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不同氨酸水平对蛋鸡生产性能、蛋品质及血清生化指标的影响

现在,中国的蛋白质饲料价格非常高。据报道,蛋白质原料成本是蛋饲料成本的主要部分。因此,降低饲养粮食中粗蛋白质含量,可以有效节约成本,减少动物粪便和尿中氮的排放,从而减少污染。但当蛋鸡饲粮中蛋白质的水平降低时,可造成某些氨基酸的缺乏,如作为蛋鸡饲粮中的第一、第二限制性氨基酸的蛋氨酸、赖氨酸,可通过在饲粮中添加这些氨基酸满足蛋鸡需要,当饲粮中蛋白质水平进一步降低时,将会导致其他一些氨基酸,如苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸的缺乏。在常规的玉米-豆粕型饲粮中,苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸作为蛋鸡非首要限制性氨基酸能够满足其需要,但是在其他蛋白质饲料原料提供蛋白质的饲粮中,它们可能成为蛋鸡的第一或第二限制性氨基酸。在缺乏动物性蛋白质原料的饲粮中,缬氨酸成为仅次于苏氨酸的限制性氨基酸。当必需氨基酸满足动物需要时,降低饲粮中蛋白质的水平不会造成动物生产性能的下降。因此,研究蛋鸡必需氨基酸的最适添加量尤为重要,蛋氨酸、赖氨酸作为蛋鸡玉米-豆粕型基础饲粮的第一、二限制性氨基酸已研究较多,苏氨酸、色氨酸等氨基酸也有了初步的研究,而关于缬氨酸在蛋鸡上的研究甚少。饲粮中的缬氨酸进入动物体后主要通过十二指肠和回肠主动吸收,参与机体的代谢过程,如作为蛋白质合成的原料,参与机体组织修复,维持机体氮代谢。缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸为支链氨基酸,它们有着相似的化学结构,在动物体内由相同的酶转运系统转运通过细胞膜,又由相同的酶降解,在通过血脑屏障时相互竞争,在动物体内存在拮抗作用,支链氨基酸在促进蛋白质合成、维持动物正常代谢和健康方面具有重要的生理功能。在玉米-豆粕型基础饲粮中,异亮氨酸和缬氨酸被称为蛋鸡的第三限制性氨基酸,缬氨酸还是构成鸡血清γ-球蛋白的重要成分。根据以往的研究及NRC(1988,1994)蛋鸡理想氨基酸模型可知,缬氨酸需要量变化范围很大,在0.4%~0.9%。因此,研究蛋鸡缬氨酸的需要量,为蛋鸡饲养提供一个可靠的缬氨酸添加量参考具有重要的实践意义。本试验旨在通过在饲粮中添加不同水平的缬氨酸,研究其对产蛋高峰期蛋鸡的生产性能、蛋品质及血清生化指标的影响,初步探讨饲粮不同缬氨酸水平在蛋鸡生产中的应用效果及作用机理,为确定适合我国实际生产情况的蛋鸡饲粮缬氨酸的适宜添加水平提供理论依据。1材料和方法1.1试验材料试验所用氨基酸均购于张家港市思普生化有限公司,试验地点为浙江省嘉兴市桐乡凤翔蛋鸡养殖场,试验动物为海兰褐壳商品蛋鸡。1.2饲粮中氨酸水平选择720只体重相近的40周龄的海兰褐壳蛋鸡,随机分成5组,每组4个重复,每个重复36只鸡。基础饲粮参照《鸡饲养标准》(NY/T33—2004)蛋鸡营养需要配制,其组成及营养水平见表1。第1组饲喂缬氨酸水平为0.6%的基础饲粮,其余4组在基础饲粮中分别添加0.1%、0.2%、0.3%和0.4%的缬氨酸,从而使饲粮中缬氨酸水平分别达到0.7%、0.8%、0.9%和1.0%。蛋鸡采用3层全阶梯笼养,全期自由采食和饮水,按常规方法进行管理和免疫。预试期为7d,正试期为56d。预混料为每千克饲粮提供Thepremixprovidedthefollowingperkgofdiet:VA7000IU,VD32500IU,VE30mg,VK31mg,VB11.5mg,VB24mg,VB62mg,VB120.02mg,烟酸niacin30mg,叶酸folicacid0.55mg,泛酸pantothenicacid10mg,生物素biotin0.16mg,氯化胆碱chloridecholine400mg,Cu20mg,Fe70mg,Mn100mg,Zn70mg,I0.4mg,Se0.5mg。1.3指标和方法的测量1.3.1生产力指数的测量每天记录各重复产蛋数及蛋重,每周统计1次采食量,计算产蛋率、平均蛋重、日产蛋均重、平均日采食量及料蛋比。1.3.2质、营养成分测定试验结束后,以重复为单位随机抽取6枚鸡蛋,每组24枚,进行蛋品质指标测定及营养成分分析。蛋品质采用日产DET6000蛋品质测定仪检测,主要指标有:蛋白高度、蛋黄颜色、哈夫单位、蛋壳厚度、蛋壳强度。蛋黄和蛋清营养成分测定:用蛋黄分离器将蛋清和蛋黄完全分离,收集完整蛋黄称其重量,并将蛋壳风干,称重,分别计算蛋黄和蛋清相对重;将蛋清和蛋黄分别放入恒温干燥箱中65℃24h,称重,分别计算蛋黄和蛋清水分含量;分别称取一定量的新鲜蛋清和蛋黄,采用考马斯亮蓝法测定蛋黄和蛋清蛋白质含量。1.3.3离心制备血清试验结束后,每个重复随机选取3只鸡,每组12只,禁食24h后称重,采血,3000r/min离心10min制备血清。血清钙(Ca)、磷(P)、葡萄糖(Glu)、总氨基酸(TAA)、白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)、尿素氮(UN)及尿酸(UA)含量均采用试剂盒测定,试剂盒购于南京建成生物工程研究所。1.4dunpan氏法多重比较试验数据均以“平均值±标准误”表示,采用SPSS16.0单因子方差分析(One-wayANOVA)处理数据,采用Duncan氏法进行多重比较。以P<0.05作为差异显著的标准。使用SPSS16.0中的回归模型,以料蛋比、蛋壳强度和血清白蛋白含量作为评价指标,对各缬氨酸水平组的数据进行二次曲线拟合,根据二次方程计算需要量。2结果2.1各组料蛋比对比从表2可以看出,不同缬氨酸水平组间产蛋率、平均蛋重和日产蛋均重均差异不显著(P>0.05),其中0.8%水平组产蛋率最高,平均蛋重最低。1.0%水平组平均日采食量显著低于其他各组,比0.6%、0.7%、0.9%和1.0%水平组分别降低了3.30%、3.34%、4.89%和3.36%(P<0.05)。0.8%水平组料蛋比显著低于其他各组,比0.6%、0.7%、0.9%和1.0%水平组分别降低了9.22%、6.19%、8.37%和11.66%(P<0.05)。同行数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05)。下表同。Inthesamerow,valueswithdifferentlettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0.05).Thesameasbelow.2.2各组血清蛋白质、强度对比从表3可以看出,1.0%水平组蛋清水分含量显著高于0.7%和0.8%水平组(P<0.05),而与其他2组无显著性差异(P>0.05)。1.0%水平组蛋清蛋白质含量最低,较0.8%和0.9%水平组分别降低了14.42%、18.53%(P<0.05),较0.6%和0.7%水平组有下降的趋势(P=0.063,P=0.075)。0.8%水平组蛋壳强度最大,较0.6%水平组显著提高了29.62%(P<0.05),较其他各组都表现出升高的趋势(P<0.10)。其他指标在各组间均无显著性差异(P>0.05)。2.3各组蛋白、尿素氮和尿酸含量比较从表4可以看出,各组血清钙和磷含量均无显著性差异(P>0.05)。0.8%水平组葡萄糖含量分别比0.6%、0.7%、0.9%和1.0%水平组高44.09%、40.23%、53.05%和37.67%(P<0.05)。0.7%水平组白蛋白含量显著低于0.8%水平组(P<0.05),与其他各组差异均不显著(P>0.05);0.8%水平组与1.0%水平组总蛋白含量表现出显著性差异(P<0.05)。0.8%水平组尿素氮和尿酸含量相对于其他各组均表现出相同的下降趋势(P<0.10);0.8%水平组总氨基酸含量较其他各组均表现出上升的趋势(P<0.10)。2.4产蛋期鸡蛋氨酸消耗量分析方程表明,以料蛋比为评价指标时,产蛋高峰期蛋鸡缬氨酸需要量为0.78%(回归方程:Y=4.357X2-6.801X+4.689,R2=0.769);以蛋壳强度和血清白蛋白含量为评价指标时,产蛋高峰期蛋鸡缬氨酸需要量分别为0.81%和0.75%(回归方程:Y=-21.071X2+34.164X-9.778,R2=1.000;Y=-36.929X2+55.096X+2.942,R2=0.527)。3讨论3.1增加了大豆氨酸水平对动物的影响据袁森泉报道,饲喂缬氨酸缺乏的饲粮对禽的正常生长不利,采食量、体增重及蛋白质沉积量均显著降低,在补充缬氨酸后生产性能显著提高。缺乏缬氨酸还可导致产蛋高峰期缩短,产蛋率下降,机体对病毒和细菌的抵抗力减弱,并可导致饲料利用率降低。当饲粮中某种必需氨基酸的含量不足时,动物生长缓慢,饲料蛋白质利用低,随着饲粮中此种氨基酸含量的增加,动物生长逐渐加快,但当其水平超过需要量时,动物生长速度又下降,饲粮蛋白质利用率也降低。饲粮中某种支链氨基酸过量会破坏支链氨基酸间的平衡,严重阻碍其他氨基酸的有效吸收,使动物的采食量和生长速度下降,影响其健康生长。由于支链氨基酸之间存在拮抗作用,所以动物组织中缬氨酸含量升高会引起支链氨基酸转氨酶活性升高,亮氨酸和异亮氨酸分解增加,从而降低蛋白质的利用率。由此可见,适宜的缬氨酸水平对动物的生产性能有一定的促进作用,而缬氨酸的缺乏或过高都会导致动物生产性能的下降。在本试验中,缬氨酸对蛋鸡产蛋率、平均蛋重和日产蛋均重均无显著性影响,但产蛋率呈现出先上升后下降的趋势,料蛋比呈现出先下降后上升的趋势,都在缬氨酸水平为0.8%时达到最优值,且缬氨酸水平为1.0%时,蛋鸡的平均日采食量显著低于其他各组。这可能是由于在本试验中缬氨酸水平为0.8%时氨基酸平衡性最好,提高了蛋白质的利用率,从而提高了饲料的转化率,当低于和高于这个水平时破坏了氨基酸之间的平衡,导致蛋鸡不能有效地利用其他氨基酸,从而导致生产性能下降。本试验经过二次曲线回归分析后得出产蛋高峰期蛋鸡饲粮缬氨酸水平为0.78%时料蛋比最低。3.2蛋白品质和蛋白量蛋壳厚度和强度主要受遗传因素和钙、磷代谢的影响,本试验中蛋壳强度呈现出先上升后下降的趋势,在缬氨酸水平为0.8%时,蛋壳强度最大,而且此时血清中钙、磷含量在数值上也最高,可见0.8%的缬氨酸水平可能较好地促进了机体对钙、磷的吸收,其具体机制有待进一步研究。蛋白高度、哈夫单位、蛋黄颜色都是评价蛋品质好坏的重要指标,蛋白高度越高,哈夫单位越大,说明鸡蛋越新鲜,蛋品质越好,在本试验中,缬氨酸水平的升高对这些蛋品质指标均影响不大。鸡蛋内蛋白质含量是反映鸡蛋营养成分的重要指标,在本试验中,缬氨酸水平为1.0%时,蛋清蛋白质含量低于其他各组,其他各组之间均无显著性差异,这说明缬氨酸过高可能导致氨基酸不平衡,从而降低了蛋白质的利用率,导致了鸡蛋中蛋白质沉积的减少,这与Peganova等的研究结果相一致。使用回归模型中的二次曲线分析,以蛋壳强度为评价指标时,得出产蛋高峰期蛋鸡缬氨酸需要量为0.81%。3.3氨酸对克氏原螯虾血清尿素氮的影响尿素氮是体内蛋白质和氨基酸代谢的终产物,饲喂氨基酸平衡较好的饲粮时血清尿素氮含量较低,所以血清尿素氮含量可反映饲粮蛋白质的利用情况,较低的血清尿素氮含量表明氨基酸平衡较好,机体蛋白质的合成率较高。Tackman等研究也表明,血清尿素氮含量可以较准确地反映动物体内蛋白质代谢和氨基酸之间的平衡状况。黄红英等研究表明,饲粮中添加0.26%缬氨酸可以降低仔猪血清尿素氮含量,与本研究在蛋鸡上的结果相一致。钙和磷都是动物机体必需的矿物质,对蛋鸡蛋壳品质有着非常重要的作用,血清总游离氨基酸含量是反映氨基酸被机体吸收程度的重要指标,本试验中血清中钙、磷和总氨基酸含量都随着缬氨酸水平的提高呈现出先上升后下降的趋势,在0.8%水平组达到最大值。葡萄糖是反映体内能量代谢的重要指标,而缬氨酸是生糖氨基酸,与糖代谢有着密切的关系。在本试验中,0.8%水平组血清

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