recill细胞再生培养试剂盒在创面再上皮化中的应用

recill细胞再生培养试剂盒在创面再上皮化中的应用

伤口的再上皮化是愈合的重要组成部分。残余皮岛的数量和质量决定了治愈后疤痕的质量。皮岛的匮乏,如烧伤、创伤及医源性创伤可导致创面不能一期愈合,其瘢痕在形态和色泽上与周围正常皮肤相比差异性较大。理想的做法是把相匹配的表皮细胞移植到受区部位,并使其在适宜的环境中生长,从而加速上皮化过程,提高创面修复质量,避免形成瘢痕。ReCell细胞再生培养试剂盒即是基于这一想法而发明的技术。其原理是采集表皮真皮交界处的皮肤,放入1∶80扩增率的组织培养瓶,培养扩增表皮真皮交界处的细胞。创面<2%～4%体表面积时,可将创面本身作为组织培养系统,无需实验室培养。细胞增殖后含有大量的角质形成细胞、黑色素细胞和乳头状成纤维细胞,移植到创面后细胞在创面表面的迁移可使皮肤再生出相匹配的颜色和纹理特征。我科率先将此技术引入国内临床应用,并完善了相关的操作护理流程。现介绍如下。1数据和方法1.1病例选择和排除标准共招募病人32例,男18例,女14例;面部痤疮瘢痕20例,成熟性瘢痕6例,烧伤后皮肤色素减退3例,色素不均匀3例;年龄17岁～43岁,平均年龄27岁。病人选择标准:①面部痤疮瘢痕部位;②面部色素不均匀皮肤部位;③面部增生的瘢痕;④颜面部愈合皮肤区域的色素减退;⑤成人的治疗面积<2%人体表面积。排除标准:已知的局部或者系统的细菌感染;已知影响伤口愈合的因素,如恶性肿瘤或者终身免疫性疾病;肾功能障碍(肾小球滤过率<60mL/min);服用会影响伤口愈合或者色素沉着的药物(如皮质类固醇、维A酸);在移植前服用超过48h抗生素的病人;有其他并发症;对胰蛋白酶或者Hartmann溶液过敏者;精神疾患。1.2类器械:澳大利亚病毒株,澳大利亚-澳大利亚-中国ReCell细胞再生培养试剂盒(3类医疗器械,澳大利亚AVITA医学公司临床中心提供,已经获得国家食品药品监督管理局(SFDA)认证)。1.3皮肤组织病理学检测术前、术后进行拍照以备以后对皮肤缺损的深度及特征进行评价。全部病人创面处理均在局部麻醉下进行。耳后切取刃厚皮片,取样的大小和细胞喷剂制备的量根据需要重建的缺损区域面积而定。一次供区取皮面积不超过(2×2)cm2断层皮片。检测ReCell细胞再生培养试剂盒无误后,将供区皮片置于酶溶液中温浴15min,分离真皮与表皮。同时受区行皮肤砂轮磨削及清洁。创面覆以1∶30000肾上腺素生理盐水纱布,间隔数分钟更换纱布直至完成止血。将皮肤标本从酶溶液中移出,置入培养皿中分离表皮和真皮,如果无法分离,应重新浸浴5min～10min后再进行分离。分离真皮及表皮后,将其放入B溶液以中和消化酶,然后放回培养皿中,分离并暴露出表皮与真皮的连接面。添加乳酸盐溶液,刮除交界处的细胞,转移到装有乳酸盐溶液的5mL注射器中,制备单细胞悬液。过滤后,将细胞转移至5mL注射器,连接喷嘴。根据创面的位置和大小决定喷洒单细胞悬液的量。1.4各级病变程度分别于术后1周、2周、4周、8周、12周和6个月进行评估。评估标准:①伤口愈合时间,表皮愈合度(%);②瘢痕:颜色、色素沉着、质地纹理(分为1级～3级,3级为匹配,2级为轻微不匹配,1级为显著不匹配);③供区部位的外观(分为3级,1级为未愈合,3级为完全愈合);④供区部位疼痛(根据病人的主诉分为1级～10级);⑤并发症;⑥第三方医师评价及病人的自我评价。2护理2.1术前护理2.1.1做好病人的心理疏导工作病人的主要思想演变过程为痛苦、紧张、恐惧、焦虑、孤独、悲观、绝望等。在护理过程中,护士要给病人以安全、舒适感,消除紧张情绪,使其安心接受治疗。与病人进行心理沟通,给予宣教指导,从具体情况出发,有计划、有针对性地做好心理疏导工作。全面、准确的护理计划和及时、有效的心理护理是保证病人身心健康的关键。2.1.2初始烟症开始烟术前遵医嘱化验、检查,术前正常进食,术前排尿。术前2周开始戒烟。原则上手术前2周应停用一切与手术无关的药物。术前沐浴,清洁术区皮肤,刮去术区较长的体毛。2.2组织病理学检查将ReCell细胞再生培养试剂盒取出置于无菌器械台上,检测试剂盒能够正常工作,给ReCell试剂盒加温。依据组织的厚度设定酶溶液温浴时间(常规15min,样本较厚,则需增加至30min),时间到后试剂盒会发出蜂鸣提示音。术中密切观察生命体征,保护磨削后的创面,配制1∶30000肾上腺素生理盐水纱布。注意倾听试剂盒蜂鸣提示音,及时取出组织标本。创面进行细胞转移覆盖后应用保护敷料覆盖,外用无菌敷料及棉垫加压包扎。2.3术后护理2.3.1区域护理术后观察供皮区有无渗血及血肿,2d或3d更换敷料,7d拆线。2.3.2局部治疗,多次使用保持包扎敷料的固定,5d首次更换外层敷料。伤口应用保持水分的乳膏,2d更换1次,持续4周。注意观察创面敷料有无渗血、渗液,有无异味,妥善固定、制动。禁止在受区肢体进行输血、输液、测血压。测血压可致受区创面出血,产生皮下血肿,影响植皮成活率。2.3.3其他护理加强全身营养支持,促进创面愈合。术后1周禁食辛辣、刺激的食物,忌烟酒,拆线前避免沐浴。术后遵医嘱口服抗生素3d预防感染。3受区感染的病人自我评价本组病人伤口愈合时间为5d～10d,平均8.9d。瘢痕颜色、色素沉着、质地纹理2级、3级为96.3%,供区100%3级愈合。1例出现受区感染。第三方医师评价及病人的自我评价满意率为93.7%。感染病人经局部引流及抗感染治疗后愈合。4rectorl细胞再生技术创面瘢痕的形成与再上皮化过程紧密相关。“早期关闭”伤口表面可以限制炎症反应,而炎症是增生性瘢痕形成的重要因素,因此一次性皮肤细胞覆盖创面可以实现早期关闭创面,降低增生性瘢痕发生率。Wood教授发明的ReCell细胞再生技术通过胰酶降解等方法,用自体刃厚皮片制备自体皮肤细胞单细胞悬液,再将其喷洒于磨削去表皮或具有新鲜肉芽的创面,将匹配的混合细胞移植到受区部位,使其表皮均匀、快速再生,促进上皮化过程,提高创面修复质量、避免形成修复瘢痕。ReCell细胞再生技术是一种安全、可靠、便捷的方法,可明显促进创面的愈合质量和时间,可以促进创面处表皮细胞的再生、明显改善色素不均匀及色素减退。这一技术已在欧洲多国完成了临床试验,纳入临床治疗常规,并正在申请美国FDA批准。截至2007年,就已经有超过3500例应用于澳大利亚、英国、德国、意大利、美洲、日本等数十个国家。2008年国家药监局批准Re