紫外吸收光谱定量分析（光学分析课件）

《光谱分析及操作》紫外吸收光谱定量分析01紫外吸收光谱定量分析的基本知识一、紫外吸收光谱定量分析概述紫外吸收光谱定量分析的依据是朗伯-比尔定律（Lambert-Beer定律），即物质在一定波长处的吸光度与其浓度成正比。因此，只要选择一定适宜波长，测定溶液的吸光度就可以求出溶液的浓度和物质的含量。A=kbc二、紫外吸收光谱定量分析的基本原理如果在一个试样中只测定一种组分，且在选定的测量波长下，试样中其它组分对该组分不干扰，这种单组分的定量分析较简单。一般有标准对照法和标准曲线法两种。二、紫外吸收光谱定量分析的基本原理在相同条件下，平行测定试样溶液和某一浓度Cs（应与试液浓度接近）的标准溶液的吸光度Ax和As，则由Cs可计算试样溶液中被测物质的浓度Cx。1.标准对照法标准对照法因只使用单个标准，引起误差的偶然因素较多，故往往较不可靠。

二、紫外吸收光谱定量分析的基本原理这是实际分析工作中最常用的一种方法。配制一系列不同浓度的标准溶液，以不含被测组分的空白溶液作参比，测定标准系列溶液的吸光度，绘制吸光度－浓度曲线，称为标准曲线（或工作曲线）。在相同条件下测定试样溶液的吸光度，从标准曲线上找出与之对应的未知组分的浓度。2.标准曲线法作业一、填空题1.紫外吸收光谱定量分析的依据是

。因此，只要选择一定适宜的

，测定溶液的

就可以求出溶液的浓度和物质的含量。2.在紫外分光光度法中，工作曲线是_______和_______之间的关系曲线。当溶液符合比耳定律时，此关系曲线应为_______。3.紫外分光光度法单组分定量分析的方法有

和

。作业二、不定项选择题（将正确答案的序号填入括号内）1.符合朗伯-比耳定律的有色溶液稀释时，其最大吸收峰的波长位置（）。A、向短波方向移动B、向长波方向移动C、不移动，且吸光度值降低D、不移动，且吸光度值升高2.在用标准曲线法测定某物质含量时，用参比溶液调节A=0或T=100%，其目的是（）。A、使测量中c-T成线性关系B、使标准曲线通过坐标原点C、使测量符合比耳定律，不发生偏离D、使所测吸光度A值真正反映的是待测物的A值《光谱分析及操作》紫外吸收光谱定量分析02紫外分光光度计的维护和保养一、仪器的日常维护和保养在处理液体试样较多的时候，请在使用前和使用后检查试样室中是否有遗漏的溶液，如果有应立即擦拭干净，以防止溶液蒸发后腐蚀光学系统，造成仪器测量结果误差。1.试样室检查在仪器的底部有4块防尘滤网，一般情况下需要3个月清洗1次，但在环境比较恶劣，沙尘比较大的地区需要1个月清洗1次，滤网取下后，可以用清水直接冲洗干净，晾干后方可使用。2.防尘滤网的清洗仪器的外壳表面经过了喷漆工艺的处理，在使用过程中请不要将溶液遗洒在外壳上，否则会在外壳上留下斑痕，如果不小心将溶液遗洒在外壳上请立即用湿毛巾擦拭干净，杜绝使用有机溶液擦拭。3.仪器的表面清洁二、仪器常见故障排除请检查对比度调节旋钮——用平口螺丝刀调节仪器后面“CONTRAST”旋钮。1.打开电源屏幕不显示，或显示不清楚检查电源是否正常，是否出现电压不稳定的现象；检查电源线，看是否出现电源线插头接触不良的情况；检查仪器主机保险管是否熔断；如果是，请更换保险管。2.打开电源开关仪器不动作，屏幕不显示检查打印机型号是否正确，T6新世纪紫外可见分光光度计只支持惠普喷墨或激光并口打印机，以及热敏微型并口打印机；检查仪器与打印机连线是否松动；检查系统应用中UP和HP模式选择是否正确，UP选择要对应热敏微型并口打印机；HP选择要对应惠普喷墨或激光并口打印机。3.打印机不工作，打印出错二、仪器常见故障排除检查样品室内是否有阻挡物，阻碍样品池电机移动。4.仪器开机自检的过程中，屏幕显示“样品池电机ERR”出错主要检查样品池是否有挡光物或者比色皿。取出挡光物。每次使用完仪器后一定要取出比色皿，以免造成不必要的干扰，以及溶液对仪器内部精密光学部件的腐蚀；请检查电源电压是否过低，在200V以下，电源过低会导致灯光源启动不正常；确认钨灯、氘灯是否不亮，如果不亮请更换钨灯或者氘灯。5.仪器开机自检中，“光源电机”、“钨灯”、“氘灯”以及“波长检查”出错二、仪器常见故障排除确认仪器是否正常自检。打开仪器电源时如果立即按住“RETURN”键仪器就不进行初始化，不能正常使用，该功能只是仪器调试使用。在当前测量状态下，取出比色皿，样品池为空状态，按“ZERO”键，查看吸光度0.000Abs是否跳动，如果在±0.001之间跳动为正常，如果跳动太大请确认外部电源是否符合仪器要求电源条件，确认完成后关闭仪器电源重新自检，确认自检正常。如果样品池为空，在空气状态下按“ZERO”键，查看吸光度0.000Abs跳动正常。请检查是否存在以下问题：测量的样品是否挥发性太大，请使用比色皿盖子。如果是强挥发性气体，请敞开样品池去除干扰气体后再测量；确认是否正确使用空白溶液校零。应注意的是，用来校零的空白溶液的吸光度值不应该超过0.4Abs，如果超过请检查或更换空白溶液或参比溶液。6.样品测量不稳定二、仪器常见故障排除确认样品是否稳定，样品是否有光解等现象；请检查比色皿擦拭方法是否正确，应仔细擦拭、清洗比色皿。7.测量样品重复性差在系统应用中进行“暗电流校正”，校正完成后重新校正空白溶液，再测量。比色皿的配套性不好，请检查比色皿的配套性。8.测量样品吸光度不准确三、仪器常见问题处理T6新世纪紫外可见分光光度计是自动化仪器，不需要每次测量校正0%T，在自动化仪器中0%T校正叫做暗电流校正，一般情况下不需要校正。如果当仪器的使用环境发生改变（如：温度、工作电压、环境光线），才需要进行暗电流校正；在系统应用中选择“暗电流校正”，确认即可。1.如何校正0%T在使用T6新世纪紫外可见分光光度计的时候不需要手动转换钨灯和氘灯。使用中只需要设置换灯波长就可以了，仪器自动转换钨灯氘灯。2.如何转换钨灯氘灯三、仪器常见问题处理出现这个情况主要由于电源情况不好，导致仪器暗电流升高，在系统应用中进行暗电流校正即可消除此现象；另外，仪器长时间在潮湿环境存放或使用导致光学镜面受潮也会引起杂散光偏高。因此，仪器最好每周开机一次，避免长时间存放而造成的某些故障。3.为什么测量杂散光不合格T6新世纪紫外可见分光光度计为了测试结果的严谨性没有设置删除个别数据的功能，只有在打印结果后清除所有数据。在改变测量参数后仪器会提示打印，如果取消打印也会清除所有数据。4.怎样清除仪器当中存储的数据四、仪器安全使用的注意事项更换光源时，请务必在关闭仪器电源的状况下进行，否则会有危险。仪器在刚刚工作后，光源盖板的温度将很高，请不要立即更换光源和触摸盖板，避免烫伤。氘灯发出的紫外线和钨灯的强光会对眼睛造成伤害。因为本仪器为免调仪器，请在整个换灯过程当中不要点亮任何灯。仪器在刚刚工作后，防尘滤网的温度会很高，请等待仪器冷却至室温后再对防尘滤网进行清洗工作，以免烫伤。作业一、填空题在处理液体试样较多的时候，请在使用前和使用过后检查

，以防止溶液蒸发后腐蚀

，造成仪器测量结果误差。在仪器的底部有

块防尘滤网，一般情况下需要

个月清洗1次，滤网取下后，可以用直接冲洗干净，