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聚合酶的两个疑问解析1、人体内是否有逆转录酶?很多教师认为,逆转录酶是逆转录病毒特有的一类酶,在其他生物体内是不含有逆转录酶的。首先,逆转录病毒中确实含有逆转录酶,这类酶在该类病毒的生命周期中是不可替代的。1.1第一个发现的逆转录酶20世纪60年代,H.Temin在前人研究鸡肉瘤病毒(ASV)复制和转化癌细胞实验的基础上提出前病毒学说,并推测存在逆转录酶,随后他与Baltimore分别从ASV和小鼠白血病病毒(MLV)中发现了这种逆转录酶[1]。1.2人体内的逆转录酶人的遗传物质是DNA,貌似不需要发生逆转录过程,那么人体内是否就不存在逆转录酶呢?第一个要提到的在人体内具有逆转录活性的酶是端粒酶。由于细胞中DNA复制需要RNA作为引物等原因,线状DNA分子每复制一次两端会相应缩短。端粒酶是一种含有RNA序列的核糖核蛋白,随着DNA复制次数增加而造成端粒缩短到一定程度时,端粒酶就利用自身RNA中的一段重复序列作为模板,逆转录合成端粒DNA重复序列,表现出逆转录酶活性。人类端粒酶RNA序列在1995年被成功克隆。当然,端粒酶和病毒中的逆转录酶在结构和性质上都存在着许多差异。Chandramouly等2021年发表在ScienceAdvances上的一篇文章阐释了他们关于人类聚合酶θ(Polθ)的最新研究,该研究发现聚合酶θ同样表现出逆转录酶活性。该酶是高等真核生物中一种独特的DNA聚合酶解旋酶融合蛋白,其催化以RNA为模板的DNA修复[3]。由此看来,人体内也是存在逆转录酶的,或者说也有酶能表现出逆转录酶的活性。2、是否存在RNA依赖型RNA聚合酶?在学习中心法则相关内容时,教材中提到“少数生物(如一些RNA病毒)的遗传信息可以从RNA流向RNA”(人教版必修2“基因指导蛋白质的合成”一节),那么RNA是如何指导RNA合成的呢?第一种方式是RNA先逆转录成DNA,再以DNA为模板转录成RNA,如前文所述逆转录病毒就是通过这种方式将RNA中的遗传信息流向RNA。那么,有没有不以DNA为中间产物,而直接以RNA作为模板催化合成RNA的聚合酶呢?答案是肯定的,这种聚合酶就是RNA依赖型RNA聚合酶(RdRp)。大部分RNA病毒的RNA分子复制过程可能都是通过RdRp参与完成的。例如大多数RNA噬菌体都是正链RNA噬菌体,它们的RNA除发挥信使RNA的作用之外,也可以在RdRp的作用下合成负链RNA,再以负链RNA为模板大量产生子代噬菌体的正链RNA拷贝。此外,在动物RNA病毒和植物RNA病毒中,同样普遍存在RNA依赖型RNA聚合酶。有趣的是,实际上在不以RNA作为遗传物质的真核生物中,也同样存在RNA依赖型RNA聚合酶,如分别在拟南芥、水稻和烟草中发现了6个、5个和3个RNA依赖型RNA聚合酶基因。这类酶在植物中的作用被认为是催化形成双链RNA,参与包括转录后基因沉默和病毒诱导的基因沉默等。同样地,在动物和真菌中也发现了RNA依赖型聚合酶基因。如Pinzón等就对动物
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