法医物证学课件

红细胞血型第一节

概述

血型（bloodgroup）：人类血液由遗传控制的个体性状之一，是血液的遗传标记(geneticmarker)红细胞血型：指红细胞表面抗原由遗传所决定的个体差异广义的血型概念：指包括血液、体液、分泌液、排泄物及组织细胞上，由遗传所控制的个体性状

一、红细胞血型抗原血型抗原分类1．从来源上分

2．从抗原特异性结构基础上分血型基因产物糖基转移酶、糖蛋白

类似的血型抗原还可存在于某些动物，植物和微生物中

三．红细胞血型抗体

天然抗体、免疫抗体寒冷抗体、温暖抗体IgM抗体、IgG抗体四．红细胞血型检测凝集反应颗粒性抗原与相应抗体结合并集聚成团块。红细胞凝集反应红细胞与对应抗体发生的凝集反应。（一）红细胞的凝集反应

致敏：抗原抗体发生特异性结合，这种结合是可逆的。细胞结构无改变，无肉眼可见的凝集团块。凝集：抗原抗体结合物继续反应，细胞黏着并凝结成肉眼可见的凝集团块。为不可逆反应动电位（zetapotential）

由红细胞表面的静电荷与正离子团外自由正离子间形成的电位差。动电位的大小取决于红细胞表面负电荷的程度与介质中的离子浓度，也决定了红细胞间距，与凝集反应的发生有密切关系

（二）红细胞凝集反应的促进因素

缩小红细胞的间距，降低红细胞的动电位

1.用水解酶或神经氨酸酶处理红细胞

2.加入牛血清白蛋白可降低介质中离子的介电常数

3.用低离子强度溶液作为反应介质

物理作用

离心作用

第二节ABO血型

1900年由Landsteiner发现特点：个体血清中含有与自身红细胞ABO抗原相对应的“天然”抗体，恒定地存在于正常人的血清中，为“规则抗体”

利用抗A和抗B血清可以测定未知血液的ABO血型一．ABO抗原的结构ABO血型抗原的类型酯溶性糖酯类水溶性糖蛋白膜糖蛋白ABO血型抗原的基础物质

H物质和血型前身物质

血型前身物质由单糖顺序连接形成糖链，根据其非还原末端核心结构中糖的种类和二糖之间的糖苷键连接方式可分为6种类型（I~VI型）。不同类型的血型前身物质存在于人体不同部位，用于不同产物的合成。红细胞膜上为II型结构。

Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc

H物质

Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc

FUCA抗原

GalNAc—Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc

FUC

B抗原

Gal—Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc

FUCO（H抗原）

Gal-GlcNAc-Gal-GalNAc

FUCABO抗原不是基因的直接产物，基因的直接产物是糖基转移酶，通过催化不同糖链的生成而产生ABO抗原

二．等位基因结构与ABO血型表型

ABO基因位于人类第9号染色体（9q34），有7个外显子，编码产生糖基转移酶。ABO基因长度约1060bp，编码353个氨基酸。A和B基因的cDNA有7个碱基差异，造成第176、235、266、268位置上4个氨基酸的不同。是A和B基因产物特异性不同的分子基础。

O基因由于258位碱基G缺失和第349位碱基缺失导致框架密码位移，终止密码提前出现，合成无酶活性短肽。

Bernstein三复等位基因学说

ABO基因座主要有三个等位基因A、B和OA、B对O为显性，O为隐性表型与基因型关系

A（AA，AO）；B（BB，BO）；AB（AB）；O（OO）ABO基因型可通过表型的家系调查推定，也可通过DNA分技术直接检测。

ABO血型的亚型与变异型

最常见的A亚型A1与A2亚型

异常的ABO血型

CISAB型获得性B抗原过路人抗原型、脱乙酰酶型三．群体遗传学

表现型频率：中国汉族绝大多数地区为B>O>A>AB

四．分型方法

血清学方法—正试验、反试验玻片法试管法DNA分型方法

PCR-SSPPCR-RFLP

第三节

H抗原与分泌型

H抗原是ABO抗原的前身物质。由α2-L-岩藻糖转移酶（α2-FUT）催化L-岩藻糖（α2-FUC）转移至血型前身物质上形成

除了孟买型红细胞Oh外，所有人红细胞表面都有H抗原

一．H抗原与分泌型抗原的性质

概念：在唾液和其他体液中可检出ABH血型物质者，称为分泌型。否则为非分泌型除红细胞上有H抗原外，在大约80%的人唾液中用中和试验检出H抗原，为分泌型另外20%的唾液H抗原中和试验为阴性，是非分泌型

分泌型人唾液中与H抗原同时存在的还有A和B抗原，其体内其他分泌液排泄液中都存在ABH抗原ABH物质存在于血清，精液，唾液，泪液，消化液，尿液等体液中，不同分泌液中血型物质的分泌量有明显差别，以唾液、精液为最多，其他含量较少分泌液：

Galβ1-3GlcNAc—Gal—GalNAc红细胞：Galβ1-4GlcNAc—Gal—GalNAc*化学成分相同，但结构有微小差异*红细胞上的ABH物质属脂蛋白，醇溶性，不溶于水；而分泌液与体液中的ABH物质为水溶性糖蛋白，人以I型结构为主

二．基因结构与命名

分泌型表达是由双结构基因控制的位于第19号染色体两个紧密连锁的FUT1（H）和FUT2（Se）基因座，各自编码表达一种α2-岩藻糖转移酶FUT1基因座编码365个氨基酸残基组成的岩藻糖转移酶FUT2基因座编码332个氨基酸残基组成的岩藻糖转移酶，只作用于分泌腺细胞红细胞上的H抗原为II型糖链，分泌型人唾液腺细胞有Se和H基因，因此唾液中同时表达I型和II型H抗原；非分泌型为se隐性基因，唾液中不表达H抗原三、H抗原缺失型—孟买型（Oh）

概念：是红细胞上和唾液中全无A、B与H抗原的O型变异型，不能与抗-A、抗-B与抗-H发生凝集反应，血清中含有抗-A、-B与抗-H抗体，可分别凝集A、B、O型红细胞两种类型：(1)

FUT1和FUT2基因是hh和sese纯合子，没有岩藻糖转移酶合成。也无H物质合成。即使有正常的ABO基因，也无A、B、H物质。

(2)具有正常H和Se基因，分泌液中也有正常的岩藻糖转移酶，但没有H物质生成。认为是岩藻糖转移酶在催化H物质合成过程中由于缺乏某种条件所致

四．Se和nS的检查

中和试验（凝集抑制试验haemagglutinationinhibitiontest,HAI）

检测唾液和精液中的HAB物质，来区分分泌型和非分泌型。胎儿检测羊水，新生儿检测唾液即可区分

第五节MNSs血型系统

第二个被发现的红细胞血型抗体是免疫获得，分别命名为抗M、抗N出生时已发育完好，只存在于红细胞上，肾上皮，口腔黏膜上皮，毛发中有MN抗原人以外的动物，仅在黑猩猩和某些低级猴类证明有M型物质，N型物质仅见于类人猿。其他动物均未能发现。对人兽血的鉴别有重要意义人血清中通常无抗M抗N抗体存在，但偶尔可遇到S抗原与MN抗原呈紧密连锁关系

一、MNSs血型抗原的结构

MN和Ss血型抗原决定簇分别由血型糖蛋白A（glycophorinA,GPA）和血型糖蛋白B(glycophorinB,GPB)携带，是人红细胞表面的唾液酸糖蛋白红细胞膜的构成成分。无水溶性形式，用唾液酸酶或蛋白酶处理，可丧失M与N的抗原活性抗原性质

一般性质：A）MN抗原发生早，胚胎期可证明。Ss出生后可证明。B）MN抗原十分稳定，耐高温，高压和反复冻融。

剂量效应：纯合子较杂合子表现出更强的抗原性。这种现象称之为剂量效应。类N特异性：抗N抗体可被M型红细胞吸收，由于M型红细胞上存在类似于N的受体。

分型方法

MN血型判定：凝集反应—玻片法和试管法Ss型判定：抗人球蛋白法（Coombs法）血痕的MN型判定：吸收试验，解离试验

第六节Rh血型系统

1940年，landersteiner与wiener用恒河猴RBC免疫家兔得到一种抗体，发现抗血清不仅能与猴子RBC发生反应，还与纽约85%白人的RBC发生反应。

因为这类抗原存在于所有恒河猴（rhesusmonkey）的红细胞上，故命名为RH因子。将凡能与这种抗RH血清起反应的85%白人称之为RH阳性，不能起反应的15%白人称之为RH阴性。

一．RH抗原结构

RH蛋白(RHD分子、RHCcEe分子）RH相关糖蛋白——与RH抗原性无关

RH蛋白为含有12个跨膜区多肽，N末端和C末端均位于细胞质，6个亲水性多肽环位于细胞外

二．等位基因结构与命名

RH基因由紧密连锁且高度同源的RHD和RHCE基因组成

RHCE基因：由10个外显子组成编码417个氨基酸多肽。根据氨基酸序列不同，有Ce，CE，cE，ce四种抗原RHD基因：也有10个外显子，编码一条417个氨基酸残疾的多肽RHD座位有两种表现型D（+），D（－）。RHCE座位有4种表型，所以共有8种单倍型

RH抗原多态性的分子学基础

RHD基因编码D抗原，RHCE基因编码C，c，E，e抗原Cc抗原的产生是由于RHCE基因第1-2外显子发生了6个碱基替代，而使4个氨基酸发生改变，以致产生C或c抗原Ee产生与RHCE基因第五外显子上一个碱基替代有关，从而使位于第4个细胞外多肽环上的一个氨基酸发生改变，表现为E或e特异性RHD（+）人具有RHD基因，RHD（－）人缺乏RHD基因

变异型

Du型

Du与D只有量的差别，无质的差异。可与某些抗D血清发生弱反应，与另一些血清不发生反应

RH缺失型（—D—型）

红细胞上无CcEe抗原，血清中有抗C，抗c，抗E，抗e抗体。为稀有变异型，多见于近亲婚配

Rhnull型（RH无效型，RH-）：RBC不与任何抗RH血清反应，本质是基因表达受抑制。Xr基因纯合子阻断RH抗原合成。家系调查子女仍有正常的RH基因遗传

检查法

胶体介质法

原理：水溶性胶体介质可提高水的介电常数，增加RBC表面极性，降低ζ电位，使RBC间斥力减弱，距离靠近，在不完全抗体作用下，发生凝集

木瓜酶法（酶法）原理：蛋白水解酶使RBC膜上唾液酸及含有唾液酸的糖蛋白游离，细胞表面电荷减少，细胞膨胀，血型受体露出细胞表面，与不完全抗体作用发生凝集反应。有木瓜酶，菠萝蛋白酶，胰蛋白酶等。抗人球蛋白法（Coobms’法）原理：不完全抗体不能使RBC发生凝集，但可使RBC上的相应抗原致敏。不完全抗体是球蛋白，本身也是一种抗原。当加入抗人球蛋白抗体后，即可产生抗原抗体反应使RBC凝集。直接凝集反应

一、概述二十世纪初发现移植排斥现象免疫反应本质主要组织相容性抗原复合体（MHC）与移植排斥有关，也参与机体免疫应答得诱导和调节MHC结构、功能、进化及其与临床医学之间的关系，是近代免疫遗传学研究的核心二、人类MHC发现人类第一个白细胞抗原Mac存在于白细胞表面，含量最多，采集外周血白细胞检验，称之为人类白细胞抗原系统（HLA）人类MHCHLA复合体

三、HLA基因定位与结构HLA基因复合体位于人第六号染色体短臂6p21.31。HLA-I类基因集中在远离着丝点的一端，包括B、C、A三个座位，其产物是HLA-I类分子HLA-II类基因在复合体中位于近着丝点一端，由DP、DQ、DR三个亚区组成血清补体成分编码基因C2、C4A、C4B、Bf四、HLA命名

1.

以大写字母A、B、C等表示HLA遗传区域中的座位。2.HLA抗原特异性用数字表示。3.HLA-C抗原特异性以Cw为字首命名。4.HLA基因命名一般以4位数字表示，其中前2位数字表示对应最相近的HLA抗原特异性，后2位数字则用于表示亚型的等位基因。5.如果出现第五位数字，则代表“沉默取代”。6.第6、7位数字代表相应的启动子（包含内含子或侧翼区等）序列的多态性。7.末尾加英文字母N表示无效等位基因或不表达基因。8.在不能区分等位基因时，可允许取最前面的2位或4位数字表示该HLA的特异性。五、HLA复合体遗传特征单倍型遗传方式复等位基因共显性遗传，是HLA高度多态性的最主要原因。某些基因比其他基因能更多或更少地连锁在一起出现，从而出现连锁不平衡。六、HLA抗原系统HLA-I类分子由α链和β2m组成，分布于所有有核细胞表面。分为多肽结合区、免疫球蛋白样区、跨膜区和胞内区。HLA-II类分子由由α链和β链组成的异源二聚体。同样分四个区。仅表达于淋巴样组织中的各种细胞表面，如APC细胞、胸腺上皮细胞和人的活化T细胞七、HLA分型

一、血清学分型（微量淋巴细胞毒性试验）二．细胞学分型（淋巴细胞培养试验）三．DNA分型（一）PCR-RFLP技术（二）PCR-SSO技术（三）PCR-SSP技术（四）测序技术概述血清的组成血清型概念血清型分类特异性抗体分型：同种异型电泳技术分型：电泳多态性法医学应用的血清蛋白型Haptoglobin(Hp)Group-specificcomponent(Gc)Transferrin(Tf)α1-antitrypsin(α1-AT)Immunoglobulin(Ig)Low-densitylipoprotein(LDL),Component等第一节

结合珠蛋白

Haptoglobin，HP一、HP的分子结构糖蛋白，分子式（αβ）2，pI=4.1α链有，β

链无多态性HP1α(83个氨基酸)，第53位为Lys或Glu，构成HP1αF和HP1αS两条多肽链HP2α(142个氨基酸)，第53和112位上或Lys或Glu，构成2F，2S，2FS三种不同的结构二、HP的生理功能与血红蛋白Hb结合成Hp-Hb复合物，并很快被网状内皮系统所清除。还可以使Hb的过氧化酶活性增高。三、HP的表现型及遗传Swithies和Walker（1955）用凝粉凝胶电泳技术，将HP分为三型：HP1、HP2-1及HP2。用尿素将血清变性处理，再用巯基乙醇还原后进行电泳，可检出6种表型，Hp1S-1S、Hp1S-1F、Hp1F-1F、Hp2-1S、Hp2-1F、Hp2-2。由三个共显性等位基因Hp*1F，Hp*1S，Hp*2所控制。

等电聚焦还可进一步分为10余种表型，由5个共显性等位基因控制

四、Hp的遗传变异

HP0型

用常规检测方法不能检出Hp。血液中无HP，亦称无结合珠蛋白血症

HP2-1M型

电泳谱带特点是HP1和HP2谱带中的快泳动带成分比例增多，而其余谱带非常弱。HPCa型

特征是HP2谱带中快泳动带比例减少，而其余谱带明显增加HPJ-1型

特点是1谱带分裂为两条带，阴极侧的谱带增多，系HP2-1型的变异型。HPK-1型特点是1区的谱带分裂为两条，其余区域无蛋白带，可能有1型演变而来。其他变异型有：HP2-1（Trans），HP2-1（Haw）等

五、HP分型原理、方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳（圆盘、垂直板）原理：利用聚丙烯酰胺凝胶（PAG）的分子筛和电场的作用，在凝胶中分离不同型别Hp蛋白。然后利用Hp-Hb复合物中Hb的过氧化物酶活性，使联苯胺氧化成联苯胺蓝。从而使谱带显色进行判型。第二节维生素D结合蛋白型

维生素D结合蛋白（vitaminDblindinprotein,DPB）又称型特异性成分（groupspecificcomponent,GC）属血清α2球蛋白Hirschfeld于1959年发现其多态性

主要生物学功能是结合和转运维生素D及其代谢产物。GC可在体内或体外与肌动蛋白（actin）结合，形成1:1的复合物。GC与肌动蛋白结合有利于肌动蛋白从组织中清除。

GC基因定位于第四对染色体长臂（4q12-13）GC系统属常染色体单基因座共显性遗传，按孟德尔定律遗传。Gc基因全长约42.4kb，包含13个外显子。基因产物为458个氨基酸残基的单一肽链。位于第11外显子中第416位，第420位密码子的变化导致Gc遗传多态性；常见的等位基因为Gc*2，Gc*1F，Gc*1S。GC遗传及等位基因

Gc表型聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术可将GC分为三种普通表型，即1、2－1、与2，受控于GC*1与GC*2一对共显性等位基因。用等电聚焦技术可检出3个等位基因产物，共6种常见亚型。即1F、1F1S、1S、2-1F、2-1S与2法医学应用评价个人识别率为0.799非父排除率为34.8%室温保存4个月的血痕可检出Gc型免疫球蛋白同种异型遗传标记同种异型遗传标记是位于免疫球蛋白上具有个体差异的遗传标记Ig分子免疫学性质4条多肽链组成并通过二硫键连接的单体，其中两条为重链（H链），两条为轻链（L链）重链分为5类，IgG（γ）、IgA（α）、IgM（μ）、IgD（δ）、IgE（ε）轻链可分为两型，κ型和λ型

免疫球蛋白同种异型的命名与遗传

重链（G1m，G2m，G3m，A2m）

G1m（1，2，3，17）

G2m（23）

G3m（5，14，26，6，15，27，10，16，

28，11，21，13，24）

A2m（1，2）轻链（Km）

Km（1，2，3）常染色体共显性、呈单倍型遗传

Gm、Km测定血凝抑制试验

酶联免疫抑制法法医学应用评价Gm、Km系统个人识别率及非父排除率高于已知的红细胞血型、红细胞酶型及其他血清型Gm、Km抗原在常温下或碱性环境中颇为稳定，溶血对抗原性无大影响具有较高的法医学应用价值第一节

概述

红细胞酶型是红细胞多态性同工酶个体间的遗传差异。同工酶是指能催化相同的化学反应，但蛋白质分子结构不同的一类酶。红细胞酶对底物具有高度专一催化作用，受遗传基因所控制。它广泛存在于人体的组织器官和体液中。

1.复基因座同工酶由位于不同基因座基因编码的同工酶。这类同工酶各亚基的一级结构差异很大。2.复等位基因同工酶由单基因座上的基因发生突变而形成的多个等位基因编码的同工酶。各等位基因编码的肽键一级结构不同，具有个体差异，成为个人识别的基础。3.等位基因同工酶

由单基因座的基因突变产生等位基因编码的同工酶一、同工酶分类：二、红细胞酶型的分型

原理：根据酶蛋白分子的大小和所携带负电荷量的不同，通过电泳使之分离，并利用酶的催化活性，作用于底物，使之显带，根据电泳谱型进行判型。显谱方法：①荧光染色法；②电子转移染料染色法；③酶偶联染色法；④化学测定染色法。

第二节

红细胞酸性磷酸酶（EAP）酸性磷酸酶（acidphosphatase,ACP）是一组在酸性条件下催化磷酸单酯水解的酶类。

一、生物化学特性

酸性磷酸酶广泛分布于人体各组织中。根据分布不同，可将人体内ACP分为3大类：红细胞ACP（EAP）；细胞分泌的ACP组织细胞溶酶体中的ACP。

二、遗传多态性

EAP由一组单基因座复等位基因所控制。基因定位于人体第2号染色体短臂2区5带。1963年Hopkinson等用淀粉凝胶电泳法测出了5种表型，符合孟德尔遗传规律。

三、群体遗传学调查结果

在已调查的人群中，EAPb频率均高于EAPa。EAP基因频率的分布有明显的种族差异。

四、EAP型的分型方法

淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、醋酸纤维素膜电泳及聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦

显谱方法：以4－甲基伞形酮磷酸盐为底物。4－甲基伞形酮磷酸无荧光，在EAP催化下可分解为4－甲基伞形酮和磷酸，4－甲基伞形酮具有荧光性，在紫外线照射下可发出荧光。以谱带的迁移率及谱带的数目为依据外，还要根据谱带的相对强度来决定型别。

第三节

酯酶D

酯酶D（EsD）是一组能够水解羧酸酯键的酶，广泛地存在于人体组织中。酯酶A、B、C的电泳谱型在所有个体都一样，不具多态性，只有酯酶D具有多态性。

Hopkinson（1973）用淀粉凝胶电泳从红细胞解离液中发现酯酶D的遗传多态性。基因定位于人体第13号染色体长臂上。常用琼脂糖凝胶电泳分型反应原理：4－甲基伞形酮醋酸盐在EsD的催化下可分解为4－甲基伞光形酮和羧酸阴离子，4－甲基伞形酮具有荧光性，在紫外线照射下可发出荧光。

第四节

磷酸葡萄糖变位酶

磷酸葡糖变位酶（phosphoglucomutase,PGM）是一组主要作用于糖原代谢的酶类，广泛地存在于哺乳类动物各种组织中。磷酸葡糖变位酶能够可逆地催化葡糖－1－磷酸和葡糖－6－磷酸的相互转化，将储存的糖原转变后进入糖分解代谢，是糖代谢中起重要作用的一种酶

1972年Ishimoto等将聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术应用于PGM1同工酶的研究，发现PGM1亚型

PGM1亚型有4个共显性等位基因PGM1*1+、PGM1*1-、PGM1*2+、PGM1*2-。

编码10种亚型，1＋、1＋1-、1-、2＋、2＋2-、2-2＋、2＋1＋、2＋1-、2-1＋和2-1-。

显谱原理：PGM1在G－1，6－2P存在下催化G-1-P转化成G-6-P。G-6-PD可使G-6-P氧化，同时使NADP还原为NADPH。NADPH在PMS存在下，使MTT还原为深蓝色不溶性的甲月替而显示酶谱带。

第五节

乙二醛酶Ⅰ

乙二醛酶Ⅰ（glyoxalase,GLOⅠ）是一种以谷胱甘肽作为辅酶，将甲基乙二醛转化为乳酸的酶。乙二醛酶Ⅰ和乙二醛酶II（GLOII）构成了乙二醛酶系统，他们共同参与了是甲基乙二醛（methyglyoxal）转化为乳酸的反应。

1975年Kompf等用淀粉凝胶电泳结合特异性的酶谱显色法发现GLOⅠ遗传多态性3种常见表型1、2-1、2，由人类第6号染色体短臂（6p21）上的一对共显性等位基因GLOⅠ*1及GLOⅠ*2所控制。常用的方法是琼脂糖淀粉混合凝胶电泳法

GLOⅠ除可在血痕（6～8周）中检出外，还可在精液（斑）及毛根中检出。

第一节概述第一节法医物证的发现第二节法医物证的提取第三节法医物证的包装第四节法医物证的保存第五节法医物证的送检

第十一章法医物证检材的提取、包装和送检

第一节概述一、法医物证检材

二、法医物证检验一、法医物证检材种类体液、分泌液、排泄物————血液、精液、阴道分泌物、乳汁、鼻涕、尿液、痰、羊水等及其斑痕人体组织器官及其碎块————脏器、肌肉、皮肤、毛发、指甲、骨骼、牙齿等特点容易变性、变质、降解和腐败二、法医物证检验检验方式现场勘验及调查实验室检验鉴定检验程序案件的受理物证检材的检验检验结果的分析鉴定结论的提出检验要求

第十一章法医物证检材的提取、包装和送检第十一章法医物证检材的提取、包装和送检第一节法医物证的发现全面、仔细地搜索---肉眼或借助仪器

案情调查：推测法医物证可能存在的位置现场勘验：科学、详细地记录---拍照、拍摄、绘图、文字检材特点：形态、数量、颜色、位置、分布、大小位置关系：检材与现场物体的位置关系检材与环境的位置关系检材与受害人的位置关系第十一章法医物证检材的提取、包装和送检第二节法医物证的提取基本原则

不损失、不污染、不破坏检材的可检测性根据检材及附着物的不同选择提取方法基本要求

检材提取者必须戴手套所用器具必须保持清洁不同部位检材分别提取提取检材附近材料作空白对照注意事项

严格遵守相关的法律法规血液（斑）

血液活体静脉血1-3ml+抗凝剂EDTA0.5ml制成血痕末梢血0.2ml+抗凝剂EDTA0.2ml制成血痕尸体未腐败尸体心腔血已腐败尸体现场多--吸管吸取移入有抗凝剂的试管少--洁净的棉纱布浸染吸附后凉干血痕

擦拭根据血量的多少，准备适当的纱布，用蒸馏水浸润即可。

刮取

精液（斑）

人体

体内：阴道内由外向内直至后穹隆部位分三段用纱布吸敷

体表：肛门、会阴、腹壁、大腿蒸馏水浸湿的洁净纱布擦拭

物体

唾液（斑）

人体

唾液：漱口--自然流出--水浴煮沸--冷冻/斑

--纱布置入口中，反复擦拭颊粘膜

唾液斑：乳头、口唇---擦拭

物体

种类：烟蒂、手帕、口杯、信封、邮票

注意：潮湿部位的标记第三节法医物证的包装基本要求每件检材必须单独包装，避免交叉污染结实、牢固、清洁、便于标记材料选择纸袋----斑痕（凉干后保存）塑料管----液体检材广口瓶----组织块标注内容案件编号，取材地点、时间及方法、提取人、样品名称、数量、保存方法

第四节法医物证的保存保存方法液体：制成斑痕保存或冷冻保存斑痕：阴凉干燥处或冰箱内保存组织块：冷冻或浸泡于75%乙醇溶液中保存

**低温保存各种检材，以冷冻效果最佳特殊要求检材应该有专人负责保存物证检材袋应该加密封口**保存期限在原办案单位保存到案件审理终结后1-2年血液在人体外干燥以后所形成的斑迹叫做血痕。血痕特点：

1分布广泛，是最常见的法医物证，占总量90%，具有重要的法医学意义推测案件的性质----自杀、他杀、灾害推测死亡的原因----是否失血引起的死亡认定犯罪嫌疑人----遗传标记的检测

2易受影响，发生降解、腐败。

红细胞被破坏、血清干燥无法分离-----常规ABO血型检测方法的不适用

大分子的蛋白质抗原和DNA被破坏----及时发现和提取，及时检验。检验目的

1亲子鉴定----是通过对人类遗传标记的检测，根据遗传规律分析，对有争议的父母与子女血缘关系的鉴定2个人识别----确定某个人是谁、某人与另一个人是否同一人、生物性检材是否源于某个体的鉴定检验程序由于生物性检材的主要特点在于环境条件的作用使它具有某些不确定性，因此。法医物证检验一般是通过由简单到复杂、逐步排除、逐步缩小范围的实验分析策略实现个人识别的一、血痕的肉眼检查血痕的现场勘查主要是观察血痕存在的部位，颜色、形状、范围和分布特征

部位：室内----注意把手、水龙头、毛巾、砖缝凶器----刀柄的缝隙人体----指甲缝、衣服皱褶、袖口、扣孔、鞋边

颜色：一般呈暗红色，有光泽。随后逐渐变成暗色、褐色或灰褐色根据血痕的干燥程度和颜色，大致推测血痕经过的时间

形状：滴落高度0.1m以内高度滴落0.5m高度滴落1m高度滴落

行走方向出血部位范围：二、血痕的种类鉴别

【预备试验】

原理：通过测定血痕中的血红蛋白及其衍生物的过氧化物酶活性，达到筛查血痕

特点：灵敏度高、操作简便、快速,特异性差

方法：联苯胺试验

【确证试验】

原理：主要根据检材中是否含有血红蛋白或其衍生物确定是否是血痕

特点：特异性好，灵敏度差

三、血痕的种属鉴定动物血中或某些细菌含有某些与人类血液遗传标记类似的物质

ABO灵长类动物（猩猩、长臂猿）有A、B类似的血型物质低等动物（狗、猪、样、兔）有AB血型物质微生物（肺炎双球菌14型---A、大肠杆菌O86----B）Rh低等灵长类动物（猕猴、广鼻猴）有Rh抗原物质MN灵长类动物

DNA相似的DNA片断血清学方法-----原抗体体外反应反应特点：

（1）特异性：抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区相互适应所决定

（2）可逆性：表面非共价键结合，在一定条件下可解离，解离后性质不变

（3）比例性：抗原抗体结合是否出现可见的反应现象，与两者比例密切相关影响因素：条件

温度：一般在37度-----冷盐水洗涤，56度解离---实验原理

电解质：最适0.85%盐水，中和分子表面电荷，使由亲水—疏水

酸碱度：最适Ph6~8，等电点发生凝集抗原

质的变化：蛋白变性分解（生物因素、化学因素、物理因素）

量的变化：抗原量的减少抗体

特异性：刺激机体产生特定的免疫应答，并与其产物产生特异结合

效价：出现明显抗原抗体反应的抗血清最高稀释倍数的倒数【沉淀反应】1实验原理可溶性抗原与相应抗体在适当电解质存在条件下发生特异性结合，当抗原抗体比例适合时，可形成肉眼可见的抗原抗体复合物沉淀。

2实验准备

抗血清种类选择：抗人血清蛋白血清--只有种属特异性，而无器官特异性

抗人血红蛋白血清--既有种属特异性，也有器官特异性种属特异性：指抗体只对某一物种成分发生特异反应的特性。器官特异性：指抗体只对某一器官成分发生特异反应的特性。

质量鉴定：合格标准：特异性好、效价高、外观清澈透明

【免疫层析】——免疫胶体金试验

原理：将各种反应试剂以条带状固定在同一试纸条上，待检标本加在试纸条的一端，通过毛细作用在层析条上渗滤、移行并与膜上吸附有抗人血红蛋白抗体的免疫胶体金颗粒结合后，样品中的待测物同层析材料上针对待测物的受体（如抗原或抗体）发生特异性免疫反应。层析过程中免疫复合物被截留、聚集在层析材料的一定区域（检测带）。胶体金颗粒由金化合物制备而成，带负电荷，颜色呈桔红色到紫红色，可作为抗体染料结合物，将抗体免疫球蛋白吸附在表面，成为免疫胶体金。

【ELISA】---间接酶联免疫吸附试验

原理：将抗原或抗体包被在固相载体上，使免疫反应在固相载体上进行。然后借助抗体上标记的酶活性，使底物被催化后形成有颜色的产物。方法：

【DNA检验】Alu序列：

特征：重复单位300 bp，其中170bp附近有限制性内切酶Alu的识别序列AGCT

方法：PCR-ASOPCR-SSP130bp的特异性条带

28SrRNA：

特征：保守区中的可变区进化较快，种属差异大

方法：扩增产物长度108、104、101、99bp

细胞色素C基因序列

特征：存在于线粒体DNA中

方法：PCR扩增产物981bp，三、血痕的遗传标记检测

遗传标记选择原则：

1具有良好的遗传多态性、2稳定性好3检测方法标准化、简便快速、结果重复性好【红细胞血型测定】ABO血型是法医学物证检验个人识别的传统检测项目，迄今广泛应用于基层法医实践。

抗原特征：抗原性强---红细胞表面分布的抗原决定簇数目多，少量检材可以分型抗原稳定---抗原为多糖，对高温、腐败等高度耐受，可保存相当长时间

分布广泛---不仅红细胞上有，其他人体组织细胞也ABO抗原

分型难点：干燥使红细胞干瘪变形、没有游离红细胞，不能用直接凝集反应分型，干燥使血痕中的水分消失，无法分离血做反实验

常用方法：

【血清型测定】HP、GC、ORM、AHSG、TF、PI

HP型：采用氯仿提取血红蛋白，消除血红蛋白的影响

GC型：4mol/L盐酸胍处理血痕，可使GC-actin复合物解离，恢复正常电泳迁移率

【红细胞酶型测定】

系统选择：个人识别几率和稳定性精斑检验的目的与其他物证检验目的一致：为案件的侦查和审理提供线索和证据需解决的问题：斑痕是否为精斑？若是精斑，确定精斑的个体来源。一、

概述

精液性状

乳白色半透明的粘稠液体，有特殊的异嗅味。弱碱性（Ph72-8.6）比重（1.021-1.040）渗透压0.55-0.58凝固酶（精囊腺）5min内凝固成较冻状中性蛋白酶及纤溶酶（前列腺）20-30min内液化成稀薄半流动体状成分构成

有形成分

精子呈蝌蚪状长约50-70ul，

头部----正面观椭圆形，侧面观呈梨形顶体----覆盖精子头部前2/3帽状结构含有多种水解酶，穿透卵子精子细胞核--染色质，各种大小空泡体部----呈圆柱状，内有中心原纤维轴丝尾部----动力的来源，线粒体很多

细胞成分睾丸细胞、白细胞、柱状上皮细胞

其他固体卵磷脂小体-----前列腺精胺结晶----玻璃小体、色素颗粒、脂肪球精浆是由男性各附属性腺分泌物组成，水分90%，其他10%其中有多种蛋白质（包括酶）、黄素、胆碱、精胺等精囊腺50~80%呈碱性，含两种主要：果糖和凝固酶，及磷酸胆碱、黄素前列腺15~30%呈酸性，透明状，含有酸性磷酸酶、纤溶酶、中性蛋白酶、精胺尿道球腺和尿道旁腺5%呈浅灰白色的液体化学组成

蛋白质精浆蛋白浓度约为35~55mg/ml，略低于血清蛋白的平均浓度（72mg/ml）

血清共同蛋白

Tf、PI、ORM、GC

精液特有蛋白1966γ—

精浆蛋白（γ—Sm）1967β—

精浆蛋白（β—Sm）α2—精浆糖蛋白（α2—SGP）1978β—

微精浆蛋白（β—MSP）1978前列腺特异蛋白（P30）

蛋白酶水解酶的含量最丰富某些酶活性水平很高：酸性磷酸酶等酶活性较其他组织酶活性高50~100某些酶活性保持较久：肌酸磷酸激酶(CPK)酸性磷酸酶(ACP)一年以上二、精斑的肉眼检验

目的：发现可疑精斑、确定所在位置及分布，以便准确取材，提高阳性检出绿。

记录：精斑的分布情况、数目、位置、形状、大小、颜色及光泽等

精斑

部位人体---犯罪嫌疑人或被害人的外阴或大腿内侧、衣裤现场---被褥、毛巾、手纸、草席

外观形状多呈不规则地图状，身体表面可成白色鳞片痂状深色布料---浓厚精斑成灰白色状斑迹浅色布料---精斑多呈黄白色地图状。边缘较深软质载体---触之有硬感

辅助检查：陈旧或水洗过的精斑，可疑借助紫外光进行观察

现象---紫外光下精斑呈银白色荧光，边缘呈浅紫兰色

原因----精斑中含有黄素，在紫外线下发荧光

意义---阳性可能是精斑，（阴道分泌物、唾液、鼻涕、乳汁等都可发荧光）

三、精斑的预备试验

酸性磷酸酶检验

实验依据：精斑中的酸性磷酸酶含量高：浓度540~4000u/ml，约是于其他脏器的100倍；精斑中酸性磷酸酶稳定性好：抗腐败---常温保存10年、夏季室温8周腐败；耐高热---125℃加热30min仍可检出活性

检验方法：

磷酸苯二钠试验原理：方法：取可以斑痕0.1*0.1，置于试管内，加反应缓冲液3~4滴，37度温箱内5~30min，然后加等量的显色缓冲液结果：阳性---立即出现红色----检材可能是精斑阴性---出现橙色---检材不是精斑或酸性磷酸酶被破坏特点：灵敏度高---20000倍稀释的精液仍可以出现阳性反应

磷酸萘酚-固蓝B试验原理：方法：取少量检材置于白瓷板上，滴加试剂1~2滴结果：阳性----1min以内出现深紫红色反应为阴性----不呈色或呈淡紫红色特点：灵敏度不好，阴道液液可能呈阳性反应。其他检验：碘化碘钾结晶试验

方法：卵磷脂析出胆碱+碘----过碘胆碱结晶特点：灵敏度不高1：400，特异性不好[褐色或褐红色针状、菱形结晶]苦味酸结晶试验

方法：精素----分解产物+苦味酸---精素苦味酸结晶

特点：只有人的精液出现—种属鉴别[青黄色有折光的十字、柱、星结晶]锌检出法

方法：双硫腙法、吡啶基偶氮萘酚法

特点：特异性非常高，阳性几乎是精斑

四、精斑的确证试验

1精子检出法

精子是认定精斑最简便、最可靠的方法。不需要特殊的一起和试剂。

直接镜检：精子存活时间受多种因素的影响男性前列腺液—有利于精子女性阴道液—酸性—不利于精子精囊液—有害于精子宫颈液—碱性---保护精子

检材处理：浸泡：检材1.5×1.5,剪碎，置于试管中，加约0.5ml生理盐水，室温2小时，然后4度冰箱过夜。可用玻璃棒搅拌或挤压检材。可用5%~10%的氨液浸泡检材----陈旧检材，眼水不易分离精子

染色方法：单染复染苏木素-伊红（HE）

检出时限：活体尸体

检出率：24h精子检出率为50%，48h仅为10%。2.免疫学检验制备抗人精液特殊成分的抗血清，做沉淀反应抗血清抗人精液抗体---具有器官特异和种属特异性与其他体液交叉发应—吸收消除（乳、唾、血清）灵敏度：2000以上阳性可以肯定精斑，对无精子症更具价值抗前列腺特异性抗原抗体---具有高度的种属特异性和器官特异性是目前确证人类精斑常用试剂，最理想的标记、灵敏度和采用方法有关方法：酶联免疫吸附实验，胶体金法3生化学检验

乳酸脱氢酶-X：位于LDH3和4之间，由精子产生亮氨酸氨肽酶：存在于精浆，滴加试剂呈粉红色五、精斑的个人识别

1精斑的ABO血型检测

中和试验：原理精斑中的水溶性ABH血型物质，能特异地与相应的抗体结合，使抗体与指示红细胞的凝集能力减低或消失。方法注意：1血清效价4倍2中和时间至少30min3检材浑浊—煮沸—离心

ELISA法：灵敏度高（10-4~10-5）---防止交叉污染DNA分型：

2精斑的血清型检测

可检出的系统：Gm，Km，GC，ORM

3精斑的酶型检测

其中PGM1和Fu较稳定，PGM1最常用

一、

唾液（斑）的特点唾液来源：唾液腺的分泌物---腮腺、颌下腺、舌下腺、小唾液腺浆液粘液唾液成分：水分占99.4%，有机物---粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、麦芽糖酶、血型物质无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐其余为固形物（口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣）唾液性状：无色、无味、接近中性（ph6.6-7.1），低渗粘蛋白多的时候呈粘液状，粘蛋白少的时候较稀薄唾液分泌：正常成年人每天分泌唾液1.0-1.5L。一、唾液（斑）的证明淀粉酶+口腔黏膜上皮细胞理由：唾液中含有大量的淀粉酶，是进行唾液斑斑痕种类鉴定的依据之一，但淀粉酶分布极广（人类粪便、几乎所有的植物、真菌等都含有淀粉酶、人体的其他分泌液液含少量的淀粉酶），单纯检出淀粉酶不能确定唾液斑。方法：淀粉酶检测：淀粉+碘-----蓝色（-）不含淀粉酶淀粉酶（检材）糖+碘-----无色（+）可能是唾液+碱性铜------棕红色沉淀证明糖的存在

上皮细胞：检材—离心----涂片----HE染色如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论三、唾液斑的遗传标记检测ABO血型----漱口，自然流出唾液置于干净容器，水浴中煮沸10min。灭火血型分解酶

分泌型人的唾液斑-----中和试验测定ABO血型

非分泌型人的唾液斑----酶标抗体免疫测定的方法蛋白/酶型----可以用特殊的双环杯提取腮腺液

多态性蛋白

Pa腮腺酸性蛋白Pb腮腺碱性蛋白

Pn腮腺中性蛋白Pm腮腺中带蛋白Ph腮腺重蛋白Pr唾液富含脯氨酸蛋白Db唾液双带蛋白GL唾液糖蛋白、多态性酶唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液过氧化物酶等DNA分析----唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞---提取DNA---基因组DNA/线粒体DNA

唾液：漱口水或口腔式子，提取DNA唾液斑：烟蒂（注意：取有唾液的部分进行DNA提取）基本概念：混合斑是指两名或两名以上个体的血液或体液、分泌液混合形成的斑痕构成分类：不同个体同一种体液或分泌液混合而成----最常见的是混合血痕不同个体的不同体液或分泌液混合而成----最常见的是精液阴道分泌液混合检测方法：经典方法----直接检测混合斑的遗传标记，然后与案件相关个体进行比对

现代方法----分离混合斑中成分，分别进行遗传标记的检测检验程序：确证检材是否是混合斑------然后检测遗传标记一、精液与阴道液混合斑1混合斑的确证精斑：细胞学方法-----精子的检出

免疫学方法-----精斑确证最好试剂----抗P30血清

生化学方法-----LDH-X阴道斑：细胞学方法阴道上皮细胞

HE染色：大而扁平、形态不规则、细胞浆红染

嗜碘试验：斑痕沉淀涂片，干燥后+2滴Lugo’s碘液---2~3min镜检呈红褐色或深黄褐色，（口腔上皮细胞不染色）

生化学方法阴道肽酶（VP）是一种催化肽键水解的酶仅存在女性生殖道分泌液中，与年龄、性活动、月经周期无关。

方法：淀粉凝胶电泳L-缬氨酸-L-亮氨酸

注意：阳性检出率只有64%，故阴性结果不能否定阴道液存在检出期限为7个月。

2混合斑中精液成分的个人识别ABO血型检测对比推断中和试验、解离试验、ELISA法等

对照种类：嫌疑人、被害人及被害人丈夫的血液和唾液

结果分析：

注意事项：混合成分的比例影响不同种类血型物质的检出分泌型的强弱，可以提供有用的信息混合斑被害人精液可能的血型嫌疑人ABSeseABSe

ASeABSe、BSe

BSeABSe、ASe

OSeABSe

ABSeABSe、Ase、Bse、OSe

特异成分

精子ABO血型检验----混合凝集

原理：抗原与抗体发生特异性结合后，再加入相应的红细胞时，抗体又同红细胞结合，结果形成检材抗原-抗体-红细胞三者结合

试剂：抗体效价：256倍指示红细胞：5%

精浆ABO血型检验----α2-精浆糖蛋白分子中的ABH抗原

糖链----ABH特异性抗原，用A、B、O红细胞和AB型人血清吸收

蛋白----有器官特异性抗原

解离试验

Y+混合斑的浸出液ELISA夹心法

血清型、酶型对比推断：血清型----Gm、Km

酶型----PGM1、Fu

DNA分析常染色体：

关键---获得纯净的精子DNA-----差异裂解或二步抽提法原理：精子细胞的表面蛋白含有大量的二硫键，可以抵抗去垢剂SDS核蛋白酶K的消化，而其他组织的细胞膜则可以被这两种物质消化。

方法：第一步：检材+1%SDS+100ug/ml蛋白酶K---37度2~3h500r/min离心15min、去上清，精子留在沉淀物中

第二步：+40Mm/LDTT+1%SDS+100ug/ml蛋白酶K----注意：消化条件选择----主要是第一步消化时间消化不完全----当阴道上皮细胞过多，不能使两者彻底分离过渡消化----可能消化一部分精子细胞，导致精子DNA减少***实际操作前，应进行涂片检查，根据精子和阴道上皮细胞的比例，对消化时间、温度、试剂的浓度等进行适当的调整提取方法选择----采用有机溶剂的方法比较好酚-氯仿能够去掉混合斑中的精浆蛋白，阴道分泌液、细菌污染严重的的,用有机溶剂提取后,用5%clekex100提1次。Y染色体：

优点1不用分离精液成分和阴道液成分，两者1/100~2000时仍可正确检出精子DNA，避免了操作过程中精子DNA的损失，提高了检出阳性率2精子细胞比体细胞更稳定，保存25年的阴道式子Y-STR获得成功3可以推测犯罪嫌疑人的数目----轮奸案注意提取多个部位的检材或一个检材的不同部位，分别提取DNA

注意可以排除，但不可以肯定3混合斑中阴道液成分的个人识别ABO血型同精斑的ABO血型检测酶、血清型

PGM1、Gm、Km、GLOIDNA分析

DNA提取-----二步抽提法的第一次消化后离心的上清液遗传标记------进行常染色体STR分析一、毛发检验

毛发结构：毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。

毛尖-----是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐变细而尖

毛干-----是裸露于皮肤外部的部分，由角化上皮细胞组成，中心向外可以分为：

毛小皮：人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。

毛皮质：人----皮质发达，

毛髓质：人---髓质不发达、而且髓质不连续

毛根-----是埋在皮肤内的部分。

毛球：毛根起始端膨大和球状的部分

毛囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮根鞘、外层为纤维组织鞘

毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含毛细血管和神经的结缔组法医意义：

1毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等案件中均可遗留2毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存3毛发可以进行个人识别鉴定注意：1毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最好带口罩2选择合适的背景进行观察毛发与其他纤维的鉴别肉眼观：毛尖、毛干、毛根显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质燃烧法：毛发由特殊的臭味----角蛋白中含有3%~5%的硫人毛与其他动物毛的鉴别

毛小皮毛皮质毛髓质

形态边缘宽度色素宽度连续性末端人

毛细而不规则花形细锯齿状较宽2/3均匀较窄1/4~1/5不连续部分缺如动物毛形状多变粗锯齿状较窄1/2~1/3不均匀较宽》1/3连续直至毛尖毛发部位的确定毛发其他特征鉴别

5%~10%亚硝基铁氰化钠溶液

脱落----毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着，根部色素少。染色不颜色反应拔出----毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放呈钩状，染色呈红色。钝器损伤----钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分离，部分或完全断裂锐器损伤----断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤维不分裂

长

度直径横断面

头发~2m《0.1圆形或椭圆形

胡须~30cm0.15钝的三角形

阴毛3~6cm0.1~0.2长椭圆形

毛发的个人识别

形态学检查：长度---色泽---黑色、浅褐色、灰色、白色---色素：白色、黑色、红色形态---直发、波状发、卷发断端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂免疫学检查：ABO血型----解离试验

特征：1血型物质含量少；2毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有方法：毛发洗净--乙醇脱色--充分压扁--加抗体吸收---涤、解离、RBC注意：1毛发压扁，原宽度地~4倍；2抗血清效价》128；3吸收时间充分，过夜4毛发对照生化学检查：有毛根和毛囊的毛发可以检测ESD、GLOI、PGM1、ORM等分子生物学：带毛囊---DNA提取用chelex-100，STR基因座分析，性别基因鉴定毛干---线粒体DNA多态性分析

化学分析：微量元素的检测应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱二、软组织检验1种类鉴别

肉眼观察

适合于组织块比较大的检材的识别组织切片

HE染色后，在显微镜下观察，鉴别***如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以恢复正常形态皮肤----复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪脑组织----神经细胞和神经胶质细胞肝脏----肝细胞及胆管构成发肝小叶结构肾脏----肾小球、肾小管、消化道----粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜2种属鉴定免疫学方法：抗人血清---沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析**法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解，易产生误判。分子生物学：Alu序列含有AluI酶切位点散在重复序列，由300bp重复单位，该序列为人类和灵长类特有-----种属特异性PCR-AFLP：人类130bp的扩增产物

28srRNArRNA=60s（28s+5.8s+5s+50多种多肽）+40

保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大人类108、104、101、99bp，不同动物的扩增产物长度不同

细胞色素b基因位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记人和哺乳类动物区别AluI酶切位点--酶切片断的长度不同人和鸟类的动物区别