凯氏定氮仪原理及操作步骤

凯氏定氮仪原理及操作步骤凯氏定氮仪原理：蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。有机物中的胺根在强热和CuSO4H2SO4(NH4)2SO4反响式为：2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04(其中CuSO4在凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3，收集于H3BO3溶液中反响式为:(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2OH2SO4HCIHCI量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，既得蛋白质的含量反响式为：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3凯氏定氮仪操作步骤：(一)消化1.0mL，样品要加到烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。再依次参加硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g，浓硫酸2.0mL，30%1.0mL。4、5、61.0mL1、2、32、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上，接好抽气装置。先用微火加热煮沸，此时烧瓶内物质炭化变黑，并产生大量泡沫，务必留意防止气泡冲出管口。待泡沫消逝停顿产生后，加大火力，保持瓶内液体微沸，至溶液澄清后，再连续加热使消化液微沸15min。在消化品完全消化。消化时放出的气体内含SO2，具有猛烈刺激性，因此自风橱中进展。消化完全后，关闭火焰，使烧瓶冷却至室温。(二)蒸馏和吸取蒸馏和吸取是在微量凯氏定氮仪内进展的。凯氏定氮蒸馏装1、仪器的洗涤仪器安装前，各部件需经一般方法洗涤干净，所用橡皮管、塞10%NaOH10min10min，再水洗数次，然后安装并固定在一只铁架台上。仪器使用前，微量全部管道都须经水蒸气洗涤，以除去管道5min可。较长时间未使用的仪器，重复蒸气洗涤，不得少于三次，并检查仪器是否正常。认真检查各个连接处，保证不漏气。2/3入反响室，但玻杯内的水不要放光，塞上棒状玻塞，保持水封，防止漏气。蒸气发生后，马上关闭废液排放管上的开关，使蒸气只能进入定氮球进入冷凝管冷却，在冷凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水。从定氮球发烫开头计时，连续蒸煮5min，然后移开煤气灯。冲洗完2～3混合液的锥形瓶使冷凝管下口完全浸没在溶液中，蒸馏1～2min，观看1～2min，用蒸馏水冲洗冷凝器下口，关闭煤气灯，仪器即可供测样品使用。2、无机氮标准样品的蒸馏吸取由于定氮操作繁琐，为了生疏蒸馏和滴定的操作技术，初学定。常用巳知浓度的标准硫酸铵测试三次。甲基蓝-甲基红混合指示剂(呈紫红色)3～4中一只锥形瓶承接在冷凝管下端，并使冷凝管的出口浸没在溶液中。2mL310mL30％NaOH流入蒸馏瓶中，在碱液尚未完全流入时，将棒状玻塞盖紧。向小玻5mL锥形瓶中的硼酸-指示剂混合液由于吸取了氨，由紫红色变成绿色。3～5min，移动锥形瓶使瓶内液面离开冷凝管下口约lcm，并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口，再连续蒸馏1min，移开锥形瓶，盖好，预备滴定。在一次蒸馏完毕后，移去煤气灯，夹紧蒸气发生器与收集器间的橡胶管，排解反响完毕的废液，用水冲洗小玻杯几次，并将废液排解。如此反复冲洗干净后，即可进展下一个样品的蒸馏。按以上方2mL测定二次。将各次蒸馏的锥形瓶一起滴定。3、未知样品及空白的蒸馏吸取收。5mL33mL，洗涤液一并倒入反响室内。其余操作按标准硫酸铵的蒸馏进展。由于消化液内硫酸钾浓度高而呈粘稠状，不易从凯氏烧瓶内倒出，必需参加热蒸馏水5mL解，趁热参加玻杯，使其流入反响室。此外，还应当留意趁仪器洗涤管道简洁析出结晶，造成堵塞。(三)凯氏定氮仪滴定样品和空白蒸馏完毕后，一起进展滴定。0.0100mol/L滴，振摇观看瓶内溶液颜色变化，暗灰色在一二分钟内不变，当视为到达滴定终点。假设呈粉红色