消毒灭菌与病原微生物实验室安全

消毒灭菌与病原微生物实验室安全微生物无处不在，医疗中如何创造无菌的条件？第一节消毒灭菌1、消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法

2、灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的3、防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法，不一定杀死微生物4、无菌（asepsis）：无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果5、无菌操作：防止细菌进入人体或其它物品的操作技术。

热力辐射物理方法

滤过超声波干燥

低温等

高效消毒剂化学方法

中效消毒剂

低效消毒剂

第二节消毒灭菌的方法二、物理消毒灭菌法：（一）热力消毒灭菌法：1、干热灭菌法：焚烧烧灼干烤同温度下湿热灭菌较干热效果好的原因：（1）菌体吸水，蛋白质凝固点降低。（2）湿热穿透力明显大于干热。（3）潜热存在，迅速提高温度，增加灭菌效力。2、湿热消毒灭菌法：巴氏消毒法

61.1/62.8℃15-30min71.7℃15-30秒

煮沸法

100℃5分钟间歇蒸气消毒法

100℃15—30分钟过夜（循环3次）

高压蒸汽灭菌法：最有效

包括芽胞

所有微生物。高压蒸汽灭菌基本原理：蒸汽，使水沸点升高，导致菌体蛋白质凝固变性失活。高压蒸汽灭菌主要对象：牛肉膏蛋白胨、营养肉汤等培养基、生理盐水、手术器械及耐高温、湿热的物品。高压灭菌几点注意事项：（1）通电前加适量的水；（2）冷空气排除（3）灭后，不可立即放气减压。（二）电磁波辐射杀菌法：紫外线波长在265-266nm杀菌能力最强,它能干扰DNA复制,导致细菌变异或死亡,但穿透力弱,故只能用于房间空气和物品表面的消毒.1、日光与紫外线：2、电离辐射

包括β和γ射线，电离射线具有较高的能量，对各种细菌均有致死作用，机制是干扰DNA合成、破坏细胞膜、引起酶系统紊乱等，主要用于一次性医用塑料制品消毒，食品、药品等消毒灭菌，而不破坏其营养。

波长1-1000mm的电磁波，可穿透玻璃、陶瓷和塑料，但不能穿透金属表面。主要用于食品、非金属器械、检验室用品等消毒，原理是极性分子摩擦生热，内外升温达到杀毒灭菌的目的。3、微波二、物理消毒灭菌法：（三）滤过除菌法：主要用于不耐高温的血清、抗毒素、抗生素、药液的除菌。（四）干燥与低温抑菌法：三、化学消毒灭法：（一）常用化学消毒剂的种类及用途（二）化学消毒剂的杀菌机制：

1、使菌体蛋白变性或凝固；

2、干扰微生物的酶系统和代谢；

3、损伤细胞膜；种类常用浓度用途作用机制1.高效消毒剂含氯消毒剂；漂白粉次氯酸钠

过氧乙酸

过氧化氢

戊二醛甲醛（福尔马林）

有效氯量:4g/L

有效氯量:100-1000g/L0.2%-1%

3%-25%

2%

35%-40%饮水消毒皮肤、物体表面、排泄物、污水皮肤、物表面、空气

皮肤、物表面、空气

医疗器械

医疗，防腐氧化作用,蛋白质变性与沉淀,灭活酶类

氧化作用,蛋白质沉淀菌体蛋白质及核酸烷基化

常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制常用消毒剂的种类、浓度、用途及作用机制（一）种类常用浓度用途作用机制2.中效消毒剂乙醇

碘酊

碘伏3.低效消毒剂苯扎溴铵（新洁尔灭）

氯已定（洗必泰）高锰酸钾

70%-75%

20g碘/L75%乙醇

1-2mg游离/L0.4%-1.6%溶液

0.5%-4.0%1-10g/L

医疗器械、皮肤

皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、食具、蔬菜、水果

蛋白质变性凝固、干扰代谢

第三节消毒灭菌的运用（一）医疗器械（二）室内空气（三）手和皮肤（四）黏膜（五）病人排泄物与分泌物（六）病人污染物品（七）饮水（八）环境第四节影响消毒灭菌效果的因素1、消毒剂的性质、浓度和作用时间2、细菌的种类与生活状态（P44）3、温度4、酸碱度5、有机物复习思考题？1.杀灭芽孢最常用和有效的方法是（）A、紫外线照射B、煮沸5minC、巴氏消毒法D、高压蒸汽灭菌法2.灭菌方法错误的是（

）A、手术室空气-紫外线B、排泄物-漂白粉C、饮水-氯气D、含血清培养基-高压蒸汽灭菌DD3.常用于基础培养基灭菌（）A、高压蒸汽灭菌法B、紫外线照射法C、滤过除菌法D、巴氏消毒法4、常用于手术器械的灭菌（）A、紫外线照射法B、高压蒸汽灭菌C、滤过除菌法D、巴氏消毒法AB5.关于紫外线，说法错误的是____________。(第03章)a.其杀菌作用与波长有关b.可损坏细菌的DNA构型c.265-266nm杀菌作用最强d.其穿透力弱，故对人体无损害e.紫外线适用空气和物体表面的消毒6.常用于空气或物体表面的消毒____________。(第03章)a.高压蒸气灭菌法b.紫外线照射法c.滤过除菌法d.巴氏消毒法e.干烤法db7.将牛奶加热62℃30分钟的目的是____________。a.使牛奶中的蛋白质变性