高效液相色谱法-认识高效液相色谱法（仪器分析课件）

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一、高效液相色谱法的基本概念二、高效液相色谱法的基本原理三、高效液相色谱法的主要分离类型四、HPLC与GC的比较基本概念：在技术上采用了高效固定相、高压输液系统和高灵

敏度的在线检测器，是一种新型分离分析技术。特点：分离效率高、分析速度快、应用范围广、操作自动化。一、高效液相色谱法的基本概念基本原理：

混合组分的样品在色谱柱中，各组分由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用力的不同，随流动相在两相间进行反复多次分配过程，经过一定长度的色谱柱，彼此分离开来，最后按一定顺序流出。二、高效液相色谱法的基本原理三、高效液相色谱法的主要分离类型1.吸附色谱（液-固吸附色谱）

以固体吸附剂为固定相，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5～10μm的硅胶吸附剂。流动相可以是各种不同极性的一元或多元溶剂。2.分配色谱（液-液分配色谱）

早期通过在担体上涂渍一薄层固定液制备固定相，现多为化学键合固定相，即用化学反应的方法通过化学键将固定液结合在担体表面。3.离子交换色谱

固定相为离子交换树脂，流动相为无机酸或无机碱的水溶液。各种离子根据它们与树脂上的交换基团的交换能力的不同而得到分离。4.凝胶色谱（空间排阻色谱）

以凝胶为固定相。凝胶是一种经过交联的、具有立体网状结构和不同孔径的多聚体的通称。如葡聚糖凝胶、琼脂糖等软质凝胶；多孔硅胶、聚苯乙烯凝胶等硬质凝胶。三、高效液相色谱法的主要分离类型四、HPLC与GC的比较1）应用范围不同

液相色谱非常适合分子量较大、难气化等物质的分离分析。2）液相色谱能完成难度较高的分离工作

①可选用不同比例的两种或两种以上的液体作流动相，增大分离

的选择性。②

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