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35DB35/T2132—2023实验用秀丽隐杆线虫饲育技术ExperimentalCaenorhabditiselegans—Rearingtechnique2023-10-25发布2024-01-25实施福建省市场监督管理局发布I 4 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的1GB/T6682—2008分析实验室用3.2大肠埃希氏菌OP50EscherichiacoliOP50（E.coliOP50）3.424.2管理人员4.3饲育人员5.2设备及试剂耗材5.3区域布局5.4环境36.2保种7.2交配繁育4体中的比例为1‰～3‰。为获取足够的交配雄虫，宜将L4幼虫期线虫中的雌雄同体线虫置于30℃条件7.3繁育合格指标％～每只雌雄同体虫自交产250～300只后代，雄虫和雌雄同体虫杂交产9558.2液体饲养）；——培养过程应注意观察线虫生长状况，并8.3饲养的技术指标——生长温度在15℃~25℃之间，最常使用的培养温度是20℃;——相对湿度在40％～80%;6——固体饲养的线虫置于洁净的恒温培养箱中，液体饲养的线虫置于恒温摇床中，恒温摇床9.2微生物与寄生虫处理产生的生物废弃物和污水按照SN/T4835的规定进行无害化处理，其他实验室废弃物按照相关规定7A.1.3恒温摇床摇床材质无毒、无害、无放射性。配有温度控制系统，能够在10℃~60℃温度范围内调节箱内温A.1.5移液器A.1.6酒精灯A.1.7挑虫器A.1.10液氮罐A.2.1培养皿8无毒、无害、无放射性、耐腐蚀、无菌。常用规格有96孔板、2无毒、无害、无放射性、耐腐蚀、无菌。常用规格有A.2.5冻存管9），2.5g酪蛋白胨，17g琼脂粉，3gNaCl，加入975mL的双冷却至55℃后，加入下列溶液（胆固醇溶液过滤除菌，其余溶液在121°C、0.107MPa灭1.86g乙二胺四乙酸二钠（EDTA•Na20.69g七水硫酸亚铁（FeSO4•7H2O0.2g四水氯化锰），），），线虫是以OP50为食，OP50具有尿嘧啶缺陷，在NGM培养皿上不可无限生白杆菌LeucobacterVerde2微孢子虫Nematocidaparisii较小的体型、生长缓慢、子代数明显减少、注：被感染的线虫在显微镜下会呈现出特定的表型，能以此来
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