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中华绒螯蟹对不同饲料原料的消化率
由于饲料蛋白的缺乏,这是世界上饲料行业面临的严重挑战之一,也是中国水产饲料行业的不断发展。其中被大家公认的优质蛋白源鱼粉,近几年来因受厄尔尼诺等不良气候因素的影响,加上海洋环境污染和渔业资源的过渡捕捞,使得鱼粉的产量大幅度下降,价格日渐上涨。相比之下,我国农副产品品种多样,植物性蛋白源来源广泛。因此,开发、合理利用植物性等其他水产动物饲料蛋白源,不仅符合我国国情,而且是摆脱当前水产养殖业的困境,降低成本,提高效益的重要课题。中华绒螯蟹是我国的重要水产珍品,随着养殖规模的不断扩大和产量的不断提高,迫切需要研制、开发出中华绒螯蟹的系列专用饲料,以适应养蟹产业的发展需求。在对饲料蛋白源的利用和替代研究方面,陈立侨等以不同比例豆饼、鱼粉为主要蛋白源制成配合饲料饲喂蟹种40d,结果表明,用30%豆饼替代配合饲料不会影响蟹的生长速度。徐新章和何珍秀测定了幼蟹对饲料酵母、豆饼粉、花生饼粉、菜籽饼粉和玉米粉中的氨基酸表观消化吸收率,认为除玉米粉外,其它4种均可作为幼蟹配饵的原料,其所含的必需氨基酸基本上可满足幼蟹的需求。钱国英测定了中华绒螯蟹对鱼粉、豆粕、麦麸和啤酒酵母粉等7种常用饲料中蛋白质和氨基酸的表观消化率,发现蟹对动物性原料的消化率要高于植物性原料。目前,有关中华绒螯蟹饲料蛋白源开发利用的基础研究还颇为缺乏,从而制约了蟹环保型全价饲料的研制和推广应用。本试验测定了中华绒螯蟹对11种饲料原料蛋白质和氨基酸的表观消化率,所选的蛋白质原料涵盖了生产中主要的动物性蛋白源、植物性蛋白源和单细胞蛋白源等原料。通过评价中华绒螯蟹对不同饲料蛋白源的消化利用率,以期为开发适用于中华绒螯蟹的人工配合饲料提供依据,同时也可补充、丰富水生动物可消化氨基酸的基础资料。1材料和方法1.1蟹的养殖管理试验用蟹购自上海铜川路水产市场,选择个体健康,反应灵敏,大小接近的一秋龄蟹,规格为(97.34±7.36)g。蟹的饲养和管理参考李二超等的方法。将试验用蟹随机分成12组,分别置于36只水族箱中,箱体规格为45cm×56cm×45cm,水深15~20cm,每箱内放入6只蟹,每种饲料设立3个平行箱。每箱放置数片拱形瓦片供蟹栖息藏匿。试验用经水泥储水池充分曝气后的自来水,pH7.2~7.8,溶解氧>7.2mg·L-1。连续充气增氧,每天上午投喂前排污一次,换水约1/3。暂养适应期7d,全期30d,直至收集到足量的粪样。试验期间水温18~22℃。1.2饲料原料组成基础饲料由鱼粉、豆粕、麦麸、鱼油、卵磷脂、胆固醇、复维、复矿、粘合剂等组成。基础饲料的配方见表1。试验饲料原料为市售商品饲料原料,包括鱼粉、血粉、肉骨粉、乌贼内脏粉、虾壳粉、豆粕、棉籽粕、菜籽粕、花生粕、玉米蛋白粉、啤酒酵母共11种蛋白质饲料原料。试验饲料分别由基础饲料和各饲料原料组成,前者占69.99%,后者占30%。饲料原料的常规化学组成见表2。饲料原料用锤片式粉碎机粉碎,过80目筛,均匀混合,然后按逐级放大的原则加入0.01%的Y2O3指示剂和其他成分,充分混合均匀后用制粒机制成2mm×6mm的颗粒饲料,室温风干至恒重,密封冷藏备用。1.3日投喂量每天投喂2次,时间分别为上午8:00,下午16:00。每日投喂量约为蟹体重的3%。投喂1h后回收残余饲料,再过1h用虹吸方法将粪便收集到培养皿内,70℃烘干后低温保存,连续收集约30d,直至收集到足够的样品用于分析。1.4基础饲料和活性成分的表观消化率饲料和粪便烘干后,测定其中相应的营养成分和Y2O3含量。Y2O3含量用Perlin-Elmer公司的Plasma2000型电感耦合等离子体发射光谱仪测定,蛋白质用半微量凯氏定氮法测定,氨基酸用PharmaciaBiotech公司的Biochrom20型氨基酸自动分析仪测定。基础饲料和试验饲料干物质的表观消化率计算公式如下;表观消化率(%)=100×[1-饲料中Y2O3%/粪便中Y2O3%]基础饲料和试验饲料氨基酸的表观消化率计算公式如下;氨基酸表观消化率(%)=100×[1-(饲料中Y2O3%×粪便中氨基酸分%)/(粪便中Y2O3%×饲料中氨基酸%]饲料原料氨基酸的表观消化率计算公式如下:饲料原料营养组分表观消化率(%)=(试验饲料氨基酸的表观消化率-0.7×基础饲料氨基酸的表观消化率)/0.3所有实验数据均以平均值±标准差(Mean±SE)表示,用SPSS13.0分析软件经单因素方差分析(ANOVA)后,若存在显著的差异,则采用Duncan法进行多重比较。显著性差异的水平为0.05。2不同原料氨基酸的表观消化率中华绒螯蟹对不同原料蛋白质的表观消化率的测定结果如表2所示。中华绒螯蟹对鱼粉和血粉粗蛋白的表观消化率分别为86.07%和89.75%,显著高于其他组(P<0.05);菜籽粕和玉米蛋白粉粗蛋白的表观消化率最低,分别为42.41%和40.62%,明显低于其他组(P<0.05)。不同饲料原料的粗蛋白表观消化率高低顺序为:血粉>鱼粉>豆粕>啤酒酵母>虾壳粉>肉骨粉>棉籽粕>花生粕>乌贼内脏粉>菜籽粕>玉米蛋白粉(表3)。从表2中还可以看出,动物性饲料原料粗蛋白的表观消化率变幅为:63.51%~89.75%,而植物性饲料粗蛋白的表观消化率介于40.62%~77.94%之间。除了乌贼内脏粉和豆粕外,动物性原料粗蛋白的表观消化率均高于植物性原料。在动物性蛋白源中,乌贼内脏粉粗蛋白的消化率最低,为63.51%。豆粕、啤酒酵母的蛋白质表观消化率分别为77.94%和76.90%,虾壳粉和肉骨粉的蛋白质消化率则分别为74.02%和73.78%,上述四种原料的消化率颇为接近。从中华绒螯蟹对不同原料氨基酸表观消化率的测定、分析结果来看(表4),虽然对不同饲料原料氨基酸的表观消化率有较大的差异,但主要变化趋势与对蛋白质表观消化率的变化基本一致。其中,鱼粉和血粉总氨基酸的表观消化率分别为90.23%和94.71%,显著高于其他组(P<0.05),而菜籽粕和玉米蛋白粉氨基酸的表观消化率最低,仅为65.68%和67.30%。在动物蛋白源中,除乌贼内脏粉以外,总氨基酸消化率都为80%以上,血粉和鱼粉组的氨基酸消化率较高,总氨基酸消化率>90%,其次是虾壳粉(87.73%),肉骨粉和乌贼内脏粉的氨基酸消化率较低,分别为81.57%和77.13%;单细胞蛋白源啤酒酵母的总氨基酸消化率高于植物蛋白源;在植物蛋白源中,对棉籽粕的氨基酸消化率最高,在85%以上,其次是豆粕,消化率在80%左右。中华绒螯蟹对血粉中氨基酸消化吸收率最低的是异亮氨酸和精氨酸;对肉骨粉和乌贼内脏粉、豆粕和花生粕中氨基酸吸收率最低的为蛋氨酸;对啤酒酵母中氨基酸吸收率最低的为颉氨酸,吸收率最高的是苯丙氨酸;对棉籽粕中氨基酸吸收率最低的是颉氨酸和组氨酸,吸收率较高的是精氨酸。3蛋白源和氨基酸试验采用氧化钇来作为消化率测定的外源性惰性指示剂。常用的惰性指示剂有氧化铬和氧化钇等,有报道认为氧化铬作为指示剂会影响肠菌群和排泄物的脂肪酸组成,Austreng等分别用包括氧化铬和氧化钇在内的几种三价金属惰性指示剂测定了鲑鱼的表观消化率,证实了氧化钇在表观消化率测定中的适用性,氧化钇的使用已经变成了目前水产动物消化率测定的标准方法。与此同时,试验的饲料配方采用了“70%基础饲料+30%试验饲料原料”的方法,既保证了饲料营养成分的均衡性,除了能充分供给中华绒螯蟹正常生长所需要的各种营养组分外,还保证了消化率测定的客观、准确性。试验结果表明,中华绒螯蟹对鱼粉和血粉粗蛋白和氨基酸的表观消化率显著高于其他组;菜籽粕和玉米蛋白粉粗蛋白和氨基酸的表观消化率最低。除了少数饲料原料如乌贼内脏粉和豆粕外,中华绒螯蟹对动物性饲料蛋白源粗蛋白的表观消化率大于植物性饲料蛋白源粗蛋白的表观消化率。这一结果与钱国英的结果相吻合。Opstvedt和Lee在对大西洋鲑和岩鱼的研究中也得到了同样的结果。菜籽粕是我国主要油料作物油菜榨油后的副产品,粗蛋白含量为35%~40%,富含精、蛋氨酸,各种氨基酸的含量较为平衡,然而菜籽粕中存在的抗营养因子如芥子油苷等限制了其在水产动物中的添加量。许国焕等报道菜籽饼作为鲂饲料消化率较低,建议在配制鲂饲料时尽可能避免选用。Burel等认为大菱鲆饲料中菜籽粕可以部分替代鱼粉,但添加量超过30%时鱼的生长将受到抑制。荣长宽等认为在对虾饲料里菜籽饼的添加量不宜超过10%,否则会影响对虾的正常生长。基于本研究结果,若采用菜籽粕作为中华绒螯蟹的饲料原料,则使用前应适当进行脱毒处理以尽可能去除抗营养因子。雷武等报道长吻鱼危对玉米蛋白粉的消化率较低,并认为是玉米蛋白粉的限制性氨基酸赖氨酸和蛋氨酸的比例与长吻鱼危肌肉中赖氨酸和蛋氨酸比例差别较大之故。另有研究表明饲料中玉米蛋白粉替代鱼粉的比例超过20%时,大菱鲆和黄条的蛋白质、必需氨基酸和能量的消化吸收率将显著降低,主要原因是玉米蛋白粉缺乏赖氨酸所致。从本试验的结果来看,玉米蛋白粉制成的饲料粘性欠佳,容易溶失也可能是玉米蛋白粉组消化利用率较低的原因之一。同时,建议将富含赖氨酸但精氨酸和蛋氨酸欠佳的豆粕与菜籽粕、玉米蛋白粉配合使用,以期达到氨基酸互补平衡的目的。本试验中中华绒螯蟹对血粉的蛋白质和氨基酸的消化率均最高,超过鱼粉,这与黑鲷对血粉和鱼粉的干物质和蛋白质消化率结果非常接近。一般血粉的蛋白质含量在75%以上,蛋白质中氨基酸组成较为理想,比例较为平衡,赖氨酸、色氨酸和苏氨酸等必需氨基酸的含量较高,是比较理想的饲料蛋白源。在动物性蛋白源中,乌贼内脏粉粗蛋白含量高于虾壳粉和肉骨粉,但试验结果表明乌贼内脏粉粗蛋白和氨基酸的消化率最低。乌
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