护士长竹杖提取物抑菌活性的比较研究

护士长竹杖提取物抑菌活性的比较研究

竹苔，又称竹参、竹菌和竹生动。它是一种大型真菌。在真菌学上，它属于担子菌亚门、腹菌、鬼笔、竹笔和康乃馨。竹荪营养丰富、味道鲜美、清甜鲜脆、风味独特,既是宴席中的名贵山珍,也是驰名中外的贵重药材,素有“山珍之王”、“菌中皇后”的美称。另外,竹荪还具有特异的防腐功能,在炎热的夏季作菜煲汤时,置少许竹荪入内,可防止酸败,即可延长存放时间。鉴于竹荪对食物的特殊防腐效果,笔者就此进行了从竹荪中提取天然防腐剂的研究,优化了提取工艺条件,并对其抑菌功效进行初步探讨。本试验中分别对长裙竹荪的乙醇提取物和水提取物的抑菌作用进行研究与功能比较,为今后进一步提取并生产纯天然生物防腐剂提供参考。1材料和方法1.1材料表面1.1.1原材料竹荪干子实体粉,即市售长裙竹荪干品,粉碎后过80目筛;食用乙醇(浓度为95%)。1.1.2试验中的细菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、啤酒酵母、黑曲霉:均由天津市工业微生物研究所菌种保藏中心提供。1.1.3培养基细菌完全培养基;营养肉汁琼脂培养基;麦汁琼脂-1培养基;查氏琼脂培养基。1.2方法1.2.1长竹执行醇提物的制备醇提物:取长裙竹荪干子实体粉末10g,按照料液比1∶10加入食用乙醇,混匀后置于水浴中80℃回流抽提2h,过滤,所得滤渣再加入70mL食用乙醇,按原条件进行2次提取,时间为1h,固液分离后弃掉滤渣,合并2次滤液,减压浓缩至恒重,即得长裙竹荪醇提物,保存备用。水提物:取未粉碎的长裙竹荪干品10g,按照料液比1∶20加入纯水,煎煮2次,第1次为2h,第2次为1h,固液分离后合并2次滤液,减压浓缩至恒重,即得长裙竹荪水提物,保存备用。1.2.2无菌试验1.2.2.菌种培养和冷藏在无菌室中将供试菌种接入相对应的试管斜面培养基上,细菌置35℃~37℃恒温培养箱内培养18h~24h,霉菌、酵母菌培养44h~48h,之后置0℃~4℃冷藏备用。1.2.2.2.培养基支持块的制备配制好的各种菌株的培养基,高压蒸汽灭菌后,冷却至50℃~60℃,无菌操作倾注于干热灭菌的培养皿内,每皿15mL~20mL。1.2.2.菌落、酵母菌和比浊法计数用接种环挑取少许菌体于装有9mL无菌水的试管内,制成菌体悬浮液。霉菌、酵母菌用血球计数板计数,细菌用比浊法计数。调整菌体悬浮液的浓度至含孢子或菌体为106个/mL~107个/mL,向平板上加0.1mL菌体悬浮液,用三角刮铲涂布均匀。1.2.2.接种平板的制备用打孔器将定性滤纸打成直径6mm的小圆片,于培养皿中160℃干热灭菌1h~2h。将灭菌滤纸片浸入长裙竹荪提取液中,浸泡约40min。将浸好的滤纸片贴在1.2.2.3中制备好的接种平板上,培养皿背面划线等分为二,一边贴提取液滤纸片,一边贴空白对照滤纸片,每边3片。贴好滤纸片的平板置恒温培养箱中培养,细菌于35℃~37℃培养18h~24h,霉菌、酵母菌44h~48h,测量抑菌圈直径。2结果与分析2.1醇提物的抑菌效果醇提物抑菌效果,见表1。长裙竹荪乙醇提取物为棕黄色油状黏稠液体。由表1看出,此醇提物对各受试菌种有不同的抑制作用,其中对细菌显现出很明显的抑制作用,如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌,抑菌圈轮廓清晰,且直径较大;而该提取物对酵母菌和霉菌抑制作用不强。2.2克氏原螯虾提取物b水提物抑菌效果,见表2。长裙竹荪水提物呈现棕黄色,提取后静置一段时间,为果冻状胶质物质。由表2看出,此提取物对各供试菌种的抑制作用普遍低于醇提物。统计数据表明,长裙竹荪水提法的提取率会明显高于醇提法,但抑菌试验结果表明,此提取物抑菌作用不明显,其抑制细菌的作用略强于对真菌的抑制作用。3抑菌效果测定长裙竹荪菌体中含有大量蛋白质、氨基酸、粗脂肪、碳水化合物、微量元素等,提取溶剂不同,方法不同,提取物中所含的有效成分亦有所不同,通过抑菌试验显现出了不同的抑菌效果。乙醇提取物对各受试菌种均有不同的抑制作用,其中对以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌为代表的细菌有很明显的抑制作用,但对真菌的抑制作用不明显;而水提物对各受试菌种均未显现出抑制作用。值得提出的是,细菌培养基p