层析分离技术-吸附层析法提取分离葛根素（生物分离技术课件）

任务5.1吸附层析法提取分离葛根素学习目标了解层析技术的发展历史；掌握层的基本理论。重难点重点：了解吸附层析的原理；难点：了解色谱图。概述1层析的基本理论2目录吸附层析的原理3一.概述层析技术早在1903年就应用于植物色素的分离提取，各种颜色的色素从上到下在吸附柱上排列成色谱，也称色谱分离法。1931年有人用氧化铝柱分离了胡萝卜素的两种同分异构体，显示了这一分离技术的高度分辨力，从此引起了人们的广泛注意。随着人们认识和实践的提高以及物理化学技术的发展，应用范围更加广泛，没有颜色的物质同样可用此法分离，这时的工作全是使用吸附剂的吸附层析法。自1944年应用滤纸作为固定支持物的纸层析诞生以来，层析技术的发展越来越快。20世纪50年代开始，相继出现了气相层析和高压液相层析，其他如薄层层析、薄膜层析、亲和层析、凝胶层析等也迅速发展。在生物化学领域里，层析技术已成为一项常用的分离分析方法。一.概述石油醚碳酸钙颗粒色素色谱组分一.概述1941年马丁和辛格建立的“塔板理论”模型将色谱柱看作一个分馏塔，设想其中均匀分布许多塔板，并认为在每个塔板的间隔空间内，组分在两相中立即达到分配平衡，经过多次的分配平衡后，分配系数小的组分先流出色谱柱，并得到描述色谱流出曲线的表达式。同时塔板理论还引入理论塔板数(platentlIllberoftheoretit·alplates)和理论塔板高度(plateheight)作为衡量色谱柱效的指标。一.概述一.概述输液泵进样器色谱柱柱温箱检测器单一或混合溶剂一.概述两相所处状态操作形式分离机理一.概述常用层析技术吸附层析分配层析凝胶层析亲和层析二.层析的基本理论1.平衡系数平衡分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数（或称交换系数），凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。二.层析的基本理论2.层析基本过程二.层析的基本理论2.层析基本过程吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器手动进样器检测器二.层析的基本理论二.层析的基本理论物理吸附化学吸附交换吸附任务5.1吸附层析法提取分离葛根素学习目标了解层析技术的发展历史；掌握层的基本理论。重难点重点：了解吸附层析的原理；难点：了解色谱图。吸附薄层层析法1吸附法提取分离葛根素2目录一.吸附薄层层析法薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。一.吸附薄层层析法一.吸附薄层层析法优点简单时间短高效容量高限制小显色剂一.吸附薄层层析法1、原理利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。一.吸附薄层层析法2、吸附剂和展开剂的选择吸附剂氧化铝硅胶聚酰胺极性溶剂一.吸附薄层层析法3、基本操作薄层板市售制备预处理过程有机溶剂点样制备市售展开装置显迹物理化学（喷雾）Rf值公式二.吸附法提取分离葛根素吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。利用吸附剂对混合试样各组分的吸附力不同而使各组分分离。当采用溶剂洗脱时，发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程，吸附力