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生化实验血糖的测定1血糖及血糖水平的概念：2血糖：指血液中的单糖：葡萄糖血糖水平：血浆中葡萄糖浓度血糖总维持在恒定水平：3.9~6.7mmol/L调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。血糖水平异常：⑴高血糖及糖尿病；⑵低血糖3临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。4测定血糖的意义测定方法5无机化学法：Folin-Wu法有机化学法：邻甲苯胺法酶法：葡萄糖氧化酶法血糖测定的常用方法葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理（1）葡萄糖＋O2＋H2O葡萄糖酸＋H2O2葡萄糖氧化酶（GOD）（2）H2O2＋4-氨基安替吡啉＋苯酚过氧化物酶（POD）H2O＋红色醌式物质Trinder反应505nm光吸收法测定相对血糖浓度6分光光度计的工作原理7朗伯-比尔定律度的浓度比。朗伯定律：A=k1L比尔定律：A=k2C朗伯-比尔定律：如同时考虑液层厚度和溶液浓度对吸光影响，则吸光度与溶质的和溶液的厚度的乘积成正A=KLC8朗伯-比尔定律应用A标=KC标LA样=KC样L标准品法测定未知样品含量A标C样=

A样

×

C标9接通电源，调整波长。比色杯中加入空白及待测样品，并放入分光光度计中， 注意：加入样品量不超过比色杯体积的2/3。调模式为“透射比”，对空白对照进行调“0”（开盖） 和调“100”（闭盖）。调模式为“吸光度”，将空白对照调“0”，测定待测样 品的吸光度值。10分光光度计的使用1112葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测激

素对血糖浓度的影响方法13试剂标准管(ml)测定管1(ml)测定管2(ml)空白管(ml)血清样品–0.020.02–葡萄糖标准液0.02–––蒸馏水–––0.02酶酚混合试剂3.003.003.003.00实验步骤：（1）取4支试管，按下表加入试剂:充分混匀，37℃水浴中保温20min；冷却至室温后，505nm处比色比色方法：以空白管调零，读取标准管及测定管光密度值。14（2）计算：测定管葡萄糖含量（＝mmol/L）依据朗伯-比尔定律：A=KLC标准管葡萄糖浓度：5mmol/L测定管光密度标准管光密度×515正确使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液应占比色皿的2/3。血糖测定应在取血后2小时内完成，放置太久，血糖易分解，故使含量降低。酶酚混合液一般现用现配。16注意

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