临床常用免疫学检查课件

临床常用免疫学检查石亮临床常用免疫学检查概述：免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。

临床免疫学检查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗效监测。临床常用免疫学检查一、免疫球蛋白（Ig）的检测包括：IgG、A、M、D、E

Ig的产生、结构与功能

Ig通常是指一组具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，由浆细胞合成和分泌，有特异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合形成免疫复合物后才能启动效应功能。临床常用免疫学检查（一）IgG含量：7.0-16.6g/L,占70-80％(含量最多）特点：再次免疫应答抗体、具抗菌、抗病毒活性，能通过胎盘意义：感染（病毒、细菌）－多克隆↑免疫增殖病、MM－单克隆↑减低：免疫缺陷、重链病、轻链病、肾病临床常用免疫学检查（二）IgA含量：0.7-3.5g/L，占10-15％特点：分泌型（SIgA)，局部粘膜抗感染功能可存在于各种分泌物中（初乳）

血清型（为单体，免疫作用弱）意义：↑IgA型MM，SLE，类风关等↓反复呼吸道感染，非IgA免疫增殖病临床常用免疫学检查(三）IgM含量：0.5-2.6g/L,占5-10％特点：为五聚体，分子量最大的Ig

如天然凝集素抗A、抗B意义：早期抗体，出现早，消失快。

临床常用免疫学检查（四）IgD、IgEIgD:含量低、作用不很明确测定较难，ELISA法测定IgE：含量最少，ELISA法测定为0.1-0.9mg/L

与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关

临床常用免疫学检查二、补体（Complement，C）的测定补体是存在血清及组织液中的一组具有酶原活性的糖蛋白，可溶解细胞，灭活病原体，清除免疫复合物1.总补体活性CH50测定(complementhemolysis50%）

溶血素（抗体）致敏绵羊红细胞补体溶血溶血程度与补体正相关，为S形曲线。正常参考值：50-100kU/L

意义：减低常见于各种免疫复合物性疾病溶血程度与补体含量的关系临床常用免疫学检查2.补体C3与C4测定补体系统有C1、Ｃ2、……C9及其它成分组成C3含量最高，是传统和旁路途径激活的关键含量:C3:0.8-1.5g/LC4:0.2-0.6g/L

补体测定的意义：↑：炎症、肿瘤等↓：肾炎、自身免疫病等临床常用免疫学检查三、细胞免疫的测定T细胞亚群的检测

1.E玫瑰花结形成试验（ERFT)：检测T细胞数量原理：T细胞表面具SRBC受体正常58-72％左右意义：↑见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等↓见于免疫缺陷性疾病等。

2.淋巴细胞转化试验（LCT):检测T细胞的生物学功能原理：淋TPHA淋母细胞意义：转化率降低，见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。临床常用免疫学检查

淋巴细胞亚群的分化抗原测定

(clusterdifferentiationCD)

﹡T细胞：CD3-总T标志

CD4-TH标志(helpTcell)CD8-Ts标志(suppressorTcell)

CD4/CD8:TH/Ts，降低常见于AIDS。

﹡

B细胞：CD19、CD20、CD22等三、细胞免疫的测定临床常用免疫学检查

细胞因子(Cytokine,CK)测定－活化的免疫细胞分泌产生的免疫调节性小分子多肽。

1.白介素2（IL-2)和IL-2R：白细胞介素（IL）多种细胞产生的能介导免疫细胞间的相互作用。IL-2是由活化T细胞产生，具有多向性作用的细胞因子

2.肿瘤坏死因子（TNF)：引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用。

3.干扰素（IFN)：抗病毒、抗肿瘤作用三、细胞免疫的测定临床常用免疫学检查四、肿瘤标志物检测

肿瘤标志物（tumormarker)是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类和酶类肿瘤标志物。肿瘤标志物检测的意义是：高危人群的筛查、辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。临床常用免疫学检查

肿瘤标志物介绍以下6种甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）

前列腺特异抗原（PSA）糖链抗原199（

CA199）

癌抗原125（CA125）癌抗原15-3（CA15-3）

临床常用免疫学检查1.甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）－－AFP是胎儿发育早期合成的一种糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎儿出生后不久即逐渐消失。

[参考值]：血清<25μg/L

(一)、蛋白质类肿瘤标志物检测：临床常用免疫学检查AFP[临床意义]：①原发性肝癌：特异--原发性肝细胞癌显著增高

50%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始终不升高；②病毒性肝炎与肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300μg/L以下；③生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤，如睾丸癌、畸胎瘤等升高；④妊娠三个月后，血清AFP含量开始升高，分娩后三周恢复正常。若孕妇血清中AFP异常升高，应考虑有胎儿神经管缺损畸形的可能性。临床常用免疫学检查[参考值]：血清<5.0μg/L[临床意义]：①结肠癌、直肠癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，转移性恶性肿瘤也有不同程度的阳性率；在恶性肿瘤的随访，病情监测，疗效评价等方面有重要价值。②肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高；③吸烟者中有部分人CEA＞5μg/L。2.癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA）临床常用免疫学检查3.前列腺特异抗原（PSA）PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清中PSA以两种生化形式存在：一部分(20%)是以低分子量(33kD)的游离PSA（f-PSA）形式存在；大部分(80%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、

α2-巨球蛋白等结合的形式存在，称复合PSA(c-PSA)。总PSA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。

参考值：血清t-PSA<4.0μg/L，

f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>0.25临床常用免疫学检查PSA[临床意义]血清PSA升高①前列腺癌患者升高，但大约25%患者，其PSA水平正常；而大约有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。为增加PSA对前列腺癌检测的敏感性和特异性，可使用PSA年龄特异性参考范围，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等；②前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系统的疾病，也可见血清PSA水平升高，故当PSA在4.0μg/L～10.0μg/L的灰区时，须进行f-PSA和f-PSA/t-PSA比值的测定。【注意事项】在采集病人的血标本前进行直肠指诊、前列腺按摩，导尿等，将会导致血清PSA升高，应注意避免。临床常用免疫学检查(二)、糖脂类肿瘤标志物检测：（1）糖链抗原19-9(CA19-9)

（3）糖链抗原15-3(CA15-3)

（2）糖链抗原125(CA125)临床常用免疫学检查（1）糖链抗原19-9(CA19-9)CA19-9是一种与胰腺癌，胆囊癌，结肠癌和胃癌相关的肿瘤标志物，又称胃肠癌相关抗原。参考值：血清CA199<37kU/L①胰腺癌——首选指标，血清CA19-9水平明显升高，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA19-9浓度可达40万kU/L，是重要的辅助诊断指标；②胆囊癌、胆管壶腹癌、胃癌、结肠癌时，血清CA19-9水平明显升高。胆囊癌、胆管壶腹癌阳性率约为85%，胃癌、结肠癌阳性率约为40%；③急性胰腺炎，胆囊炎，胆汁淤积性胆管炎，肝硬化，肝炎等疾病，CA19-9也有不同程度的升高，注意与恶性肿瘤的鉴别。临床常用免疫学检查

（2）糖链抗原125(CA125)CA125是一种糖蛋白性肿瘤相关抗原，存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内，对诊断卵巢癌有较大临床价值。参考值：血清CA125<35kU/L①卵巢癌，阳性率可达50~90%。手术和化疗有效者CA125水平很快下降，若有复发，CA125升高可先于临床症状出现之前。②其他恶性肿瘤，如乳腺癌、胰腺癌、胃癌47%、肺癌、结肠直肠癌、其他妇科肿瘤等也有一定的阳性反应。③非恶性肿瘤，如子宫内膜异位症，盆腔炎，卵巢囊肿，胰腺炎，肝炎，肝硬化等疾病也有不同程度升高。④妊娠早期，CA125有升高。临床常用免疫学检查（3）糖链抗原15-3(CA15-3)

CA15-3是一种乳腺癌相关抗原，属糖蛋白，分子量超过400kD，对乳腺癌有重要的辅助诊断作用。参考值：血清CA15-3<25kU/L①乳腺癌，但在乳腺癌的早期阳性率较低约为30%，转移性乳腺癌阳性率可达80%；②其他恶性肿瘤，如肺癌，结肠癌，胰腺癌，卵巢癌，子宫颈癌，原发性肝癌等，也有不同程度的阳性率；③肝脏，胃肠道，肺，乳腺，卵巢等非恶性肿瘤疾病，阳性率一般低于10%。临床常用免疫学检查(三)、肿瘤标志物的选择选择特异性的肿瘤标志物或最佳组合动态检测临床常用免疫学检查常用肿瘤标志物联合检测的临床应用

肿瘤首选标志物补充标志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降钙素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降钙素、铁蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP结肠直肠癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睾丸肿瘤AFP、hCG宫颈癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌无TPA、CEA骨髓瘤β2-M、本周蛋白临床常用免疫学检查五、自身抗体检测--自身免疫病是指免疫系统对自身成分的免疫耐受性减低或破坏，产生自身抗体损伤含有相应自身抗原的组织器官而造成的疾病。临床常用免疫学检查

－－是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。主要为IgM型。

[临床意义]：类风湿性疾病时，RF↑，阳性率达70-90％;其他自身免疫性疾病，RF亦↑

（一）类风湿因子(rheumatoidfactor，RF)临床常用免疫学检查1.ANA(antinuclearantibody):指抗各种细胞核成分的自身抗体，是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核发生反应的自身抗体的总称。无器官和种属特异性

[临床意义]：SLE(未治疗的)，阳性率达80％一100％，亦可见于其他自身免疫性疾病。

（二）抗核抗体检测临床常用免疫学检查抗核抗体检测方法：

间接免疫荧光法（IIF）均质型核膜型颗粒型核点型抗着丝点型临床常用免疫学检查

ENA抗体谱－包括抗Sm、抗核糖体、抗ScL70、抗Jo－1、抗SSB、抗SSA和抗nRNP等的抗体。

[临床意义]

抗Sm抗体：SLE的特异性标志之一，抗dsDNA和抗Sm抗体同时检测，可提高SLE的诊断率。

抗SSA、SSB抗体－－干燥综合征抗nRNP抗体--混合性结缔组织病

2.可提取性核抗原（ENA）抗体谱的检测临床常用免疫学检查2.抗双链DNA（doublestranded-DNA,ds-DNA）抗体抗dsDNA抗体靶抗原是细胞核中DNA的双螺旋结构。抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗体。其抗体滴度与疾病的活动程度有相关性，抗体滴度的动态测定为监控治疗提供了有效的实验室手段。抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%～100%，但其敏感性仅为30%～50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。临床常用免疫学检查

抗dsDNA抗体SLE特异性抗体，与病情活动度相关。临床常用免疫学检查六、感染的免疫学检查（434）(一)、抗链球菌溶血素“O”抗体（ASO）测定

A群溶血性链球菌意义：风湿、风湿性关节炎、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎时↑

临床常用免疫学检查

是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。伤寒第三周后阳性率达80%，初期阴性[参考值]：H<1:160，O<1:80，副伤寒甲、乙、丙<1:80[临床意义]：①O、H均升高：伤寒②O不高、H升高：预防接种或回忆性反应③O升高、H不高：感染早期或交叉反应（二）、肥达氏反应临床常用免疫学检查七、病毒性肝炎检测（P452)

（一）甲型肝炎病毒标志物检测

（二）乙型肝炎病毒病毒标志物检测（三）丙型肝炎病毒标志物检测（四）丁型肝炎病毒标志物检测（五）戊型肝炎病毒标志物检测临床常用免疫学检查

（一）甲型肝炎病毒标志物检测

免疫学检测

特异性抗体检测

IgM抗体

IgG抗体

HAV抗原检测

病原学检测

病毒分离

RT-PCR临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查

（二）乙型肝炎病毒病毒标志物检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）乙肝病毒前S1抗原抗乙肝病毒前S1抗体乙肝病毒前S2抗原抗乙肝病毒前S2抗体乙型肝炎核心抗原（HBcAg）乙肝核心抗体-IgM乙肝核心抗体-IgG乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）乙型肝炎e抗原（HBeAg）乙型肝炎e抗体（抗-HBe）临床常用免疫学检查1.最常用的检测项目两对半测定方法：ELISA、放射免疫法（RIA）、发光免疫法

（二）乙型肝炎病毒病毒标志物检测临床常用免疫学检查2.乙肝DNA定量PCR检测：病毒复制的指标

（1）乙型肝炎的诊断:急性HBV感染的诊断提供直接证据（2）抗病毒治疗方法及疗效评价：拉米夫定(贺普丁）、干扰素治疗效果的主要指标。

（3）分泌物传染性判断（乳汁等）

（二）乙型肝炎病毒病毒标志物检测阴性：

〈最低检测灵敏度拷贝/ml（如:〈500拷贝/ml）阳性：具体数据拷贝/ml（如：5.0E+6拷贝/ml)参考值：〈最低检测灵敏度拷贝/ml结果的报告临床常用免疫学检查（三）丙型肝炎病毒感染分子生物学检测RT-PCR：有助于早期诊断免疫学检测

特异性抗体检测

抗HCV-IgM抗体抗HCV-IgG抗体

临床常用免疫学检查（四）丁型肝炎病毒感染（五）戊型肝炎病毒感染HDV为缺陷病毒，需有HBV的存在方能复制和传播实验室检查

病毒分离免疫学检查分子生物学检测临床常用免疫学检查ThankYouforYourAttention谢谢临床常用免疫学检查

两对半:HBsAg（表面抗原）：存在于Dane颗粒的表面的糖蛋白。判断HBV感染的指标之一

。抗-HBs（表面抗体）：是一种保护性抗体。是机体感染或接种乙肝疫苗的标志。HBeAg（e抗原）：其阳性是乙型肝炎的重要标志，病情活动性较强，传染性较大。抗-HBe（e抗体）：抗-HBe的出现意味着大部分HBV被消除，复制减少，传染性降低。抗-HBc（核心抗体）：阳性者代表正在感染或以往感染过乙肝病毒。临床常用免疫学检查HBcAg(核心抗原)：

是乙肝病毒存在的直接标志，与HBV复制呈正相关。存在于肝细胞内，血中检测不出。当肝细胞破坏,HBcAg释放出来,被酶水解成HBeAg,所以HBeAg提示肝细胞损伤.HBeAg阳性标志着较强的感染和传染性临床常用免疫学检查9种常见模式

1-----

过去和现在未感染过HBV。

2----+(1)既往感染未能测出抗-HBs；(2)恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；

3---++(1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期；(3)抗HBs出现前的窗口期

4-+---(1)注射过乙肝疫苗有免疫；(2)既往感染临床常用免疫学检查

5-+-++

急性HBV感染后康复。

6+---+(1)急性HBV感染；(2)慢性HBsAg携带者；(3)传染性弱。

7-+--+

既往感染，仍有免疫力。HBV感染，恢复期。

8+--++(1)急性HBV感染趋向恢复；(2)慢性HBsAg