水解反应。裂合酶类：催化共价连接基团的转移并形成双键的反应或其逆反应。异构酶类：可催化各种同分异构体之间相互转化反应。合成酶类：催化两分子底物合成为一分子化合物，并伴随ATP磷酸键断裂释能的反应。六大类酶第七页第八页，共27页。研究酶反应速度及其影响因素，这些因素包括酶浓度、底物浓度、温度、pH、抑制剂、激活剂等。二.酶促反应动力学第八页第九页，共27页。2.1酶反应速度和酶的计量酶反应速度的测定，多用单位时间内产物浓度的增加作为反应速度的量度。酶反应速度一般以初始速度表示。酶活性指酶催化某种化学反应的能力，以酶促反应速度表示。在规定条件下，酶促反应在单位时间内生成一定量产物或消耗一定量底物所需酶量。国际生化学会酶学委员会规定：在特定条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位（IU）。用比活力（mg蛋白中酶的活力），反映酶制剂的纯度。第九页第十页，共27页。第十页第十一页，共27页。底物浓度对反应速度的影响其他因素不变，底物浓度的变化对反应速度作图（V-[S]曲线）：底物浓度很低时，V与[S]呈正比；底物浓度再增加，V的增加趋缓；当[S]达某一值后，反应速度达最大，反应速度不再增加。第十一页第十二页，共27页。米氏方程（Michaelis-Menten）根据中间产物学说，得出了反应速度与底物浓度关系的数学方程式。即米氏方程:Vmax为最大反应速度，Km为米氏常数。第十二页第十三页，共27页。米氏常数米氏常数是酶的特征常数，只与酶的性质有关，不受底物浓度和酶浓度的影响。不同酶Km值不同。Km值是反应速度（V）达到最大反应速度（Vmax）一半时的底物浓度（单位为mol/L或mmol/L）。Km的大小近似地反映了酶与底物结合成中间产物的难易程度。如果一种酶可以催化几种底物发生反应，Km值最小的底物是该酶的最适底物。通过米氏常数可了解测定酶活性的底物浓度第十三页第十四页，共27页。米氏常数的测定——作图法第十四页第十五页，共27页。双底物反应机制——顺序、随机、乒乓机制第十五页第十六页，共27页。酶浓度、温度、pH对反应速度的影响当[S]＞＞[E]，使酶达饱和时，v与[E]近似成正比关系。升高温度可加快酶促反应速度，同时也会加速酶蛋白变性。酶促反应速度最快时的环境温度称为该酶促反应的最适温度。pH影响酶活性中心某些必需基团、辅酶及许多底物的解离状态。酶促反应速度最快时的环境pH称为酶促反应的最适pH。第十六页第十七页，共27页。抑制剂对反应速度的影响能使酶活性下降而不引起酶蛋白变性的物质称酶的抑制剂。根据抑制剂与酶结合牢固或疏松，分为可逆性抑制与不可逆性抑制。可逆性抑制作用：以非共价键与酶或酶-底物复合物疏松结合，利用透析或超滤等简单方法可除去其抑制，使酶恢复活性，称可逆性抑制作用。第十七页第十八页，共27页。竞争性抑制作用非竞争性抑制作用反竞争性抑制作用三种可逆抑制第十八页第十九页，共27页。酶的作用机理活性中心：在反应过程中酶分子中直接参与反应的基团，所组成的空间结构。活性中心包括两个功能部位：与底物结合的结合部位和催化部位。活性中心通常由酶分子中虽然在一级结构上并不紧密相邻的几个氨基酸残基侧链上的基团组成。对于需要辅因子的结合蛋白酶来说，辅酶（或辅基）也是活性中心的组成部分。酶分子其它部分为酶活性中心的形成提供了结构基础。第十九页第二十页，共27页。酶的专一性“诱导契合学说”酶的活性中心与底物的结构不是刚性互补而是柔性互补。酶分子与底物分子接近时，酶蛋白质受底物分子诱导，构象发生有利于与底物结合的变化，酶与底物在此基础上互补楔合，进行反应。第二十页第二十一页，共27页。酶学中一些重要概念第二十一页第二十二页，共27页。基本上均为寡聚酶。是代谢过程的关键调节酶。包括具有催化功能的活性中心及起调节作用的调节中心。别构酶（allostericenzyme）第二十二页第二十三页，共27页。v-［S］曲线为S形曲线。别构效应：当调节物与酶分子中的变构中心结合后，诱导出或稳定住酶分子的某种构象，使酶活性中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而调节酶的反应速度及代谢过程。正效应剂通常是变构酶的底物，负效应剂一般是代谢反应序列的终产物。别构效应第二十三页第二十四页，共27页。有机体内能够催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。同工酶（Isoenzyme）第二十四页第二十五页，共27页。有些酶刚合成或初分泌