植物酵素对实验性便秘小鼠的作用

植物酵素对实验性便秘小鼠的作用

随着现代人生活节奏的加快和饮食结构的变化，通过添加纤维和其他食物来促进肠道蠕动，而蛋白质食物摄入过多。此外，由于锻炼和生活压力的影响，便秘一直是人类问题之一。发病率呈逐渐升高趋势，严重影响了人们的生活质量和生活安全。便秘是临床上常见的慢性消化道疾病,通常以排便间隔延长,大便干结、艰涩不畅为主要症状,严重者可导致电解质和酸碱平衡紊乱,引起痔疮、下肢静脉曲张等疾病。便秘多由饮食、排便习惯不良、肠道蠕动减退、应激性减退而逐渐形成,一般可以采取增加摄入膳食纤维、食用具有润肠通便作用的功能食品等方法来舒解。植物酵素采用日本传统的发酵工艺,从50余种蔬菜、水果、海藻等植物中提取酵素精华和丰富的营养物质,是一种天然的、无任何添加剂的保健饮品。它含有多种功效成分,如低聚糖、黄酮、皂苷等,对治疗便秘、调节机体免疫力等有一定的效果。本实验以小鼠为研究对象,依照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)的规定,采用小肠运动实验和排便实验,研究植物酵素对小鼠通便功能的影响及其作用机理,以提高亚健康人群的生活质量和健康水平。1材料和方法1.1地芬诺酯片、空间植物酵素由吉林敖东大高酵素有限公司提供,批号110801;复方地芬诺酯片由长春长虹制药有限公司生产,批号20110701;阿拉伯树胶粉,购于天津市光复精细化工研究所,生产批号20101125;活性炭,购于天津市华东试剂厂,生产批号20100603。1.2试验动物昆明种小鼠,雄性,体重18-22g,购自吉林大学实验动物中心,合格证号:SCXK-2008-005。饲料来源同上。1.3药物和试剂1.3.1活性碳溶液配制准确称取阿拉伯树胶100g,加水800mL,煮沸至溶液透明,称取活性碳(粉状)50g加至上述溶液中煮沸三次,待溶液冷却后加水定容至1000mL,4℃冰箱保存,用前摇匀。1.3.2混悬液的配制复方地酚诺酯片,每片含复方地酚诺酯2.5mg,取复方地酚诺酯片25mg或50mg(10片或20片),用研钵研碎呈粉末后加水至100mL,临用前配制成浓度为0.025%或0.05%的混悬液。1.4测试方法1.4.1大高酵素剂量的确定小鼠按体重,随机分为模型对照组、空白对照组、低、中、高剂量组,每组10只。其中低、中、高三个剂量组经口灌胃给予大高酵素剂量分别为(36mL、54mL、72mL/(kg·BW))(约相当于人体推荐口服剂量(60mL/人·d)30倍、50倍、70倍),模型对照组和空白对照组给予蒸馏水的剂量为40mL/(kg·BW)。每天分两次给予,连续灌胃15d后,观察小鼠的小肠推进试验和排便试验。1.4.2测试基础依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中通便功能检验方法。1.4.3墨汁推进率测定各组动物连续灌胃给予受试物15d,实验前各组小鼠禁食16h,模型对照组和三个剂量组灌胃给予5mg/(kg·BW)复方地酚诺酯溶液20mL/(kg·BW),空白对照组给予等量蒸馏水,30min后,剂量组一次给予含相应受试物(1∶1混合)的墨汁10mL/(kg·BW),模型对照组和空白对照组给予等量墨汁。25min后颈椎脱臼处死动物,立即打开腹腔分离肠系膜,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,不加牵引拉成直线,进行测量。肠管长度为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下列公式计算墨汁推进率。墨汁推进率(P)=(墨汁推进长度/小肠总长度)×100%1.4.4模型分组与给药各组动物连续灌胃给予受试物15d,实验前各组小鼠禁食16h,模型对照组和三个剂量组灌胃给予10mg/(kg·BW)复方地酚诺酯溶液20mL/(kg·BW),空白对照组给予等量蒸馏水,30min后,剂量组一次给予含相应受试物的墨汁(1∶1混合)10mL/(kg·BW),模型对照组和空白对照组给予等量墨汁,同时开始计时。每只动物均单独饲养,并供给饲料和饮水,观察记录每只动物首次排黑便所需时间、6h内排黑便粒数及重量。1.5统计学学处理试验数据用方差分析进行统计处理。各组数据用x軃±s表示,P<0.05为差异显著,有统计学意义。在小鼠便秘模型成立前提下,6h排便粒数和排便重量任一项结果阳性,同时小肠运动试验和排便时间任一项结果阳性,可判定该受试物具有润肠通便功能。2结果与分析2.1小鼠墨汁推进率由表1可见:模型对照组小鼠经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯,建立小鼠便秘模型,该模型组小鼠的墨汁推进率显著低于阴性对照组,表示便秘模型成立。各剂量组小鼠的墨汁推进率均高于模型对照组,经统计学分析各剂量组与便秘模型对照组的差异有极显著意义(P<0.01),表明该样品具有促进小肠运动的作用。与模型对照组比较,高剂量组墨汁推进率的显著性低于中、低剂量组,可能由于高剂量组小鼠灌胃体积较大,影响小鼠的肠胃运动,使受试物在小鼠体内不能被有效利用,因此其对小肠的推进作用显著性低于中、低剂量组。2.2单粒排黑便实验结果由表2可见:模型对照组小鼠排首粒黑便时间、粪便粒数显著低于空白对照组(P<0.01),粪便重量低于阴性对照组(P<0.05),表明该便秘模型成立。低剂量组与模型对照组相比,首粒排黑便时间明显缩短(P<0.05),粪便粒数显著增多(P<0.01),粪便重量明显增加(P<0.05),表明该样品在给予低剂量时就能明显缩短首粒排黑便时间,并增加粪便粒数及粪便重量,具有促排便的作用。高剂量组与模型对照组比较,首粒排黑便时间延长,可能由于高剂量组给予小鼠的灌胃剂量太大,超出小鼠适宜量,造成小鼠有饱腹感,胃肠道蠕动减弱,食物代谢时间延长,所以首粒排黑便时间延长,收集的粪便粒数减少,粪便重量也相应减轻。中、高剂量组与模型对照组比较,首粒排黑便时间、粪便粒数及粪便重量略高于模型对照组,但差异不显著(P>0.05),可能由于中、高剂量组小鼠的灌胃剂量略超出小鼠的适宜灌胃量,对小鼠胃肠道的消化、吸收及蠕动有一定的影响所致。2.3l/剂量d雄性昆明种小鼠经口灌胃分别给予植物酵素(36mL、54mL、72mL/(kg·BW))(相当于人体推荐口服剂量(60mL/人·d)30倍、50倍、70倍),15d后,能够明显促进小鼠小肠推进运动,缩短首粒排黑便的时间,增加粪便的粒数及粪便的重量。综上所述,植物酵素具有润肠通便的功能。3润肠通气功效成分便秘是一种常见的胃肠功能失调引起的慢性疾病,研究认为增加饮食中的膳食纤维或是促进肠道蠕动的营养物质可以减轻便秘症状。植物酵素是经由水果、蔬菜、藻类等自然发酵成熟的一种天然保健食品,富含维生素、氨基酸、有机酸、低聚糖等多种功效成分,具有改善肠内微生物平衡、润肠通便、提高机体免疫力等功效。其发挥润肠通便功效作用的主要成分为低聚糖、有机酸及植物性膳食纤维。低聚糖进入人体内,能在肠道发酵产生短链脂肪酸(SCFA),使肠道自发性蠕动增加,刺激排便。膳食纤维可以促进肠道蠕动,缩短肠内物质通过肠道的