特殊毒性实验

特殊毒性实验1(三)特殊毒性试验123致突变试验致癌试验发育毒性和致畸作用试验(三)特殊毒性试验化学毒物体细胞生殖细胞致突变作用后果亲代子代致癌畸胎衰老动脉硬化未知疾病致畸致死存活负荷第一节：致突变试验(三)特殊毒性试验第一节：致突变试验鼠伤寒沙门菌营养缺陷型回复突变实验哺乳动物细胞基因突变试验致突变试验12345染色体畸形分析小鼠骨髓细胞微核试验单细胞凝胶电泳技术(三)特殊毒性试验鼠伤寒沙门菌营养缺陷型回复突变实验〔Ames试验〕原理组氨酸缺陷型菌(his-)野生型菌株(his+)正向突变回复突变诱导作用某化学物(三)特殊毒性试验鼠伤寒沙门菌营养缺陷型回复突变实验〔Ames试验〕原理(三)特殊毒性试验Ames试验结果评定阳性：诱发回变菌落数/自发回变菌落数≥2有剂量-反响关系或至少某一测试点有重复并有统计学意义结果应是至少两次独立试验的重复结果只要在一种试验菌株得到阳性结果，即认为受试物是致突变物；仅当四种试验菌株均得到阴性结果，才认为受试物是非致突变物(三)特殊毒性试验小鼠骨髓细胞微核试验微核：染色体无着丝点断片或因纺锤体受损伤而丧失的整个染色体在细胞分裂的后期仍留在子细胞的胞质内，成为一个或几个规那么的次核常用啮齿类动物骨髓多染红细胞(PCE)微核试验。PCE是红细胞成熟的一个阶段，此时有的红细胞的主核已排出，微核容易辩认观察的遗传学终点：染色体完整性改变和染色体别离改变(三)特殊毒性试验小鼠骨髓细胞微核试验Break

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loss(三)特殊毒性试验小鼠骨髓细胞微核试验(三)特殊毒性试验单细胞凝胶电泳试验〔彗星试验〕(三)特殊毒性试验单细胞凝胶电泳试验〔彗星试验〕(三)特殊毒性试验第二节：致癌试验哺乳动物细胞体外恶性转化试验哺乳动物长期致癌试验体外细胞转化试验是检测受试物对体外培养的哺乳动物细胞转化的遗传毒理试验。是将动物细胞在体外培养的环境下，将细胞暴露于致癌物，高度模拟致癌物在体内致癌的作用进行致癌物检测的一种技术，可以有效的体外筛查致癌物质的致癌活性。长期致癌试验常规选用大鼠和小鼠，刚离乳的实验动物。设三个试验组。以最大耐受剂量〔MTD〕为高剂量。原那么上试验期限要求长期或终生，一般小鼠1.5年，大鼠2年。观察有无肿瘤出现、肿瘤出现时间及死亡时间。(三)特殊毒性试验第二节：致癌试验动物选择大鼠小鼠（刚离乳）剂量分组3个组每组雌雄各50只途径期限小鼠1.5年大鼠2年结果分析肿瘤出现时间动物死亡时间病理学特征肿瘤发生率(三)特殊毒性试验第三节：发育毒性和致畸作用试验沙利度胺〔反响停〕事件(三)特殊毒性试验1957年10月Thalidomide正式投放欧洲市场，不久进入市场，在此后的不到一年内，反响停风行欧洲、非洲、澳大利亚和拉丁美洲，作为一种“没有任何副作用的抗妊娠反响药物〞，成为“孕妇的理想选择〞。反响停事件是药物史上的悲剧，因服用反响停而导致的畸形婴儿据保守估计大约有8000人，还导致大约5000到7000个婴儿在出生前就已经因畸形死亡。(三)特殊毒性试验反响停〔Thalidomide〕(三)特殊毒性试验第三节：发育毒性和致畸作用试验(三)特殊毒性试验致畸作用发育生物体死亡着床前死亡，早期死亡晚期死亡生长改变即生长迟缓生长发育指标比正常对照低结构异常指胎儿形态结构异常即畸形功能缺陷包括器官系统、生化免疫等功能的变化(三)特殊毒性试验12345着床前期器官形成期胎儿期围产期新生儿发育(三)特殊毒性试验反响停的敏感期：末次月经后第34到50天第35-37天：耳朵畸形和听力缺失第39-41天：胎儿上肢缺失第43-44天：双手成海豹样3指畸形第46-48天：胎儿拇指畸形(三)特殊毒性试验第三节：发育毒性和致畸作用试验传统实验体外筛选试验三段生殖毒性试验(三)特殊毒性试验动物选择大鼠家兔剂量分组3剂量组每组受孕雌性动物15-20只动物交配1:1或1:2大鼠第6天给受试物持续到第15天胎仔检查外观内脏软组织骨骼畸胎出现率结果评定传统实验(三)特殊毒性试验体外筛选试验大鼠全胚培养器官培养胚胎细胞微团培养水螅培养(三)