甲状腺素在蛙类养殖中的应用

甲状腺素在蛙类养殖中的应用

青蛙不仅对农业生产有重要贡献，而且对其他药物也有很大的影响。例如，青蛙皮肤上有许多肿瘤，可以分泌毒素。这种毒素可以生产青蛙。它是各种药物的原料，具有止血、消炎、解毒、消肿的功效。此外,蛙类还可以作为医学、生物学中常用的试验动物,尤其在生理、药理研究中发挥重要作用。由于对蛙类需求量的日益增加,蛙类养殖业也随之发展起来,虽然蛙产卵量较多,但其自然变态率和幼蛙存活率很低,这是由于蝌蚪变态时体质过弱、捕食能力低下及对环境不适应造成的。甲状腺素是蝌蚪变态发育中的重要激素,能直接控制两栖动物的变态,对蝌蚪的变态发育具有促进作用,切除甲状腺的蝌蚪生长发育停滞,不能变态成蛙,若及时给予甲状腺素,又可恢复生长,发育成蛙。试验重点研究甲状腺素对蝌蚪变态发育的影响,观察在不同浓度甲状腺素作用下蝌蚪变态发育情况,旨在为日后研究甲状腺素对蝌蚪变态发育的影响及实际蛙类养殖中甲状腺素用量、用法等提供相关的理论依据。1实验材料和设备蝌蚪,采自吕梁市离石区上安村北川河中;甲状腺片1瓶、1L烧杯8个、培养皿8个、坐标纸1张、研钵1个、500mL量筒1个、玻璃棒1根、放大镜1个、自制捞鱼网1个、水桶1个、乳胶管1根,均由吕梁学院生命科学系实验室提供。2方法2.1湖的u3000四合立健全，让大学更物稳定蝌蚪采自吕梁市离石区上安村北川河中,用自制捞鱼网捞取蝌蚪放入盛有吕梁学院新校区人工湖湖水的桶中,带回实验室,置于阳光充足的地方。由于刚出生的蝌蚪体长较小(仅7mm左右),对其观察有一定困难,因此先将其在桶中饲养一段时间,用面包屑喂养,每天1次,每2d更换新鲜人工湖水1次。2.2蝌蚪的感染检测取8个1L烧杯并编号,每个烧杯中加入1L新鲜人工湖水,1号为空白对照组,2～8号为试验组,分别用浓度为0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5mg/L的甲状腺素处理,空白对照组不投放任何药物,试验组每天投放一定量的甲状腺片1次。试验选取体色正常、身体健硕、大小适中、长出后肢芽的蝌蚪160只,随机分为8组,每组20只,投药前测量体长,用小网将蝌蚪捞出放在培养皿中,再将培养皿放在坐标纸上,测量其体长。放入含有不同浓度甲状腺素的烧杯中,以不含甲状腺素的人工湖水饲养的蝌蚪作为空白对照组(见表1)。每天用乳胶管吸出水中剩余食物残渣、粪便,及时清理死亡的蝌蚪尸体,防止污染水质。每天饲喂1次并观察,测量体长并记录,每2d换水1次,记录体长变化、后肢前肢的出现时间、尾的变化、死亡情况等。以含有0mg/L甲状腺素作为空白对照,与其他试验组进行差异性检验,试验结果表明:试验前蝌蚪平均体长与其他试验组差异不显著,可以进行试验。3结果与分析3.1各组蝌蚪体长的变化由表2可知:投喂甲状腺素后各组蝌蚪体长变化相差较大,其中第2,3,4组蝌蚪体长增长较快,随后几组依次递减,其他组增长较少。空白对照组(第1组)蝌蚪体长的增长仅次于第2组,说明较低浓度的甲状腺素有利于蝌蚪的生长发育。试验前4d各组蝌蚪体长均有不同程度的增长,用各组体长平均数分别检验每天体长差异的显著水平。试验前4d各组蝌蚪体长增长相差不大,很难看出差异,说明甲状腺素并未刺激蝌蚪体长的快速增长,只是加快了蝌蚪的变态发育。到第8天各组蝌蚪体长差异最大,从第4天起各组蝌蚪体长(除空白对照组外)增长出现负值,表明此时蝌蚪正在褪尾,即将完成变态。说明各组蝌蚪在生长发育过程中体长的增长趋势基本一致,以各组的平均体长与时间的关系绘制成曲线,见图1。由图1可知:蝌蚪在出现后肢芽到出现前肢的这段时间生长较慢、体长增长较平缓,当前后肢均出现后蝌蚪开始退化,体长下降较快。3.2各组蝌蚪的发育情况研究发现,在高浓度甲状腺素溶液中蝌蚪生长发育较快,且随浓度的升高而加快,第4天时空白对照组中仅有1只蝌蚪出现后肢膝部,而第2,3,4,5,6,7,8组中已分别有3,3,5,2,7,8,5只出现后肢膝部,且直至试验结束(共17d)空白对照组蝌蚪仍未全部出现后肢膝部。随着后肢膝部出现,蝌蚪继续生长发育,头部开始变形,前肢逐渐出现。但是由于甲状腺素的长时间作用使其出现畸变,畸变的蝌蚪大多为只具有单个左侧前肢(只有第7天在第6组中出现了1只体长为26.8mm的蝌蚪,生长的是右侧前肢)。进一步生长后,另一前肢出现,逐步趋于正常,但新长出的前肢明显弱小于先出现的前肢。3.3对蝌蚪的急性毒性投药第1天空白对照组蝌蚪活动正常,试验组蝌蚪反应能力显著提高,兴奋性较强,说明甲状腺素提高了其神经系统的兴奋性。但在第3天后第6,7,8组的蝌蚪活动力明显下降,精神萎靡、兴奋性差。研究发现,按试验设计的药量连续投放4d后,高浓度试验组中的蝌蚪出现大量死亡(见表3),但其发育迅速,死亡蝌蚪几乎出现四肢。由表3可知:蝌蚪吸收大量甲状腺素后产生严重的甲亢现象,而大量的甲状腺素对分解代谢的促进作用更明显,这是由于大量的甲状腺素具有解耦联作用,使物质在氧化过程中产生的能量不能合成三磷酸腺苷(ATP),从而热能散失。由于体内缺乏可利用的能量,使蛋白质、糖元等的合成受阻。对蝌蚪来说表现为身体消瘦(体长锐减)、精神萎靡、新陈代谢率过高,但由于能量供应不足,最终导致死亡。4业缺陷,致畸,死亡率高甲状腺素对幼小动物生长发育有促进作用,直接控制蝌蚪的变态发育,投喂后加速了蝌蚪的变态,使其迅速生长发育,但体型较小。大剂量地连续投喂对蝌蚪有致畸、致死效应。不仅对于动物,根据上海第二医科大学附属瑞金医院妇产科与上海医科大学药理研究室收集近10年的国内外有关资料后发现,甲状腺制剂可使胎儿发生甲状腺肿及死亡率升