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文档简介
疫苗是将病原微生物,经过人工处理制成的用于应对传染病的自动免疫制剂。SARS-CoV-2S蛋白承担病毒与宿主细胞膜受体结合及膜融合功能E蛋白和M蛋白主要参与病毒的装配过程N蛋白包裹基因组形成核蛋白复合体研究表明:S蛋白决定了病毒的传播能力、传播范围,是抗病毒药物、疫苗设计、治疗性抗体、诊断方法开发的关键靶标,发挥着无可替代的作用。S蛋白新冠病毒结构模式图国家卫生健康委员会副主任曾益新介绍,现在是5条疫苗研发技术路线同步开展:灭活疫苗重组基因工程疫苗腺病毒载体疫苗核酸疫苗减毒流感病毒载体疫苗资料1:认识腺病毒腺病毒是一种线性双链DNA
病毒,对呼吸道、胃肠道等均可感染典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎等,宿主范围广,对人致病性低。资料2:腺病毒载体疫苗优点腺病毒载体转基因效率高,体外实验接近100%的转导效率;进入细胞内并不会整合到宿主细胞基因组,安全性高。在产能上,也可以通过细胞培养易于实现产业化。运载体——腺病毒S蛋白腺病毒(运载体)+人体内?腺病毒载疫苗体基本思路:用腺病毒作载体表达新冠病毒的S蛋白,通过腺病毒感染呼吸道,在呼吸道里表达S蛋白,S蛋白刺激人体产生抗体,从而发挥作用。技术支持:基因工程基因工程的基本操作程序1.目的基因的获取2.基因表达载体的构建3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定1.目的基因的获取S蛋白部分序列片段(国家生物信息中心获取):5’UAACAUCAC…………UCAAACUUUAC3’如何量产目的基因?逆转录酶:将RNA逆转录成cDNA核酸酶H:水解RNA-DNA杂交链上的RNADNA聚合酶:催化DNA子链的合成5’UAACAUCAC…………UCAAACUUUACATTGTAGTG…………AGTTTGAAATG5’TAACATCAC…………TCAAACTTTACATTGTAGTG…………AGTTTGAAATG3’ATTGTAGTG…………AGTTTGAAATGcDNA-RNA杂交链cDNA单链cDNA双链腺病毒资料1:认识腺病毒腺病毒是一种线性双链DNA
病毒,对呼吸道、胃肠道等均可感染典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎等,宿主范围广,对人致病性低。基因表达载体的构建复制起点复制起点包装信号毒性基因调控元件破坏宿主免疫系统基因调控元件1.对生物体无害2.多个酶切位点3.标记基因4.多种元件(启动子、终止子、复制原点等)基因表达载体的构建AdMax重组系统限制酶2切点限制酶3切点限制酶1切点将目的基因倒入受体细胞研究表明:腺病毒载体疫苗具有天然感染优势,免疫途径简便快捷。通常采用肌肉注射以及皮下注射,最近研究表明,喷雾免疫或者经过口服也能产生局部粘膜免疫应答,效果良好。目的基因的检测与鉴定目前陈薇院士团队疫苗的进展已经完成了人体试验二期正在积极开展三期试验。动物实验进行概念验证测试毒性、药理、药效人体试验一期,评价安全性人体
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