美因乳腺癌21基因产品介绍

美因健康科技（北京）有限公司美因产品部黄腾杰

2016年8月美因乳腺癌21基因检测——助力乳腺癌治疗与预后判断

|主要内容|21基因检测的由来21基因的权威性21基因简介21基因临床应用21基因表达量检测技术对比服务流程引言乳腺癌近20年采用以手术为中心，化疗、放疗、内分泌治疗为辅助的综合治疗模式，降低了乳腺癌的复发和死亡率。但是有相当一部分化疗获益甚少的低复发风险患者也不得不接受化疗，这导致了资源的浪费和对部分低危者的过度治疗。病人选择什么样的治疗，特别是早期乳腺癌时是否需要辅助化疗的疑问迫切地需要得到解决。21基因检测的由来250个候选基因2004年Paik等对NSABPB-14和B-20研究中的乳腺癌组织蜡块标本，应用RT—PCR技术进行基因筛选，参考：

已发表文献

基因数据库从pN0、ER+、经他莫昔芬治疗的患者中远处复发相关的21个基因（16个乳腺癌相关基因+5个参考基因）判断肿瘤特性，预测RS及化疗效益比21基因的权威性2005年，美国FDA批准的“乳腺癌21基因检测”作为唯一由美国多个权威医疗机构联合推荐的多基因检测服务，可精准判断化疗获益，成为评估手术后是否需要化疗的有效工具。2007年美国临床肿瘤学会（ASCO）公布乳腺癌治疗方案制定过程中应该考虑为雌激素受体呈阳性、淋巴结未扩散的早期乳腺癌患者进行乳腺癌21基因检测。在美国，乳腺癌21基因检测已迅速成为乳腺癌治疗标准程序，已有超过7500个医生使用多达65000次以上。截止目前，该检测在欧美多个国家开展已近10年，获益人群达15万。在中国，该技术也已开始应用，并由大型医院与专业检测机构联合开展检测，为我国乳腺癌治疗提供有力保障。21基因乳腺癌21基因通过检测肿瘤组织中21个基因的转录产物mRNA的相对表达量，通过表达量计算复发评分RS值（RecurenceScore）复发指数RecurrenceScore21基因21基因中包含一部分预后“有利”基因（雌激素受体ER组，GSTM1，BAG1）和一部分预后“不利”基因（增殖组、HER2组、侵袭组和CD68），前者高表达将导致RS值较低，后者高表达将导致RS值较高。临床意义21基因同时检测多种肿瘤基因的表达产物，较全面的反应肿瘤生物学特性预测个体化的乳腺癌复发指数以及接受化疗的效益比，预测早期乳腺癌患者的化疗获益，辅助制定乳腺癌治疗方案，避免过度治疗；预测早期乳腺癌复发风险，辅助制定乳腺癌患者管理计划，降低复发风险增殖组Ki67,STK15,Survivin,CCNB1,MYBL2。其表达水平可反映肿瘤细胞增殖活性。其高表达反映了肿瘤的增殖性强，恶性程度高，与肿瘤的发展、转移、预后高度相关。其表达率越高，对化疗的敏感性也越高。侵袭组MMP11,CTSL2参与了肿瘤细胞的侵润及转移的过程，与肿瘤的发生发展密切相关，在多种肿瘤中过度表达。在乳腺良性肿瘤组织中一般无显著表达或不表达，而在乳腺侵润癌则均可检测到，临床上如在乳腺原位癌检测到其表达，则提示发展成侵润性癌的可能。HER2组GRB7,HER2HER2人表皮生长因子受体-2相关基因GRB7,ERBB2过表达提示乳腺癌复发、转移的风险增高，手术后一般要给予辅助化疗，在此基础上联合曲妥珠单抗等抗HER-2药物治疗则可以进一步提高疗效。HER2高表达的乳腺癌患者往往表现出生存率低，肿瘤恶性程度增强，易于发生淋巴结转移，且对于一些化疗，内分泌治疗的敏感性降低。雌激素组ESR1,PGR,BCL2,SCUBE2是4个雌激素受体相关基因，在乳腺组织的发育过程起着非常重要的作用，但也可推动乳腺癌病理过程的演变。一般来说，ER相关基因表达量高的肿瘤分化较好，增生分数较低，且发生内脏转移的概率较低，对内分泌治疗敏感；而ER相关基因表达量低的乳腺癌通常分化较差，增生分数较高，容易发生内脏及脑转移，对内分泌治疗并不敏感。其他GSTM1,CD68,BAG1GSTM1基因存在着无效多态性，人群中有50%缺乏这种酶，缺失会增加绝经前妇女罹患乳腺癌的风险。CD68是巨噬细胞分化抗原，是巨噬细胞最可靠的标记物。肿瘤相关巨噬细胞可以分泌多种因子，促进肿瘤血管和淋巴管的形成，刺激肿瘤细胞增殖。BAG1在乳腺癌、非小细胞性肺癌等多种癌症中均有阳性表达，可以抑制凋亡，促进细胞生长繁殖。研究表明，BAG1在乳腺癌中的表达明显高于乳腺正常组织，BAG1水平越高生存时间延长。参考基因ACTB,GAPDH,RPLPO,GUS,TFRC是为维持细胞生命活动所需而时刻都在表达的基因，高度保守并且在大多数情况下持续表达。稳定表达于不同类型的细胞和组织（如正常细胞和癌细胞），而且其表达量是近似的，无显著性差别。不受任何内源性和外源性因素的影响。在检测基因的表达水平变化时常用来做参照物。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。结果判读010203检测结果为RS（复发指数）评分，分值在0~100分之间。RS＜18，为低复发风险组，化疗获益甚微，可只考虑内分泌治疗；18≤RS≤30，为中复发风险组，可考虑根据临床其他指标确定是否需要额外化疗；RS＞30，为高复发风险组，化疗获益较大，可考虑临床进行相应治疗。辅助制定乳腺癌患者的管理计划临床应用

1234预测乳腺癌患者接受化疗的获益情况预测乳腺癌患者远端复发风险辅助制定乳腺癌的治疗方案!以往是根据临床和病理标准决定激素受体阳性淋巴结阴性乳腺癌患者是否需要辅助治疗。而乳腺癌21基因复发指数（RS）系统对乳腺癌患者治疗方案的选择提供了客观的依据。对于高RS评分的乳腺癌患者，激素治疗辅加化疗比仅用激素治疗的预后要好；对于低RS评分的患者，激素治疗辅加化疗无明显获益。预测乳腺癌患者接受化疗的获益情况临床上传统的乳腺癌预后预测方法是基于患者年龄、肿瘤大小、淋巴结浸润及组织学分级等临床病理特征来进行个体复发风险的评估。远端复发与乳腺癌21基因RS评分、年龄以及肿块大小有关，而RS评分则不依赖于年龄和肿瘤大小，对远端复发有较好的预测能力。预测乳腺癌患者远端复发风险乳腺癌21基因检测能够提供更精确的资料让医生和患者更进一步了解肿瘤状况，依据个人的肿瘤基因表现判断是否需要接受化疗，有助于医生做出更精确的治疗判断。乳腺癌21基因检测辅助制定治疗方案：复发指数RS＜18，为低复发风险组，化疗获益甚微，可考虑内分泌治疗；复发指数介于18到30之间的，为中复发风险组，可考虑根据临床其他指标确定是否需要额外化疗；复发指数RS＞30，为高复发风险组，化疗获益较大，可考虑临床进行相应治疗。辅助制定乳腺癌的治疗方案乳腺癌21基因检测的结果通过预测复发风险的高低，可以进一步地协助拟定个体化的癌症康复管理计划。假设某患者的检测结果为高复发指数，意味着该患者再度复发且转移的概率较高，因此在手术后不仅仅需要接受化疗和激素治疗，更需要提供癌症治疗管理等级，例如定期做相关的检查、接受专业营养师的饮食建议等，从而降低自己的复发风险，或者早期发现复发的肿瘤，提高癌症治愈率。辅助制定乳腺癌患者管理计划21基因检测临床适用人群2008年美国国家癌症联合中心系统（NCCN）在乳腺癌治疗指南中，建议使用乳腺癌21基因检测，对于雌激素受体阳性，HER2阴性（ER+/HER2-）、淋巴结阴性患者的辅助化疗方案的选择需要结合21基因检测来判断。2013年NCCN将21基因检测的适用范围修订为，ER+/HER2-、pN0或pN1mi（腋窝淋巴结转移≤2mm），临床分期pT1、pT2或pT3，肿瘤组织＞0.5cm的浸润性乳腺癌患者。辅助制定乳腺癌的治疗方案2015年版NCCN指南已将1-3个淋巴结阳性乳腺癌患者纳入21基因评分检测范围内。BreastCancerGuidelines临床路径检测时间美因康乳腺癌21基因检测应在患者接受手术（乳房肿瘤切除手术或乳房切除手术）之后，并在患者和医生作出下一步治疗决定之前进行。利用原来手术（乳房肿瘤切除手术、乳房切除手术或核心穿刺活组织检查）过程中取出的组织进行检测即可。样本类型样本类型送样量保存方式运输方式新鲜肿瘤组织50mg（约1个绿豆粒大小）组织保存液常温运输石蜡病理切片5~8μm切片，大于6片-常温运输石蜡包埋组织大于50mg（至少1个绿豆粒大小）-常温运输检测方法及周期方法：二代测序周期：10个工作日21基因表达检测技术对比

检测技术公司优点缺点RT-qPCRGenomicHealth达安仪器通用实验周期短（2天）RNA

length＞100bp

样本需求量大操作复杂，容易出错LuminexxTAG益善实验周期短（3天）基因扩展性差RT-MLPAseq美因健康RNA

length＞60bp样本量需求小（低至1ngRNA）成本低技术创新，扩展性强，可以添加任何基因表达指标周期较长（10个工作日）扩展性强

一次检测可以添加多个基因

化疗疗效基因：TYMSRRM1TOP2APTEN与荧光定量结果对比样本所需样本量MLPA-RNAseq复发指数复发指数BC12张8μm卷片43.7BC22张8μm卷片2123BC32张8μm卷片5655BC42张8μm卷片5355Pearson相关系数1000ng200ng40ng8ng1ng1000ng

0.99724780.99339490.9968610.9955696200ng0.