离子对色谱法测定磷酸肌酸钠的稳定性

离子对色谱法测定磷酸肌酸钠的稳定性

磷酸钠（pcs）是一种高效的肌腱保护药物。临床多采用注射用水、5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液溶解后静注,或在4℃停搏液中用于心脏手术。但如果使用不当易产生肌酐、肌酸和磷酸肌酸酐等降解物,所以PCS在上述液体中的稳定性对保证用药安全至关重要。1试剂与仪器ShimadzuHPLC系统(10AD泵,10A紫外检测器,5.03版工作站、10A控制器);7725-I进样器(RheodyneUSA);对照品:PCS(Merck公司,批号725k2712950);肌酸(军事医学科学院,批号950613);肌酐(上海化学试剂公司,批号F2001215);磷酸肌酸酐(Sigma公司,批号61K1218)。受试品:PCS粉针剂(哈尔滨博莱制药有限公司,批号20001101,20001102,20001103)。受试液:注射用水(密阳神达药业公司,批号020318);5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液(青岛金海制药厂,批号0206072,02082207);停搏液(中国人民解放军总医院,批号011224112);四丁基季铵磷酸盐(Sigma公司,批号13677/112502);其余试剂为AR。2测量2.1对照溶液的制备精密称取PCS、肌酐、肌酸和磷酸肌酸酐各15.0mg,用纯化水制成各为0.3g·L-1的使用液。2.2组之间的注射液取PCS溶于下列溶液中:(1)2.0g于12.0mL注射用水中;(2)4.0g于500mL5%葡萄糖注射液中;(3)2.0g于12.0mL0.9%氯化钠注射液中;(4)2.5g于1000mL停搏液中。最终分别用相应的受试液稀释成0.3g·L-1供测定用。2.3流动相、流动相、总酸钠h色谱柱:Shim-VPC18(4.6mm×150mm,5μm),流动相:0.2%磷酸二氢钾+0.08%四丁基季铵磷酸盐水溶液(用冰醋酸调pH3.3),流速:0.9mL·min-1检测波长:210nm,进样量:20μL,用峰面积和外标法定量。2.4pcs含量和ph值受试品溶液在室温(25℃,停搏液在4℃,25℃)放置,于0,1,2,4,6,8,12及24h取样测定不同时间PCS的含量和pH值(每点测定2次,共3个批号)。以0h峰面积含量的均值为100%,来计算不同时间各被测组分的百分比含量。3重量测定3.1方法研究3.1.1分n/1.5测定要求对照品分离度测定的结果表明,4种组分R>1.5符合测定要求,见图1。同时对4种受试液进行空白与添加PCS对照品测定,结果未发现干扰,见图2。3.1.2pcs在不同受试液中的精密度和准确度(1)PCS及其降解物的精密度:取浓度为0.3g·L-1对照品溶液(n=5),每次进样20μL,测定值RSD依次为:肌酐0.31%;肌酸0.47%;磷酸肌酸酐0.85%和PCS0.74%。(2)PCS在不同受试液中的精密度:进样20μL0.3g·L-1的受试品溶液(n=6),其测定值RSD依次为注射用水0.32%;0.9%氯化钠注射液0.26%;5%葡萄糖注射液0.31%和停搏液0.74%。3.1.3线性实验在0.075～1.2g·L-1范围内,PCS线性良好,回归方程为:Y=1012935+17847335Xr=0.9977。3.2受试液的ph值变化按“实验步骤”操作。PCS在不同受试液中0～24h间的含量变化,以0h含量为100%(n=6),24h的测定值依次为:(92.2±0.4)%(注射用水)、(82.3±2.0)%(5%葡萄糖注射液)、(90.4±0.5)%(0.9%氯化钠注射液)、(96.2±1.2)%(25℃停搏液)、(99.7±3.3)%(4℃停搏液)。不同受试品溶液0～24h的pH变化(n=6)依次为:(8.39±0.18)～(8.02±0.38)(注射用水)、(7.81±0.06)～(7.42±0.05)(5%葡萄糖注射液)、(8.00±0.07)～(7.60±0.10)(0.9%氯化钠注射液)、(8.76±0.00)～(8.76±0.00)(25℃停搏液)、(8.62±0.00)～(8.62±0.00)(4℃停搏液)。测定结果表明受试液的温度、pH对PCS的稳定性有直接影响。其降解产物的含量随着PCS含量的降低而升高,主要降解物为肌酸。PCS在偏碱性和低温下的受试液里稳定,没有降解物生成。4pcs在0.9%氯化钠注射液和停采血液中tr值的测定采用离子对色谱法考察了PCS在临床使用条件下的稳定性。该法可同时测定PCS和其3种降解物的含量